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        B21608，纯度：≥98％）、鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷对                   谱条件：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式为 ESI 、ESI 模
        照品（批号：B25488，纯度：≥98％）、葛花苷对照品（批                     式；毛细管电压为3.0 kV；锥孔电压为30 V；萃取电压为
        号：B25444，纯度：≥98％）均购自上海源叶生物科技有                      3.0 V；离子源温度为120 ℃；脱溶剂气温度为400 ℃；锥
        限公司；甲醇、乙腈为色谱纯，乙醇为分析纯，水为纯                           孔气流量为 50 L/h；脱溶气流量为 900 L/h；碰撞能量为
        化水。                                                20～50 eV，离子能量为1 V；质量扫描范围为质荷比（m/z）
        1.3 药材及相关工业废料                                      100～1 000；数据采集方式和模式为Centroid。
            粉葛样品于2018年12月采自江西绿色生态葛研究                       2.3.2 HPLC 试验条件        色谱柱为 Diamonsil C18 （250
        所赣葛2号种植基地，经江西省中医药研究院虞金宝研                           mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为 0.1％磷酸水溶液（A）-乙
        究员鉴定为甘葛藤（P. thomsonii Benth.）的一年生栽培                腈（B），梯度洗脱（0～2 min，85％A；2～10 min，85％A→
        品种；葛花为该品种的花，样品于 2018 年 9 月采集。将                     80％A；10～14 min，80％A→70％A；14～20 min，70％
        葛根（即该品种的块根，下同）样品采集后，洗净，除去                          A→68％ A；20～28 min，68％ A→40％ A；28～30 min，
        茎、须根和葛根头（即该品种的繁殖器官），将剩余块根                          40％A→85％A；30～31 min，85％A）；柱温为 35 ℃；流
        部分平分为两份，其中一份不去皮，另一份作去皮处理，                          速为1.0 mL/min；检测波长为250 nm；进样量为10 μL。
        两份均经渣浆分离机得到浆液和葛根渣；沉淀浆液中的                           2.4 含量测定方法学考察
        葛粉（即工业生产目标产品）后，所剩上清液即为葛根工                          2.4.1  线性关系及灵敏度考察            取“2.1”项下混合对照
        业废水。将葛根（带皮或去皮）、葛根皮、葛花、葛须根、                         品溶液，分别以 80％甲醇稀释成系列线性对照溶液，按
        葛茎、葛根头、葛根渣（带皮或去皮）于 60 ℃鼓风干燥                       “2.3.2”项下色谱条件分别进样 10 μL，记录峰面积。以
        后，粉碎成粗粉；葛根工业废水（带皮或去皮）于蒸发皿                          线性对照溶液中相应成分的质量浓度（X，μg/mL）为横
        中挥干，得相应干物质，置干燥器中备用。                                坐标、峰面积（Y）为纵坐标绘制标准曲线，求得其回归方
        2 方法与结果                                            程及线性范围。取最低质量浓度线性对照溶液，用80％
        2.1  混合对照品溶液的制备                                    甲醇逐级稀释，并依法进样测定，当信噪比分别为 3 ∶ 1、
            分别精密称取葛根素、大豆苷、鸢尾黄素-7-O-木糖                      10∶1时测得检测限（LOD）和定量限（LOQ）。结果显示，
        葡萄糖苷、染料木苷、鸢尾苷、大豆苷元、葛花苷等对照                          7 个待测成分在相应质量浓度范围内线性关系良好，且
        品各适量，置于同一量瓶中，用 80％甲醇配制成质量浓                         灵敏度较高，详见表1。
        度分别为 0.294、0.162、0.171、0.183、0.184、0.260、0.172          表1   线性回归方程、线性范围及LOD、LOQ
        mg/mL的混合对照品溶液。                                     Tab 1   Linear regression equation， linear range，
        2.2  供试品溶液的制备                                              LOD and LOQ
            精密取葛根（带皮或去皮）、葛根皮、葛花、葛须根、                                                       线性范围，  LOD，  LOQ，
                                                           待测成分             回归方程      R  2
        葛茎、葛根头、葛根渣（带皮或去皮）样品粗粉 1 g，置于                                                       μg/mL  μg/mL μg/mL
                                                           葛根素            Y＝21.458X+33.955  1.000 0  1.47～294  0.11  0.17
        100 mL 具塞锥形瓶中，精密加入 60％乙醇 50 mL，称定                  大豆苷            Y＝31.391X+19.118  1.000 0  0.81～162  0.17  0.22
        质量，90 ℃下回流 1 h，再次称定质量，用 60％乙醇补足                    鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷 Y＝17.47X+11.01  1.000 0  0.855～171  0.23  0.32
        减失的质量；趁热以滤纸滤过，合并滤液，再以 0.45 μm                      染料木苷           Y＝34.055X+24.021  1.000 0  0.915～183  0.22  0.27
                                                           鸢尾苷            Y＝25.713X+17.654  1.000 0  0.92～184  0.26  0.31
        微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。取葛根工业                           大豆苷元           Y＝48.217X+52.593  1.000 0  1.3～260  0.28  0.31
        废水干物质（带皮或去皮）适量，用60％乙醇适量复溶后                         葛花苷            Y＝18.314X+10.223  1.000 0  0.86～172  0.21  0.28
        同法滤过，即得供试品溶液（浓度换算后相当于等量原                           2.4.2  精密度试验       取“2.1”项下混合对照品溶液，按
        药材）。                                              “2.3.2”项下色谱条件连续进样6次，记录色谱图。结果，
        2.3  粉葛加工过程废弃物中黄酮类化学成分定性和定                         葛根素、大豆苷、鸢尾黄素-7-O-木糖葡萄糖苷、染料木
        量分析                                                苷、鸢尾苷、大豆苷元、葛花苷的峰面积 RSD 分别为
            采 用 UPLC-Q-TOF-MS 法 进 行 定 性 分 析 ，采 用           0.24％、0.14％、0.06％、0.09％、0.09％、0.11％、0.08％
        HPLC法进行定量测定。                                       （n＝6），表明仪器精密度良好。
        2.3.1 UPLC-Q-TOF-MS试验条件 （1）色谱条件：色谱                 2.4.3  重复性试验       取葛茎样品（作为粉葛加工过程废
        柱 为 Waters ACQUITY UPLC BEH C18（100 mm × 2.1       弃物代表样品）6份，每份1 g，按照“2.2”项下方法制备供
        mm，1.7 μm）；流动相为0.1％甲酸水溶液（A）-乙腈（B），                 试品溶液，再按“2.3.2”项下色谱条件进样，记录色谱图，
        梯度洗脱（0～2 min，3％B→10％B；2～10 min，10％B→               并按标准曲线法计算含量。结果，葛根素、大豆苷、染料
        40％B；10～14 min，40％B→58％B；14～21 min，58％B→           木苷、大豆苷元的含量 RSD 分别为 2.31％、1.28％、
        90％B；21～22 min，90％B；22～24 min，90％B→3％B）；           2.01％、1.92％（n＝6），表明方法重复性良好（其余3种成
        流速为 0.4 mL/min；柱温为 30 ℃；进样量为 2 μL。（2）质             分在葛茎样品中未检出，略去，下同）。


        中国药房    2020年第31卷第4期                                               China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4  ·453  ·
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