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1 200 1 200 1 200 1 200 1 200
960 960 960 960 960
24 h counts 720 counts 720 counts 720 counts 720 counts 720
480
480
480
480
480
240 240 240 240 240
0 0 0 0 0
0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600
PI PI PI PI PI
1 200 800 800 800 800
960 640 640 640 640
counts 480 counts 320 counts 320 320 counts 320
48 h 720 480 480 counts 480 480
240 160 160 160 160
0 0 0 0 0
0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600
PI PI PI PI PI
1 000 800 800 800 800
800 640 640 640 640
counts 400 counts 320 counts 320 counts 320 320
72 h 600 480 480 480 counts 480
200 160 160 160 160
0 0 0 0 0
0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600 0 200 400 600
PI PI PI PI PI
A. 阴性对照组 B. YS-F 3 μg/mL组 C. YS-F 9 μg/mL组 D. YS-F 27 μg/mL组 E. YS-F 81 μg/mL组
图3 美洲大蠊提取物YS-F对A549细胞周期影响的流式细胞图
Fig 3 Flow cytometries of the effects of P. americana extract YS-F on the cycle of A549 cells
10 4 10 4 10 4 10 4 10 4
10 3 10 3 10 3 10 3 10 3
JC-1 monomers 10 2 JC-1 monomers 10 2 JC-1 monomers 10 2 JC-1 monomers 10 2 JC-1 monomers 10 2
10 1 10 1 10 1 10 1 10 1
10 0 10 0 10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
JC-1 aggregates JC-1 aggregates JC-1 aggregates JC-1 aggregates JC-1 aggregates
A. 阴性对照组 B. YS-F 3 μg/mL组 C. YS-F 9 μg/mL组 D. YS-F 27 μg/mL组 E. YS-F 81 μg/mL组
图4 美洲大蠊提取物YS-F对A549细胞线粒体膜电位变化影响的流式细胞图
Fig 4 Flow cytometries of the effects of P. americana extract YS-F on the change of mitochondrial membrane
potential of A549 cells
表4 美洲大蠊提取物YS-F对A549细胞线粒体膜电位 24 h对G2/M期细胞比例以及YS-F 3 μg/mL作用48 h对
变化的影响(x±±s,n=3,%%) 细胞线粒体膜电位降低率均无显著影响;其余各剂量组
Tab 4 Effects of P. americana extract YS-F on the 各时间点凋亡早期、凋亡晚期和坏死早期、坏死晚期细
change of mitochondrial membrane potential 胞百分比以及Sub-G0/G1期、S期细胞比例均较阴性对照
of A549 cells(x±±s,n=3,%%) 组显著升高,G0/G1期、G2/M期细胞比例均较阴性对照组
组别 线粒体膜电位降低率 组别 线粒体膜电位降低率 显著降低;且药物作用48、72 h时各剂量组凋亡早期、凋
阴性对照组 2.73±0.05 YS-F 27 μg/mL组 29.25±0.18 *# 亡晚期和坏死早期、坏死晚期细胞百分比(除 YS-F 9
YS-F 3 μg/mL组 3.18±0.15 YS-F 81 μg/mL组 46.36±0.19 *#Δ
YS-F 9 μg/mL组 14.59±0.22 * μg/mL 作用 72 h 时的坏死晚期细胞百分比外)以及
*
#
注:与阴性对照组比较,P<0.01;与 YS-F 9 μg/mL 组比较,P< Sub-G0/G1期、G2/M 期(除 48 h YS-F 3、9 μg/mL组外)细
Δ
0.01;与YS-F 27 μg/mL组比较,P<0.01 胞比例均显著高于同组 24 h,而 G0/G1期、S 期、G2/M 期
Note:vs. negative control group, P<0.01;vs. 9 μ g/mL YS-F (除 48 h YS-F 9 μg/mL 组外)细胞比例均显著低于同组
*
Δ
#
group,P<0.01;vs. 27 μg/mL YS-F group,P<0.01
24 h;药物作用72 h时各剂量组凋亡早期、凋亡晚期和坏
本研究进一步采用流式细胞术检测了不同剂量 死早期、坏死晚期细胞百分比(除 YS-F 27 μg/mL 作用
YS-F 对 A549 细胞凋亡、周期、线粒体膜电位变化的影 72 h时的凋亡晚期和坏死早期细胞百分比以及YS-F 3、
响。结果显示,YS-F 3 μg/mL 作用 24 h、YS-F 9 μg/mL 9 μg/mL 作用 72 h 时的坏死晚期细胞百分比显著降低
作用 72 h 对坏死晚期细胞百分比,YS-F 3 μg/mL 作用 外)以及 S 期(除 YS-F 3 μg/mL 组外)、Sub-G0/G1期细胞
·406 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 中国药房 2020年第31卷第4期