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Graphpad Prism 5.0软件作图。计量资料均以x±s表示， 且药物作用 48、72 h 时的上述指标（除 YS-F 9 μg/mL 作
组间比较采用单因素方差分析。P＜0.05为差异有统计 用 72 h 时的坏死晚期细胞百分比外）均显著高于同组
学意义。 24 h，药物作用72 h（除YS-F 9 μg/mL组凋亡晚期和坏死
3 结果 早期细胞百分比无显著变化，YS-F 27 μg/mL 组凋亡晚
3.1 美洲大蠊提取物 YS-A～H 对 A549 细胞增殖的影 期和坏死早期细胞百分比以及 YS-F 3、9 μg/mL 组坏死
响及活性部位的筛选结果 晚期细胞百分比显著降低外）均显著高于同组48 h（P＜
美洲大蠊提取物YS-A～H的IC50值分别为（95.25± 0.01），详见图2、表2。
8.42）、（129.93 ± 7.24）、（221.28 ± 12.68）、（275.39 ± 3.3 美洲大蠊提取物YS-F对A549细胞周期的影响
14.87）、（276.76 ± 16.32）、（31.90 ± 5.34）、（163.15 ± 与阴性对照组比较，除 YS-F 3 μg/mL 作用 24 h 对
6.97）、（122.81±8.36）μg/mL，详见图 1。其中，YS-F 的 G2/M 期细胞比例无显著影响（P＞0.05）外，其余各剂量
抑制作用最强，故以其作为活性部位进行后续试验。 组各时间点 G0/G1 期、G2/M 期细胞比例均显著降低，
400 Sub-G0/G1期、S期细胞比例均显著升高；且药物作用48、
72 h 时各剂量组 G 0/G 1 期、S 期、G 2/M 期（除 48 h YS-F 9
300 μg/mL 组外）细胞比例均显著低于同组 24 h，各剂量组
IC50，g/mL μ 200 Sub-G0/G1期、G2/M 期（除 48 h YS-F 3、9 μg/mL 组外）细
胞比例均显著高于同组24 h；药物作用72 h时各剂量组
G0/G1期、G2/M期细胞比例均显著低于同组48 h，S期（除
100
72 hYS-F 3 μg/mL 组外）、Sub-G0/G1期细胞比例均显著
0 高于同组48 h（P＜0.01），详见表3、图3。
YS-1 YS-B YS-C YS-D YS-E YS-F YS-G YS-H
洗脱部位 3.4 美洲大蠊提取物 YS-F 对 A549 细胞线粒体膜电位
图1 美洲大蠊提取物YS-A～H对A549细胞增殖抑制 的影响
的IC50值 与阴性对照组比较，YS-F 9、27、81 μg/mL组细胞线
Fig 1 IC50 values of proliferation inhibition of A549 粒体膜电位降低率均显著升高，且YS-F 27、81 μg/mL显
cells by YS-A-H of P. americana extract 著高于 YS-F 9 μg/mL 组，YS-F 81 μg/mL 组显著高于
与阴性对照组比较，YS-F各剂量组细胞各时间点的 YS-F 27 μg/mL组（P＜0.01），详见图4、表4。
抑制率均显著升高，且药物作用 48、72 h 时的抑制率显 4 讨论
著高于同组24 h，作用72 h时的抑制率均显著高于同组 根据国际癌症研究机构的统计数据显示，肺癌在世
48 h（P＜0.01），详见表1。 界范围内的发病率呈逐年上升趋势，已成为严重的公共
表1 美洲大蠊提取物YS-F对A549细胞增殖的抑制率 卫生问题 。肺癌的临床治疗以手术为主，但术后复发
[9]
（x±±s，n＝3，％％） 性高，患者远期生存率偏低、疗效欠佳 。因此，寻找毒
[10]
Tab 1 Inhibitory rates of P. americana extract on the 副作用低且治疗效果好的肺癌治疗药物极有必要。据
proliferation of A549 cells（x±±s，n＝3，％％） 相关学者报道，美洲大蠊提取物具有抑制人及小鼠肺癌
组别 24 h 48 h 72 h 细胞增殖、诱导细胞凋亡并阻滞其生长周期等作用 [11-12] ，
阴性对照组 0 0 0 故推测美洲大蠊提取物具有一定的促凋亡作用。为此，
YS-F 3 μg/mL组 9.88±0.40 ＊ 19.12±0.48 ＊# 32.86±0.35 ＊#Δ
YS-F 9 μg/mL组 23.18±0.59 ＊ 37.14±0.53 ＊# 59.01±0.14 ＊#Δ 本课题组开展了相关研究。
YS-F 27 μg/mL组 27.06±0.62 ＊ 48.25±0.29 ＊# 83.87±0.36 ＊#Δ 细胞凋亡是抑制肿瘤生长的主要方式之一，其中线
YS-F 81 μg/mL组 35.35±0.38 ＊ 68.59±0.42 ＊# 90.81±0.48 ＊#Δ
[13]
粒体是调控细胞凋亡的主要细胞器之一 。本研究首
＊
#
注：与阴性对照组比较，P＜0.01；与同组 24 h 比较，P＜0.01；与
先采用MTT法对美洲大蠊醇提物的不同体积分数甲醇
同组48 h比较，P＜0.01
Δ
＊
Note：vs. negative control group， P＜0.01；vs. same group for 24 洗脱部位的增殖抑制活性进行了筛选。结果显示，醇提
#
h，P＜0.01；vs. same group for 48 h，P＜0.01 物70％甲醇洗脱部位（YS-F）的IC50值最低，即增殖抑制
Δ
3.2 美洲大蠊提取物YS-F对A549细胞凋亡的影响 活性最强，故以 YS-F 作为活性部位进行后续研究。结
与阴性对照组比较，除 YS-F 3 μg/mL 作用 24 h、 果显示，以不同剂量 YS-F 作用于 A549 细胞后，各剂量
YS-F 9 μg/mL 作用 72 h 对坏死晚期细胞百分比无显著 组各时间点的细胞抑制率均较阴性对照组显著升高，且
影响（P＞0.05）外，其余各剂量组各时间点凋亡早期、凋 48、72 h的抑制率显著高于同组24 h，72 h时的抑制率显
亡晚期和坏死早期、坏死晚期细胞百分比均显著升高， 著高于同组48 h，呈时间依赖性。

·404 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 中国药房 2020年第31卷第4期