Page 78 - 2020年2月第31卷第3期
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为指标,采用 SPSS 22.0 软件对 20 批次的丫蕊花样品进                   峰的 VIP>重楼皂苷Ⅵ色谱峰的 VIP,其中重楼皂苷Ⅶ
        行聚类分析,结果见图2。                                        色谱峰的VIP>1,表明重楼皂苷Ⅶ为丫蕊花药材的主要
                               距离系数                         差异性成分。3种皂苷成分的VIP图见图4。
                  0     5     10    15    20     25
               S15
               S19                                                                     10
               S17                                                2                9  Ⅱ
                S8
               S14    A                                           1                 11  12
                S1
               S16                                                            5  4  3
                S7                  1                           t[2]  0       6 Ⅲ  13              1
               S18                                                             15  19  17  14 2  20 Ⅰ  16  8
                S2
              批次  S13                                            -1              7  18
               S20    B
                S6                                               -2
                S3
                S5
                S4    C                                               -3  -2   -1    0   1    2    3
                S9                  2                                               t[1]
               S10
               S11                                                图3 20批丫蕊花样品的PLS-DA得分图
               S12    D
                                                            Fig 3 PLS-DA score plot of 20 batches of Y. thibetica
        图 2 20 批丫蕊花样品中 3 种皂苷成分含量的聚类分
                                                                  samples
              析图
        Fig 2 Cluster analysis plot of 3 saponin contents in 20   1.8
               batches of Y. thibetica samples                    1.6
                                                                  1.4
            由图 2 显示,20 批次的丫蕊花样品一共聚为两大                             1.2
                                                                  1.0
        类,其中批次 S1~S8、S13~S20 聚为第一大类,批次                           VIP  0.8
        S9~S12 聚为第二大类。随着距离系数的减小,第一大                               0.6
                                                                  0.4
        类可继续分为A、B两类,第二大类继续分为C、D两类,                                0.2
        四类区分明显,直接显示出不同产地的丫蕊花存在品质                                  0   重楼皂苷Ⅶ       重楼皂苷Ⅱ      重楼皂苷Ⅵ
        差异。分析同一地区不同部位样品的类别发现,同一地                                        图4 3种皂苷成分的VIP图
        区丫蕊花的全草部位和地下部位未被明显区分,表明全                                       Fig 4  VIP plot of 3 saponins
        草部位和地下部位中3种皂苷成分未出现明显差异。                             3 讨论
        2.12  PLS-DA                                        3.1  提取方法的筛选

            PLS-DA是一种可靠、稳健的判别分析统计方法,适                           笔者前期对丫蕊花药材的提取溶剂(甲醇、乙醇)、
        用于样品质量控制及类别预测,可显示出样本之间差异                            提取工艺(水浴回流、超声)、提取时间(15、30、60 min)等
        主要是由哪些变量引起的。为了更好地分析 20 批次丫                          影响因素进行考察。结果,以乙醇回流超声30 min提取
        蕊花之间重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量的差异,本研究选取该                           后,色谱峰数量及响应值均不再增加,提示所测成分已
        20批次样品为观察对象,记为Y变量,以3种皂苷成分含                          基本提取完全,且该提取工艺简单、耗时短、易操作、毒
        量记为 X 变量,采用 SIMCA-P 11.5 软件进行 PLS-DA。               副作用小,故以此作为本研究丫蕊花药材的提取方法。
        结果,监督模型解释率为 0.786、模型预测率为 0.705,两                    3.2  不同产地丫蕊花不同部位的差异
        者相近且大于0.5,证明模型稳定、预测能力较好。20批                             本研究结果显示,不同产地丫蕊花的重楼皂苷Ⅱ、
        次丫蕊花样品被分成3区,批次S1、S2、S8、S14、S16、S20                  Ⅵ、Ⅶ成分含量存在差异,其中彭州(地下部位)的丫蕊
        被分为Ⅰ区,批次 S9~S12 被分为Ⅱ区,其余样品被分                        花中重楼皂苷Ⅶ含量最高,达到 12.36 mg/g,屏山(地下
        为Ⅲ区,3个区区分明显,直观显示出样品间的差异。分                           部位)的丫蕊花中重楼皂苷Ⅱ含量最高,达到1.88 mg/g,
        析同一地区丫蕊花全草部位和地下部位中3种皂苷成分                            少数地区的丫蕊花药材未检出重楼皂苷Ⅵ。分析聚类
        含量,两者未显示出显著性差异。以含量较高的重楼皂                            分析和 PLS-DA 结果显示,虽然二者的分区结果稍有区
        苷Ⅶ为主成分 1、重楼皂苷Ⅱ为主成分 2,以其投影的得                         别,但均将样品S9~S12聚为一类,原因可能是这4批次
        分值t[1]、t[2]为坐标生成PLS-DA得分图。20批丫蕊花                    的丫蕊花中重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量均比较高,与其余批
        样品的PLS-DA得分图见图3。                                    次丫蕊花样品区分明显,可间接说明彭州和大邑县非常
            进一步分析重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的变量权重重要性                          适合丫蕊花药材的生长及栽培,且地下部位和全草部位
        排序值(VIP),筛选出影响样品分区的主要差异性成                           中 3 种皂苷成分的含量差异不明显;VIP 结果提示重楼
        分。结果,重楼皂苷Ⅶ色谱峰的 VIP>重楼皂苷Ⅱ色谱                          皂苷Ⅶ为丫蕊花药材的主要差异性成分。


        ·328  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 3                                   中国药房    2020年第31卷第3期
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