Page 76 - 2020年2月第31卷第3期

from Pengzhou city and Dayi county was the highest. CONCLUSIONS：The established method is simple，convenient and
sensitive. It can be used for the content determination of 3 saponins in Y. thibetica. The content of active components is higher and
the quality is better in Y. thibetica from Pengzhou city and Dayi county.
KEYWORDS HPLC；Ypsilandra thibetica；Polyphyllin Ⅱ；Polyphyllin Ⅵ；Polyphyllin Ⅶ；Cluster analysis；PLS-DA analysis

丫蕊花（Ypsilandra thibetica Franch）为百合科丫蕊 2.2 溶液的制备
花属植物，据《中华本草》记载，丫蕊花在民间以全草入 2.2.1 混合对照品溶液 精密称取重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ
药，具有清热、解毒、止血、活血、散结、利小便之功效，主 各对照品适量，分别置于 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并
治瘰疬、小便不利、水肿 [1-3] 。研究发现，丫蕊花主要成分 稀释至刻度，分别制成含重楼皂苷Ⅱ1.02 mg/mL、重楼
为甾体皂苷，迄今为止，已报道的从丫蕊花中分离出的 皂苷Ⅵ 0.14 mg/mL、重楼皂苷Ⅶ 1.68 mg/mL 的对照品
甾体皂苷类化合物有50余种，还分离出了黄酮类化合物 贮备液。分别精密量取重楼皂苷Ⅱ对照品贮备液1 mL、
和糖酯类化合物 [4-6] ，丫蕊花提取物具有与重楼提取物相 重楼皂苷Ⅵ对照品贮备液1 mL、重楼皂苷Ⅶ对照品贮备
似的药理活性 。由于目前重楼的市场年消耗量远超出 液 2 mL，置于同一 10 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至
[7]
其年生长量，加之重楼资源再生周期长，为此有必要从 刻度，摇匀，制成含重楼皂苷Ⅱ0.102 mg/mL、重楼皂苷
其他植物资源中寻找重楼的替代品。基于此，本文参照 Ⅵ 0.014 mg/mL、重楼皂苷Ⅶ0.336 mg/mL的混合对照品
[8]
2015 年版《中国药典》（一部）重楼的质量控制方法 和 溶液。
文献方法 [9-12] ，建立丫蕊花中重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量 2.2.2 供试品溶液 取丫蕊花粉末（过三号筛）约 0.50
测 定 方 法 ，并 采 用 聚 类 分 析 和 偏 最 小 二 乘 判 别 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25 mL，
（PLS-DA）分析10个产地丫蕊花全草部位和地下部位中 密塞，称定质量后，加热回流30 min，放冷，再称定质量，
上述3种皂苷成分含量的差异，为丫蕊花药材的质量控 用乙醇补足减失的质量，摇匀，过滤，取续滤液，即得供
制提供参考，也为丫蕊花替代重楼奠定了基础。 试品溶液。
1 材料 2.3 系统适用性试验
1.1 仪器 精密量空白对照液（甲醇溶液）、混合对照品溶液和
Agilent 1100 型高效液相色谱（HPLC）仪（美国 Agi- 供试品溶液，按照“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色
lent公司）；BP 211D型十万分之一电子天平（德国Sarto- 谱图。结果，重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ与其他组分色谱峰的分
rius 公司）；KQ-500E 型超声波清洗器（昆山市超声波仪 离度均大于1.5，理论板数均大于5 000，空白对照对其测
器有限公司）；Integral 3 型超纯水机（美国 Millipore 公 定无干扰。高效液相色谱图见图 1（空白对照溶液图
司）。 略）。

1.2 药品与试剂 重楼皂苷Ⅶ
40
丫蕊花采摘于四川屏山、什邡、宝兴、古蔺、彭州、大
30
重楼皂苷Ⅱ
邑、兴文、泸州、仁寿、浦江等地，由四川省中医药科学院 mAU 20 重楼皂苷Ⅵ
资源与种植研究所张美副研究员鉴定为百合科丫蕊花属 10
0
植物丫蕊花的全草或根茎，依次记为批次S1～S20；重楼
－10
皂苷Ⅱ对照品（批号：MUST-17021906，纯度：＞98％）、重 0 5 10 15 20 25 30
时间，min
楼皂苷Ⅵ对照品（批号：MUST-17052210，纯度：＞98％）、 A.混合对照品溶液
重楼皂苷Ⅶ对照品（批号：MUST-17052211，纯度：＞98％）
70
均购自成都曼斯特生物科技有限公司；乙腈为色谱纯； 60
50
乙醇、甲醇为分析纯；水为超纯水。 mAU 40 重楼皂苷Ⅶ
2 方法与结果 30
20
重楼皂苷Ⅵ 重楼皂苷Ⅱ
10
2.1 色谱条件 0
色谱柱：Kromasil C18 （150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动 0 5 10 15 20 25 30
时间，min
相：乙腈（A）-水（B），梯度洗脱（0→30 min，30％A→60％ B.供试品溶液
A）；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；检测波长：203 nm；进 图1 高效液相色谱图
样量：10 μL。 Fig 1 HPLC chromatograms

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