Page 77 - 2020年2月第31卷第3期

2.4 线性关系考察 样测定，代入回归方程计算重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量，
精密吸取“2.2.1”项下混合对照品溶液 0.5、1、2、5、 平行测定2次，取均值，结果见表3。
10、15、20 μL，按照“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰 表2 加样回收率试验结果

面积。以待测成分进样量为横坐标（x）、峰面积为纵坐 Tab 2 Results of recovery tests
标（y）进行线性回归分析，结果见表1。 取样量， 待测成分已 加入量， 测得量， 回收率，％
待测成分
表1 线性关系考察结果 mg 知含量，mg mg mg 计算值 平均值 RSD
重楼皂苷Ⅱ 251.88 0.197 0.204 0.404 101.49 99.29 1.17
Tab 1 Results of linear relationship investigation 237.83 0.186 0.204 0.386 98.05
263.47 0.206 0.204 0.408 99.00
待测成分 回归方程 r 线性范围，μg
重楼皂苷Ⅱ y＝304.9x+0.869 0.999 7 0.051～2.04 253.74 0.198 0.204 0.401 99.30
247.65 0.194 0.204 0.396 99.19
重楼皂苷Ⅵ y＝459.3x+0.703 0.999 5 0.007～0.28 257.80 0.202 0.204 0.403 98.73
重楼皂苷Ⅶ y＝339.1x-0.486 0.999 9 0.168～6.72
重楼皂苷Ⅵ 251.88 0.024 0.028 0.053 103.83 101.38 2.64
2.5 检测限与定量限考察 237.83 0.023 0.028 0.050 97.88
263.47 0.025 0.028 0.054 103.47
取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，以甲醇逐级稀
253.74 0.024 0.028 0.053 103.20
释，按照“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。当 247.65 0.024 0.028 0.052 101.69
信噪比为 3 ∶ 1、10 ∶ 1 时，分别测得检测限和定量限。结 257.80 0.024 0.028 0.052 98.25
重楼皂苷Ⅶ 251.88 1.830 1.680 3.511 100.06 99.64 0.75
果，重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的检测限分别为 1.92、1.75、1.87 237.83 1.728 1.680 3.405 99.83
ng，定量限分别为6.40、5.87、6.23 ng。 263.47 1.914 1.680 3.577 98.98
253.74 1.843 1.680 3.514 99.44
2.6 精密度试验 247.65 1.799 1.680 3.458 98.74
精密吸取“2.2.1”项下混合对照品溶液 10 μL，按照 257.80 1.873 1.680 3.566 100.78

“2.1”项下色谱条件连续进样 6 次，记录峰面积。结果， 表3 20批丫蕊花样品含量测定结果（n＝2）
重 楼 皂 苷 Ⅱ 、Ⅵ 、Ⅶ 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 0.52％ 、 Tab 3 Results of content determination of 20 batches
0.88％、0.27％（n＝6），表明仪器精密度良好。 of Y. thibetica samples（n＝2）
2.7 稳定性试验 批次 产地 部位 含量，mg/g
取“2.2.1”项下混合对照品溶液适量，室温下放置0、 重楼皂苷Ⅱ 重楼皂苷Ⅵ 重楼皂苷Ⅶ
S1 屏山 地下 1.875 - 4.873
2、4、6、12、24 h后，按照“2.1”项下色谱条件进样测定，记 S2 屏山 全草 1.547 0.078 3.158
S3 什邡 地下 0.823 0.074 7.386
录峰面积。结果，重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ峰面积的RSD分别
S4 什邡 全草 0.615 0.071 7.689
为 0.65％、0.97％、0.40％（n＝6），表明供试品溶液在室 S5 宝兴 地下 0.782 0.095 7.265
S6 宝兴 全草 0.701 0.085 6.584
温条件下放置24 h内稳定性良好。
S7 古蔺 全草 0.877 0.083 3.497
2.8 重复性试验 S8 古蔺 地下 1.465 - 4.387
取同一批丫蕊花粉末（批次：S5）6份，每份0.5 g，按 S9 彭州 全草 1.109 0.077 11.978
S10 彭州 地下 1.412 0.069 12.354
照“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按照“2.1”项下色 S11 大邑 全草 1.045 0.063 9.753
谱条件进样测定，记录峰面积，代入回归方程计算重楼 S12 大邑 地下 1.317 0.058 9.237
S13 兴文 全草 0.846 0.072 6.238
皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量。结果，重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的平均 S14 兴文 地下 1.330 0.059 4.069
含 量 分 别 为 0.782、0.095、7.265 mg/g，RSD 分 别 为 S15 泸州 全草 0.879 0.089 4.587
S16 泸州 地下 1.245 - 5.472
1.06％、1.35％、0.64％（n＝6），表明本方法重复性良好。
S17 仁寿 全草 0.845 0.055 4.398
2.9 加样回收率试验 S18 仁寿 地下 1.056. 0.067 3.564
S19 浦江 全草 0.897 0.086 4.578
取已知含量的丫蕊花粉末（批次：S5）6份，每份0.25
S20 浦江 地下 0.974 - 6.253
g，精密称定，分别精密加入重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ对照品适
注：“-”表示未检出
量，按照“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按照“2.1” Note：“-”means not detected
项下色谱条件进样测定，记录峰面积，代入回归方程计 2.11 聚类分析
算重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量并计算回收率，结果见表2。 聚类分析是一种根据样品自身的属性，用数学方法
2.10 样品含量测定 按照某种相似性或差异性指标，定量地确定样品之间的
分别取 20 批次的丫蕊花粉末各 0.5 g，按照“2.2.2” 亲疏关系，并按这种亲疏关系程度对样品进行聚类的探
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项下方法制备供试品溶液，再按照“2.1”项下色谱条件进 索性分析方法 。本研究以重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量作

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