Page 45 - 2020年2月第31卷第3期
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热回流提取3次，每次 2 h，减压回收溶剂，得乙醇提取物 均数比较采用t检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。
浸膏234 g（得率为10.17％）。将乙醇提取物浸膏用水分 3 结果
散后，依次用石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、正丁醇进行 3.1 小鼠活动情况观察结果
萃取，分别得到石油醚部位浸膏 13 g（得率为 0.565％）、 空白对照组小鼠的饮食情况正常，体质量呈增长趋
乙酸乙酯部位浸膏33 g（得率为1.435％）、正丁醇部位浸 势，毛发有光泽，活动情况正常，未见其他异常情况；模
膏 68.5 g（得率为 2.978％）和剩余水部位浸膏 15.5 g（得 型对照组小鼠进食量较少，体质量呈下降趋势，皮毛暗
率为0.674％）。 淡无光泽，有脱毛现象，活动量少，目光呆滞等；各给药
2.2 分组、给药与造模 组小鼠进食量正常，皮毛具有一定的色泽，活动情况
将小鼠适应性饲养 1 周，然后按体质量随机分为 7 较好。
组，即空白对照组、模型对照组、阳性对照组（当归补血 3.2 小鼠外周血象指标水平测定结果
口服液）和当归藤石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部 与空白对照组比较，模型对照组小鼠外周血中
位、水部位组，每组 10 只。根据课题组前期研究 及预 WBC、RBC、HCT、PLT、HGB 水平显著降低（P＜0.01）。
[8]
实验结果确定当归藤各提取部位的给药剂量，即石油醚 与模型对照组比较，阳性对照组和当归藤正丁醇部位组
部位组为4.2 g/kg、乙酸乙酯部位组为10.64 g/kg、正丁醇 小鼠外周血中上述5个指标水平均显著升高（P＜0.01）；
部位组为22.07 g/kg、水部位组为5.0 g/kg（以上给药剂量 当归藤石油醚部位组小鼠外周血中上述5个指标水平差
[10]
均以提取部位浸膏量计）；根据参考文献 及预实验结果 异均无统计学意义（P＞0.05）；当归藤乙酸乙酯部位组
确定阳性对照组（当归补血口服液）的给剂量为324 g/kg。 小鼠外周血中 RBC、PLT、HGB 水平显著升高（P＜0.05
各组小鼠均预防性灌胃给药，灌胃体积为1 mL/100 g，每 或P＜0.01）；当归藤水部位组小鼠外周血中RBC、HCT、
天 1 次，连续给药 14 d。空白对照组和模型对照组小鼠 PLT、HGB 水平显著升高（P＜0.05 或 P＜0.01）。各组小
同法灌胃等体积的超纯水。在开始给药的第12 、13 天， 鼠外周血中 WBC、RBC、HCT、PLT、HGB 水平测定结果
除空白对照组外，其余各组小鼠均腹腔注射环磷酰胺 见表1。
（80 mg/kg），连续2 d，复制小鼠血虚模型 ，造模期间仍
[11]
表1 各组小鼠外周血中WBC、RBC、HCT、PLT、HGB
继续给药；空白对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。
水平测定结果（x±±s，n＝10）
注射环磷酰胺后每天观察并记录小鼠的活动情况。
Tab 1 Results of WBC，RBC，HCT，PLT and HGB
2.3 外周血象指标水平的检测
levels in peripheral blood of mice in each group
末次给药后30 min，所有小鼠开始禁食不禁水12 h，
（x±±s，n＝10）
于眼眶静脉取血，采用全自动血细胞分析仪进行血象指
组别 WBC，×10 L RBC，×10 L －1 HCT，％ PLT，×10 L －1 HGB，g/L
－1
9
12
9
标[白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、红细胞压积 空白对照组 7.63±0.39 7.17±0.59 34.7±1.31 522.00±58.12 87.80±5.57
＊＊
（HCT）、血小板计数（PLT）和血红蛋白浓度（HGB）]水 模型对照组 3.21±0.49 ＊＊ 3.21±0.54 ＊＊ 22.35±1.17 ＊＊ 361.50±49.30 55.30±6.07 ＊＊
阳性对照组 4.71±0.53 ## 5.04±0.75 ## 28.62±0.81 ## 489.90±63.18 79.00±4.92 ##
##
平分析。随后摘眼球取血用于后续检测。 当归藤石油醚部位组 3.31±0.43 3.65±0.46 23.11±1.35 394.10±63.92 56.30±6.18
2.4 血清免疫和造血因子水平测定 当归藤乙酸乙酯部位组 3.57±0.45 3.84±0.76 # 23.20±1.06 416.00±53.66 62.90±5.30 ##
#
当归藤正丁醇部位组 4.57±0.25 ## 4.65±0.29 ## 26.26±1.41 ## 478.80±62.63 73.40±3.40 ##
##
摘眼球采血后，将血样于室温内静置 60 min，4 ℃下
当归藤水部位组 3.64±0.60 4.61±0.66 ## 24.69±1.38 ## 428.80±71.18 70.80±4.10 ##
#
以3 000 r/min离心15 min，分装血清，置于冻存管中，密
#
＊＊
注：与空白对照组比较， P＜0.01；与模型对照组比较，P＜0.05，
封，－80 ℃冻存待检。实验时，取适量血清，测定其中免 ## P＜0.01
疫相关因子（IL-2 、IL-6、IL-3）和造血相关因子（EPO、 Note：vs. blank control group， P＜0.01；vs. model control group，
＊＊
G-CSF、M-CSF、VCAM-1）水平，具体操作按照相应ELI- # P＜0.05，P＜0.01
##
SA试剂盒说明书进行。 3.3 小鼠血清中免疫因子水平测定结果
2.5 胸腺指数和脾指数测定 与空白对照组比较，模型对照组小鼠血清中 IL-2、
小鼠取血后处死，取胸腺、脾，称质量，计算其胸腺 IL-3、IL-6 水平显著降低（P＜0.01）。与模型对照组比
指数和脾指数：胸腺指数＝胸腺质量（g）/体质量（g），脾 较，阳性对照组和当归藤正丁醇部位、水部位组小鼠血
指数＝脾质量（g）/体质量（g）。 清中上述3个因子水平以及当归藤乙酸乙酯部位组小鼠
2.6 统计学方法 血清中 IL-2、IL-6 水平显著升高（P＜0.01），但当归藤石
采用SPSS 22.0统计学软件处理实验数据。计量资 油醚部位组小鼠血清中上述3个因子水平差异无统计学
料以 x±s 表示，多组间样本比较采用方差分析，两样本 意义（P＞0.05）。各组小鼠血清中 IL-2、IL-3、IL-6 水平
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