Page 13 - 2020年1月第31卷第2期

3.2 DHA 对 Huh7 细胞和 BEL-7402 细胞中氨基酸代 胞和 BEL-7402 细胞中的差异代谢物。结果显示，与对
谢物的影响 照组比较，12.5 μmol/L 的 DHA 作用 24 h 后，Huh7 细胞
QC 样本经 GC-MS 检测及数据处理后，共得到 186 中的差异代谢物有 28 个，包括 Glutamine（谷氨酰胺）、
个代谢物成分峰（大部分RSD≤30％），对上述成分峰进 Glutathione（谷胱甘肽）、Alanine（丙氨酸）、Fumaric acid
行匹配并去除峰面积过小、重复性较差的峰数据，共获 （富马酸）、N- acetyl-serine（N-乙酰丝氨酸）、N-acetyl-as-
得70个成分的峰数据。经GC-MS检测并对每组平行操 partic acid（N-乙酰天冬氨酸）等化合物；BEL-7402 细胞
作的 3 份样品图谱中各代谢物成分峰面积数据进行分 中的差异代谢物有 29 个，包括 Pantothenic acid（泛酸）、
析，结果显示，以25 μmol/L的DHA作用于两种细胞24 h Phenylalanine（苯丙氨酸）、谷胱甘肽、Hypotaurine（牛磺
后，峰面积 RSD≤10％的成分共 42 个，占所有成分总峰 酸）等化合物；Huh7 和 BEL-7402 的共同差异代谢物有
面积的比例为 60.00％；峰面积 RSD 为＞10％～30％的 10 个，包括泛酸、N-乙酰丝氨酸、N-乙酰天冬氨酸、牛磺
成分共20个，占所有成分总峰面积的比例为28.57％；峰 酸、谷胱甘肽、Gluconic acid（葡糖酸）、富马酸、Erythron-
面积 RSD＞30％的成分共 8 个，占所有成分总峰面积的 ic acid（赤糖酸）、谷氨酰胺、苯丙氨酸。两种细胞的共有
差异代谢物见表3；其相对峰面积见表4、表5。
比例为 11.43％。其中，RSD≤30％的成分占所有成分
表3 Huh7细胞和BEL-7402细胞的共有差异代谢物
总峰面积的比例达88.57％，表明经药物作用后，细胞中
Tab 3 Common differential metabolites of Huh7 cells
大部分代谢物成分的产生情况较为稳定。峰面积
and BEL-7402 cells
RSD≤30％的62个代谢物详见表2。
编号 差异代谢物 英文名 分子式 分子量
表2 峰面积RSD≤30％％的代谢物
1 泛酸 Pantothenic acid C9H17O5N 219.24
Fig 2 Metabolites with peak area RSD≤30％％ 2 N-乙酰丝氨酸 N-acetyl-serine C5H9NO4 147.13
序号 代谢物 RSD，％ 序号 代谢物 RSD，％ 3 N-乙酰天冬氨酸 N-acetyl-aspartic acid C6H9NO5 175.14
1 Xylitol 6.58 32 Gluconic acid 4.24 4 牛磺酸 Hypotaurine C2H7NO3S 125.15
2 Valine 9.97 33 Fumaric acid 9.52 5 谷胱甘肽 Glutathione C10H17N3O6S 307.33
6 葡糖酸 Gluconic acid 196.16
3 Uridine 5′-monophosphate 11.85 34 Fucose 25.10 C6H12O7
4 Tyrosine 6.37 35 Erythronic acid 4.48 7 富马酸 Fumaric acid C4H4O4 116.07
5 Tryptophan 2.00 36 Erythritol 6.15 8 赤糖酸 Erythronic acid C4H8O5 136.10
6 Trans-4-hydroxy-proline 9.23 37 D-myo-inositol-4-monophosphate 6.09 9 谷氨酰胺 Glutamine C5H10N2O3 146.15
7 Threonine 5.49 38 Cytindine-5′-monophosphate 4.75 10 苯丙氨酸 Phenylalanine C9H11NO2 165.19
8 Tartaric acid 3.29 39 Cysteine 1 6.52 表4 各组Huh7细胞中共有差异代谢物的相对峰面积
9 Succinic acid 6.12 40 Citric acid 3.43 Tab 4 Relative peak area of common differential me-
10 Stearic acid 4.48 41 Cholesterol 5.55
11 Sorbose 7.93 42 Cellobiose 1 3.94 tabolites in Huh7 cells
12 Serine 12.44 43 Beta-alanine 6.33 对照组 给药组
差异代谢物
13 Pyruvic acid 6.82 44 Benzoic acid 21.35 第1次 第2次 第3次 第1次 第2次 第3次
14 Pyroglutamic acid 9.72 45 Aspartic acid 1 11.52 泛酸 1.010 0 0.797 1 0.830 1 0.121 5 0.010 0 0.084 3
15 Proline 16.45 46 Asparagine 18.17 N-乙酰丝氨酸 0.879 6 1.010 0 0.897 3 0.010 0 0.108 9 0.010 6
16 Phenylalanine 17.81 47 Arabinopyranose 22.64 N-乙酰天冬氨酸 0.941 5 0.904 9 1.010 0 0.257 6 0.010 0 0.364 8
17 Pantothenic acid 5.93 48 Aminomalonic acid 6.14 牛磺酸 1.010 0 0.951 3 0.953 0 0.522 4 0.470 4 0.541 4
18 Palmitic acid 3.15 49 Alphaketoglutaric acid 7.84 谷胱甘肽 0.914 0 0.658 2 1.010 0 0.433 7 0.197 8 0.396 4
19 Ornithine 19.80 50 Allose 2.14 葡糖酸 1.010 0 0.971 3 0.972 3 0.013 2 0.010 0 0.022 7
20 Oleic acid 16.94 51 Allo-inositol 5.76 富马酸 1.010 0 0.915 7 0.760 7 0.058 9 0.078 2 0.037 8
21 Nicotinamide 2 12.50 52 Alanine2 24.35 赤糖酸 1.010 0 0.903 8 0.990 9 0.410 8 0.052 1 0.568 0
22 N-acetyl-serine 5.43 53 Adenosine-5-monophosphate 14.59 谷氨酰胺 1.010 0 0.569 5 0.906 2 0.010 0 0.075 8 0.200 2
23 N-acetyl-aspartic acid 3.43 54 Adenine 10.48 苯丙氨酸 0.080 4 0.200 4 0.021 2 0.634 2 0.387 8 0.587 0
24 Mimosine 1 12.19 55 6-phosphogluconic acid 3.23 由表 4、表 5 可知，在有显著性变化的差异代谢物
25 Malic acid 5.96 56 4-guanidinobutyric acid 7.90
26 Leucine 18.55 57 3-phosphoglyceric acid 3.77 中，DHA给药组Huh7细胞和BEL-7402细胞中的多数代
27 Lactic acid 10.26 58 2-hydroxypyridine 10.88 谢物平均含量呈显著降低趋势，表明 DHA 可能通过下
28 Hypotaurine 3.42 59 2-Hydroxyglutaric acid 7.00 调上述两种肝癌细胞中氨基酸类代谢物的表达，从而影
29 Glycine 8.99 60 Glucose-6-phosphate 4.76
30 Glycerol 1-phosphate 9.43 61 Glucose 1 3.74 响肝癌细胞的代谢通路。
31 Glyceric acid 9.81 62 Glutamic acid 13.79 3.3 Huh7 细胞和 BEL-7402 细胞的差异代谢物富集信
将表2中的62个代谢物的峰面积经过SIMCA-P 软 号通路
件分析，并与化合物谱库进行分析比对，即获得Huh7细 采用 Metaboanalyst 4.0 软件分别对 Huh7 细胞和

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