Page 99 - 2019年11月第30卷第21期
P. 99

5-FU in respects of mechanical barrier，immune barrier，biological barrier.
        KEYWORDS     Artificial Isaria cicadae；Intestinal mucosal injury；5-Fluorouracil；Rat；Mechanical barrier；Biological barrier；
        Immune barrier


            肿瘤是危害全人类健康的常见疾病和多发疾病，目                          院于瑞莲副教授鉴定为蝉花（Isaria cicadae Miquel）菌
        前临床上常用的肿瘤治疗策略主要有手术、化疗、分子                            种的人工栽培品；5-FU注射液（天津金耀药业有限公司，
        靶向抑制剂以及生物药疗法，常规化疗仍然是临床治疗                            批号：1605081，规格：0.25 g/10 mL）；大鼠内毒素（ET）酶
        肿瘤的主要方式        [1-2] 。其中，以 5-氟尿嘧啶（5-Fluoroura-      联免疫吸附（ELISA）试剂盒（批号：H03A8E48592）、D-
        cil，5-FU）为代表的抗代谢类化疗药在化疗中占据约                         乳酸（D-LA）ELISA试剂盒（批号：H02F4E48101）、分泌型
        40％的比重 。5-FU作为最早应用的抗代谢类化疗药，                         免疫球蛋白（sIgA）ELISA试剂盒（批号：H13C3E76192）、
                   [3]
        已在临床上广泛用于胃肠道癌、肝癌和胰腺癌等                     [1-3] 实体  肿 瘤 坏 死 因 子 α（TNF-α）ELISA 试 剂 盒（批 号 ：
        肿瘤的治疗，尤其在消化道肿瘤的治疗上占据主导地                             H06A2E50672）、γ-干扰素（IFN-γ）ELISA 试剂盒（批号：
        位 [4-5] 。然而，5-FU在对多种癌症有良好疗效的同时，也                    H06F6E23206）、白细胞介素15（IL-15）ELISA试剂盒（批
        会对消化道黏膜造成严重损伤，不仅会引起呕吐、腹泻                            号：H03A3F06703）、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）ELI-
                     [1]
        等消化道症状 ，甚至导致病情恶化危及生命                    [3，6] 。任何   SA试剂盒（批号：H05A7E46872）、髓过氧化物酶（MPO）
        引起肠黏膜屏障功能障碍的因素都可以加重原有疾病，                            ELISA 试剂盒（批号：H03F8E34274）、丙二醛（MDA）
                                   [7]
        引发严重的全身炎症甚至死亡 ，使得肿瘤患者的治疗                            ELISA 试剂盒（批号：H04A6E40382）、闭锁小带蛋白
        无法进行。目前，临床上缺乏有效治疗化疗引起的肠黏                            ZO-1 ELISA 试剂盒（批号：H03A2E78452）均购自上海
                           [8]
        膜损伤的药物及手段 。因此，治疗化疗引起的肠黏膜                            源叶生物科技有限公司；DAPI染色液（南京建成生物有
        损伤、保护肠黏膜屏障结构完整和免疫系统功能正常具                            限公司，批号：SUB- 30162）；兔源紧密连接蛋白 Claudin
        有重要意义。                                              1-一抗（批号：ab240400）；山羊抗兔免疫球蛋白（IgG）二
            蝉花（Isaria cicadae Miquel）为麦角菌科真菌蝉拟              抗（批号：ab150077）均购自美国Abcam公司。
        青霉寄生竹蝉若虫后的复合体。据《本草纲目》记载，蝉花                          1.3  动物
        味甘，性寒，无毒，主治小儿天吊、惊痫螈、夜啼心悸 。                              SPF 级健康 SD 大鼠 40 只，♂，体质量（215±35）g，
                                                      [9]
                                            [9]
        现代研究也报道，蝉花具有抗惊厥 、抗炎 、免疫调节                     [10]  由南京市青龙山动物繁殖场提供，动物生产许可证号：
                                      [9]
        等生物活性。但目前，野生蝉花存在着有害物质富集、                            SCXK（苏）2017-0008。所有大鼠饲养于南京中医药大
        不易采摘、产量低等问题 。而本实验室前期通过研究                            学实验动物房内，环境温度为（23±2）℃、12 h/12 h昼夜
                              [11]
        栽培出的人工蝉花污染少、产量高、孢子粉含量高、品质                           循环。饲养期间大鼠自由进食、饮水，适应性饲养1周后
          [11]
        优 ，具有一定的应用价值。且前期实验已证实，本实                            进行实验。本实验遵守《实验动物护理和使用指南》，符
        验室栽培的人工蝉花具有保护庆大霉素所致大鼠急性                             合动物常规伦理。
                     [12]
        肾损伤的作用 。本研究以本实验室栽培的人工蝉花                             2 方法
        为研究对象，旨在详细研究其对5-氟尿嘧啶（5-FU）诱发                        2.1  动物分组与造模
        的肠黏膜损伤及免疫功能下降的修复作用，为其临床应                                将 40 只 SD 大鼠随机分为正常组、模型组和人工蝉
        用提供参考。                                              花高、中、低剂量组，每组8只。除正常组外，模型组和人
        1 材料                                                工蝉花各剂量组大鼠均每天腹腔注射 1 次 30 mg/kg 的
        1.1 仪器                                              5-FU ，正常组大鼠腹腔注射等量生理盐水，持续注射5
                                                                [7]
            Max190全波长酶标仪（美国Spectra公司）；L420离                 d。在此同时，人工蝉花高、中、低剂量组大鼠在注射
        心机（湘仪离心机仪器有限公司）；TANKPE060 纯水仪                       5-FU后1 h分别灌胃3.5 、1.75 、0.875 g/kg的人工蝉花溶
        （美国 Millipore 公司）；BSA224S-CW 电子天平[赛多利               液（将干燥人工蝉花粉末用生理盐水制备的悬液，剂量
                                                                                                    [6]
        斯科学仪器（北京）有限公司]；Vortex-5 涡旋混匀仪（海                     根据预实验结果和本实验室前期研究报道设置 ），正常
        门市其林贝尔仪器制造有限公司）；EG1150C 石蜡包埋                        组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水；各组大鼠均每天
        仪（德国徕卡公司）；2000-C倒置显微镜、V.A1倒置荧光                      给药 1 次，连续给药 8 d，记录大鼠体质量等一般情况
        显微镜（德国Zeiss公司）。                                     变化。
        1.2  药品与试剂                                          2.2 血清中ET、D-LA含量测定
            人工蝉花由本实验室栽培，由南京中医药大学药学                              末次给药后 2 h，大鼠腹主动脉取血，室温静置 1 h，


        ·2974  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 21                                中国药房    2019年第30卷第21期
   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104