Page 71 - 2019年10月第30卷第19期

定，记录峰面积。以峰面积的对数为纵坐标（y）、质量浓 2.3.2 丹酚酸B对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B
度的对数为横坐标（x）绘制标准曲线，得到回归方程为 对照品 10.5 mg，用甲醇溶解并定容至 10 mL 量瓶中，摇
y＝1.481 5x－15.689（r＝0.999 1）。结果表明，黄芪甲苷 匀，制成质量浓度为 1.029 0 mg/mL 的丹酚酸 B 对照品
在质量浓度为0.036 3～1.162 8 mg/mL范围内与其峰面 溶液。
积线性关系良好。 2.3.3 供试品溶液的制备 取“2.1”项下水提液适量，用
2.2.7 精密度试验 量取“2.2.2”项下黄芪甲苷对照品 微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。
溶液适量，按“2.2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记 2.3.4 缺丹参阴性样品溶液的制备 取缺丹参的其余
录峰面积。结果，黄芪甲苷峰面积的RSD为1.57％（n＝ 处方量饮片，按正交试验1号条件进行提取，趁热滤过，
6），表明仪器精密度良好。 合并滤液，浓缩至适量，放冷至室温，加水定容至 1 000
2.2.8 稳定性试验 量取同一水提液500 mL（按正交试 mL，即得缺丹参阴性样品；再按“2.3.3”项下方法操作，
验 1 号条件提取），按“2.2.3”项下方法制备成供试品溶 制备缺丹参阴性样品溶液。
液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 后按“2.2.1”项 2.3.5 专属性与考察 取丹酚酸B对照品溶液、供试品
下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，黄芪甲苷峰 溶液、缺丹参阴性样品溶液，分别按“2.3.1”项下色谱条
面积的RSD为1.41％（n＝6），表明供试品溶液在室温下 件进样测定，记录色谱图。结果，丹酚酸 B 的色谱峰与
放置24 h内稳定。 相邻峰间的分离度＞1.5，以丹酚酸 B 峰计理论板数＞
2.2.9 重复性试验 量取水提液500 mL（按正交试验1 5 000。供试品溶液在与丹酚酸 B 对照品溶液相同的保
号条件提取），平行量取 6 份，分别按“2.2.3”项下方法制 留时间处有相同色谱峰，缺丹参阴性样品溶液在与丹酚
备成供试品溶液后，再按“2.2.1”项下色谱条件进样分 酸B对照品溶液相同保留时间处未见相应色谱峰，表明
析，记录峰面积并计算黄芪甲苷含量。结果，所得供试 阴性无干扰、专属性良好。丹酚酸B含量测定的高效液
品溶液中黄芪甲苷的含量为 0.374 0 mg/mL，RSD 为 相色谱图见图2。
1.95％（n＝6），表明该方法重复性良好。
1 000
2.2.10 加样回收试验 量取按正交试验 1 号条件提取
后的水提液 500 mL（经“2.2.3”项下方法制备后，测得 mV 500 丹酚酸B
黄芪甲苷含量为0.374 0 mg/mL），平行量取9份，分别按 U，
黄芪甲苷含量的 50％、100％、150％加入黄芪甲苷对照 0
品，每组 3 份，按“2.2.3”项下方法制备供试品溶液后，再 0 5 10 15
按“2.2.1”项下色谱条件进样分析，记录峰面积，并计算 t，min
A.丹酚酸B对照品溶液
样品溶液中黄芪甲苷的总含量。结果，黄芪甲苷的平均
1 000
回收率为 96.85％，RSD 为 1.10％（n＝9），表明该方法准
确度良好。黄芪甲苷回收率测定结果见表1。 mV 500
表1 黄芪甲苷回收率测定结果（n＝9） U，
Tab 1 Results of recovery tests for astragaloside ⅣⅣ 0
（n＝9） 0 5 10 15
t，min
成分 样品含量，mg 加入量，mg 实测量，mg 回收率，％ 平均回收率，％ RSD，％
B.缺丹参阴性样品溶液
黄芪甲苷 1.870 0 0.935 0 2.787 3 98.11 96.85 1.10
1.870 0 0.935 0 2.776 6 96.96 1 000
1.870 0 0.935 0 2.772 8 96.56
1.870 0 1.870 0 3.692 6 97.47 mV 丹酚酸B
1.870 0 1.870 0 3.675 9 96.57 U， 500
1.870 0 1.870 0 3.713 5 98.58
1.870 0 2.805 0 4.559 8 95.89 0
1.870 0 2.805 0 4.571 1 96.30 0 5 10 15
1.870 0 2.805 0 4.540 7 95.21 t，min
2.3 丹酚酸B含量的测定 C.供试品溶液
2.3.1 色谱条件 色谱柱：Inertsil ODS-SP（150 mm× 图2 丹酚酸B含量测定的高效液相色谱图
4.6 mm，5 μm）；检测器：光二极管阵列检测器；流动相： Fig 2 HPLC chromatograms of salvianolic acid B
content determination
乙腈-0.1％磷酸（21 ∶ 79，V/V）；流速：1 mL/min；柱温：
30 ℃；检测波长：286 nm；进样量：10 μL。 2.3.6 线性关系考察 取“2.3.2”项下丹酚酸 B 对照品

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