Page 70 - 2019年10月第30卷第19期
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传统汤剂的化学组成和临床疗效。另外，据方中各味药                           用水饱和正丁醇溶液振摇提取 4 次（每次 40 mL），合并
        的化学成分与药理作用等相关资料表明                  [7-12] ，君药黄芪    正丁醇液，用氨液洗涤 2 次（每次 40 mL），弃去氨液，将
        的有效活性成分黄芪甲苷具有抗炎、抗间质纤维化及抗                           正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，并转移至5 mL量
        氧化应激等药理作用，使药丹参的有效活性成分丹酚酸                           瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得。
        B具有保肾、抗纤维化等药理作用，以上两个成分对慢性                          2.2.4  缺黄芪阴性样品溶液的制备               取缺黄芪的其余
        肾衰竭的治疗均有显著效果。因此，本研究选择水提液                           处方量饮片，按“2.1”项下方法制备水提液（按正交试验
        中黄芪甲苷、丹酚酸 B 的含量以及出膏率作为评价指                          1号条件提取）后，量取溶液500 mL，按“2.2.3”项下方法
        标，采用多指标权重分析法结合正交试验优选补脾养肾
                                                           制备缺黄芪阴性样品溶液。
        颗粒的最佳水提工艺，为其后续开发研究提供依据。
                                                           2.2.5  专属性考察       取黄芪甲苷对照品溶液、供试品溶
        1 材料
                                                           液（按正交试验 1 号条件提取）和缺黄芪阴性样品溶液
        1.1 仪器
                                                           （按正交试验 1 号条件提取），分别按“2.2.1”项下色谱条
            LC-2030 高效液相色谱仪、ELSD-Ⅱ蒸发光散射检
                                                           件进样测定，记录色谱图。结果，黄芪甲苷与相邻峰间的
        测器、AUW220D十万分之一电子分析天平（日本岛津公
                                                           分离度＞1.5，以黄芪甲苷峰计理论板数＞5 000。供试品
        司）。
                                                           溶液在与黄芪甲苷对照品溶液相同的保留时间处有相
        1.2 药品与试剂
                                                           同色谱峰，缺黄芪阴性样品溶液在与黄芪甲苷对照品溶
            黄芪饮片（深圳市正皇庄中药饮片有限公司，批号：
                                                           液相同保留时间处未见相应色谱峰，表明阴性无干扰、专
        180201）；丹参饮片（批号：18061101）、山药饮片（批号：
                                                           属性良好。黄芪甲苷含量测定的高效液相色谱图见图1。
        18062101）、酒苁蓉饮片（批号：18063001）均购自毫州市
        永刚饮片厂有限公司；白术饮片（批号：1805002）、大黄                              1 000
        饮片（批号：1806001）均购自广州市岭南中药饮片有限
                                                                  mV  500
        公司佛山分公司；豆蔻饮片（广东省药材公司中药饮片                                  U，                           黄芪甲苷
        厂，批号：D2917916）；炙甘草饮片（四川干方中药股份有
        限公司，批号：18080092）；黄芪甲苷对照品（中国食品药                                0
                                                                       0        5        10       15
        品检定研究院，批号：110781-201717，纯度：96.9％）；丹                                        t，min
        酚酸B对照品（四川省维克奇生物科技有限公司，批号：                                             A.黄芪甲苷对照品溶液
        wkq16060405，纯度：≥98％）；乙腈为色谱纯，水为超纯                           1 000
        水，其他试剂均为分析纯。
        2 方法与结果                                                   mV  U，  500
        2.1  水提液的制备
            补脾养肾方由黄芪 30 g、山药 30 g、白术 10 g、酒苁                          0
                                                                       0        5        10       15
        蓉 10 g、豆蔻 10 g、丹参 15 g、大黄 10 g 和炙甘草 6 g 组                                  t，min
        成。取以上八味中药饮片，按L9 （3）正交试验表条件进                                           B.缺黄芪阴性样品溶液
                                     4
        行提取，趁热滤过，合并滤液，浓缩至适量，放冷至室温，                                 1 000
        加水定容至1 000 mL，备用。
        2.2 黄芪甲苷含量的测定                                             mV  U，  500
        2.2.1  色谱条件      色谱柱：Agilent ZORBAX-C18 （250                                            黄芪甲苷
        mm×4.6 mm，5 μm）；检测器：蒸发光散射检测器；流动                               0
                                                                       0        5        10        15
        相 ：乙 腈 - 水（34 ∶ 66，V/V）；流 速 ：0.8 mL/min；柱 温 ：                               t，min
        30 ℃；漂移管温度：55 ℃；载气压力：350 kPa；进样量：                                        C.供试品溶液
        5 μL。                                                    图1 黄芪甲苷含量测定的高效液相色谱图
        2.2.2  黄芪甲苷对照品溶液的制备              精密称取黄芪甲           Fig 1 HPLC chromatograms of astragaloside ⅣⅣ con-
        苷对照品 12.0 mg，用甲醇溶解并定容至 10 mL 量瓶中，                         tent determination
        制得质量浓度为 1.162 8 mg/mL 的黄芪甲苷对照品                     2.2.6  线性关系考察        取“2.2.2”项下黄芪甲苷对照品
        溶液。                                                溶液进行梯度稀释，分别制成不同质量浓度（1.162 8、
        2.2.3  供试品溶液的制备          量取“2.1”项下水提液 500          0.581 4、0.290 7、0.145 4、0.072 7、0.036 3 mg/mL）的系列
        mL，浓缩，放冷至室温，加水溶解并定容至 50 mL，然后                      黄芪甲苷对照品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进样测


        中国药房    2019年第30卷第19期                                             China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 19  ·2657  ·
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