Page 59 - 2019年10月第30卷第19期
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mice was decreased significantly in cyclophosphamide group，S. trinervula ethanol extract high-dose group，ethyl acetate part of
        ethanol extract high-dose and medium dose groups， compared with model group （P＜0.01）； thymus index of mice in
        cyclophosphamide group was increased significantly，compared with model group and other administration groups （P＜0.01）.
        CONCLUSIONS： The ethyl acetate part of ethanol extract of S. trinervula has the best anti-tumor effect and less
        immunosuppressive effect.
        KEYWORDS     Smilax trinervula；Ethanol extract；Different parts；Anti-tumor；Mice


            近年来，恶性肿瘤的发病率和病死率均逐年上升，                          牛 血 清（浙 江 杭 天 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 ，批 号 ：
        癌症已成为我国居民的第一位死亡原因，疾病负担沉                             20170124）；MTT（批号：303HC510）、试验用顺铂粉末
        重 。目前，临床上使用的抗肿瘤药普遍存在治疗窗窄、                          （批号：320B022，纯度：≥98.5％）、胰蛋白酶-EDTA消化
          [1]
        药品不良反应相对较大、采用冲击疗法易导致过量中毒                            液（批号：20170623）、青链霉素混合液（100×）（批号：
               [2]
        等问题 。而研究发现，一些天然药物能够抑制肿瘤的                            20170625）、二甲基亚砜（DMSO，批号：20180608）均购
        生长，对肿瘤的转移和复发有一定的抑制效果，且对放                            自北京索莱宝公司；试验用环磷酰胺粉末（上海阿拉丁
                                    [3]
        疗、化疗具有“增效减毒”的作用 ，具有较大的开发研究                          生化科技股份有限公司，批号：L1729054，纯度：97％）；
        价值。三脉菝葜（Smilax trinervula Miq.）为菝葜科菝葜               乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等试剂均购自国药集团
        属植物，主要分布于我国江西、浙江、福建等地，亦分布                           化学试剂有限公司，均为分析纯。
              [4]
        于日本 。菝葜属植物以根茎入药，具有利湿去浊、祛风                           1.3 动物
        除痹、解毒散瘀的作用，常用于治疗小便淋浊、带下过                                健康 SPF 级 KM 小鼠，♂，体质量（20±2）g，90 只，
                                   [5]
        多、风湿痹痛、疔疮痈肿等病症 。现代研究发现，该属                           由江西中医药大学动物实验中心提供，实验动物生产许
                                         [7]
                                               [8]
        植物具有抗肿瘤 、防治动脉粥样硬化 、抗炎 等多种药                          可证号：SCXK（赣）2018-0003。小鼠购入后，SPF级标准
                      [6]
        理作用，民间多将三脉菝葜用于治疗疮痈肿痛。据相关                            饲养，饲养和实验期间予以自由摄食和饮水，并观察小
        研究发现，从三脉菝葜中提取获得的数个单体成分（如                            鼠饮食和毛发状况。饲养和实验期间的操作符合国家
        薯蓣皂苷、薯蓣次苷）具有一定的体外抗肿瘤活性                      [9-10] ，  科学技术部颁布的《实验动物管理条例》 。
                                                                                              [11]
        但关于三脉菝葜更多抗肿瘤活性成分的筛选和进一步                             1.4  细胞株
        的体内抗肿瘤作用的研究较少。基于此，本研究采用                                 人肝癌细胞株 HepG2、人肺癌细胞株 A549、人乳腺
        MTT 法考察三脉菝葜醇提物及其不同极性部位萃取物                           癌细胞株 MCF-7 和 MDA-MB-231、人宫颈癌细胞株
        的对6种肿瘤细胞增殖的体外抑制效果，并考察体外抗                            HeLa、人卵巢癌细胞株 HO-8910 以及小鼠肉瘤细胞株
        肿瘤效果较强的部位对S180荷瘤小鼠的肿瘤生长抑制                           S180均来源于中国科学院上海细胞生物研究所细胞库。
        效果，旨在为进一步阐明三脉菝葜的抗肿瘤活性部位及                            2 方法
        其进一步开发利用提供参考。                                       2.1  三脉菝葜醇提取物及其各极性部位萃取物的制备
        1 材料                                                    称取干燥的三脉菝葜根茎14 kg，切碎，用70％乙醇

        1.1  仪器                                             加热回流提取3次，每次1 h，过滤后合并滤液，减压浓缩
            MK-Ⅱ型酶标仪、3111 型二氧化碳培养箱（美国                       至无醇味，得到三脉菝葜提取物总浸膏 740 g（得率：
        Thermo Scientific 公司）；TS100-F 型倒置显微镜（日本             5.286％）。取总浸膏675 g混悬于适量的蒸馏水中，依次
        Nikon 公司）；RE-5205 型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪                    用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，减压浓缩后分别
        器厂）；DZF-6030B型真空干燥箱（上海一恒科学仪器有                       得到三脉菝葜醇提物各部位萃取物浸膏：石油醚部位萃
        限公司）；HHS-11-2型电热恒温水浴锅（上海博迅实业有                       取部位 5.5 g（得率：0.043％）、乙酸乙酯部位萃取部位
        限公司）；TDZ4A-WS型低速台式离心机（长沙湘仪离心                        65.9 g（得率：0.516％）、正丁醇萃取部位 123 g（得率：
        机仪器有限公司）；SW-CJ-2F 型洁净工作台（苏州安泰                       0.963％）；并将余下的水液减压浓缩，得到三脉菝葜醇提
        空气技术有限公司）；BS124S型万分之一天平[奥多利斯                        物水层部位372.2 g（得率：2.915％）。
        科学仪器（北京）有限公司]。                                      2.2 待测样品溶液的制备
        1.2 药品与试剂                                               根据预试验结果，分别称取三脉菝葜醇提物浸膏
            三脉菝葜药材于 2016 年 9 月份采自江西省宜丰县                     200 mg、醇提物石油醚萃取部位和醇提物乙酸乙酯萃取
        黄岗山垦殖场，由江西中医药大学黄慧莲教授鉴定为百                            部位浸膏各 50 mg、醇提物正丁醇萃取部位浸膏 100 mg
        合科植物三脉菝葜（S. trinervula Miq.）的根茎；DMEM                和水层部位浸膏 200 mg，置于 1 mL 不同量瓶中，用
        高糖培养基（美国 Hyclone 公司，批号：AAJ207791）；胎                 DMSO 溶解并定容至 1 mL，得到不同质量浓度（均以浸


        ·2646  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 19                                中国药房    2019年第30卷第19期
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