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活血化瘀等功效，也被广泛用于治疗毒蛇咬伤、痈疮溃                           期为12 h明暗交替。小鼠自由摄食饮水，饲料为标准啮
        烂、漆疮、痔疮等      [1-5] 。已有研究表明，蚂蟥属植物具有良               齿类动物饲料，饮水为纯化水。动物饲料、垫料均由广
                                            [2]
        好的抗炎、镇痛、抗氧化和保护血管等作用 。关于小叶                          西医科大学实验动物中心提供。
                                         [2]
                                                   [2]
        三点金中的主要成分黄酮类            [6-7] 、酚酸类 、生物碱类 、萜        2 方法
                  [8]
        类和甾醇类 等有较多研究，然而关于其相关药理作用                               参考文献方法       [10-11] 进行小叶三点金提取物的抗炎活
                                                  [9]
        及机制的研究鲜有报道。仅有 Govindarajan R 等 研究                  性作用考察。
        报道，小叶三点金具有良好的镇痛、抗炎、抗氧化、保护                          2.1 小叶三点金提取物的制备
        血管等作用。本课题组通过对小叶三点金的前期预实                                取小叶三点金药材 5 kg，打成粗粉，以 70％乙醇在
        验发现，其具有较好的抗炎活性。考虑到该植物抗炎作                           约 82 ℃条件下回流提取 3 次，每次溶剂倍量分别为 12、
        用及机制的研究报道较少，因此本课题组在前期研究基                           8、6 倍（L/kg），提取时间分别为 2、1.5、1 h；滤过，合并滤
        础上，考察小叶三点金70％乙醇提取物的抗炎活性并初                          液，用旋转蒸发仪在水浴条件下减压浓缩，然后于55 ℃
        步探讨其作用机制，为该药用植物的进一步开发应用提                           水浴中挥干溶剂，称定质量，得率为12.85％。
        供实验依据。                                             2.2 二甲苯致小鼠耳肿胀实验
        1 材料                                                   取小鼠 60 只，按体质量随机分为空白组、阳性对照
        1.1 仪器                                             组（地塞米松，0.005 g/kg；剂量根据人给药剂量换算并结
            GL124-1SCN 型电子天平[赛多利斯科学仪器（北                    合预实验结果制定）和小叶三点金提取物高、中、低剂量
        京）有限公司]；UV-1780 型紫外-可见分光光度计[岛津                     组（50、30、15 g/kg，以所含原生药量计算，下同；剂量根
        仪器（苏州）有限公司]；TGL-16GB 型离心机（上海安亭                     据急性毒性实验与预实验结果制定），每组12只。各给药
        科学仪器厂）；全波长型酶标仪[帝肯（上海）贸易有限公                         组小鼠分别灌胃给药（分别将地塞米松片和小叶三点金
        司]；BXM-30R型立式压力蒸汽灭菌器（上海迅博实业有                       提取物以水配制成相应药液），给药体积均为20 mL/kg，
        限公司医疗设备厂）；RE-1002 型旋转蒸发仪（常州市国                      qd，连续给药7 d；空白组小鼠同法灌胃等体积水。末次
        旺仪器制造有限公司）。                                        给药1 h后，于小鼠右耳正反两面各涂抹二甲苯10 μL致
        1.2  药品与试剂                                         炎（剂量根据预实验结果设定）；15 min后脱颈椎处死小
            醋酸地塞米松片（浙江仙琚制药股份有限公司，批                         鼠，沿耳根部剪下两耳，用6 mm打孔器在两耳相同部位
        号：180119，规格：0.70 mg）；头孢克肟分散片（浙江莎普                  打下等面积圆耳片，称定质量，计算耳肿胀度及肿胀抑
        爱思药业股份有限公司，批号：180162E，规格：50 mg）；                   制率。耳肿胀度（mg）＝右耳片质量－左耳片质量；耳肿
        二甲苯、冰醋酸、伊文思蓝（国药集团化学试剂有限公                           胀抑制率（％）＝[（空白组平均耳肿胀度－实验组平均
        司，批号分别为F20180618、T20180912、20180725）；角叉            耳肿胀度）/空白组平均耳肿胀度]×100％。
        菜胶（上海源叶生物科技有限公司，批号：YY18704）；水                      2.3  冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加实验
        合氯醛（成都市科龙化工试剂厂，批号：2018020102）；超                        取小鼠60只，按“2.2”项下方法分组、给药。末次给
        氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）酶                     药 1 h 后，对各组小鼠尾静脉注射 0.3％伊文思蓝溶液
        联 免 疫 吸 附（ELISA）检 测 试 剂 盒（批 号 分 别 为                10 mL/kg、腹腔注射0.6％冰醋酸溶液10 mL/kg致炎（剂
        20180308、20180305、20180316）均购自南京建成生物工              量根据预实验结果设定）；15 min后脱颈椎处死小鼠，腹
        程研究所；其余试剂均为分析纯或由实验室自行配制；                           腔注射生理盐水 6 mL 冲洗腹腔，轻揉其腹部 1 min 后，
        生理盐水为0.9％氯化钠注射液，水为纯化水。                             剪开腹腔收集腹腔液；腹腔液以 3 000 r/min 离心 12
        1.3 药材                                             min，取上清液，采用紫外-可见分光光度计于 590 nm 波
            小叶三点金药材采自广西南宁市上林县，经广西中                         长处测定光密度（OD）。以OD值表示毛细血管通透性，
        医药大学药学院陈勇教授鉴定为豆科山蚂蝗属植物小                            OD值越高则毛细血管通透性越大。
        叶 三 点 金 草 [Dcsmodium microphyllum（Thunb.）DC.]      2.4 角叉菜胶致小鼠足肿胀实验
        全草。                                                    取小鼠60只，按“2.2”项下方法分组、给药。末次给
        1.4 动物                                             药1 h后，在各组小鼠右后足趾部皮下注射1％角叉菜胶
            清洁级昆明种小鼠，雄性，体质量18～22 g，由广西                     溶液0.02 mL致炎（剂量根据文献[11]设定）；15 min后脱
        医科大学实验动物中心提供，动物生产许可证号：SCXK                         颈椎处死小鼠，剪取其后双足趾相同部位，称定质量，计
        桂2014-0001。小鼠在实验前于清洁级动物房适应性喂                       算小鼠足肿胀度及肿胀抑制率。足肿胀度（mg）＝小鼠
        养3 d，环境温度为（25±1）℃、湿度约为65％、人造光周                     右后足趾质量－小鼠左后足趾质量；足肿胀抑制率


        中国药房    2019年第30卷第18期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18  ·2533  ·
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