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植物黄花倒水莲[Polygala aureocauda Dunn]的根。 (LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)、每搏量(SV)、
1.3 药品与试剂 左室射血分数(LVEF),观察并记录至少3个心动周期的
注射用青霉素钠(华北制药股份有限公司,批号: 数据,取其平均值作为检测结果。
D0801320,规格:80万单位);复方丹参滴丸(阳性对照, 2.4 心肌组织CRP、IL-1β、ET-1、IFN-γ水平检测
天士力医药集团股份有限公司,批号:151115,规格:薄 取缺血区心肌组织(对照组和假手术组大鼠取对应
膜衣滴丸每丸重27 mg);CRP、IL-1β酶联免疫吸附测定 左心室心尖部分组织,下同)50 mg,加入 4 ℃生理盐水
(ELISA)检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司, 适量,超声(功率:250 W,频率:20 kHz)匀浆,于 4 ℃下
批号分别为1321362318、1345316165);ET-1、IFN-γ ELI- 以4 000 r/min离心10 min,取上清液,置于-20 ℃低温保
SA检测试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号分别为 存,待检。采用ELISA法以酶标仪检测各组大鼠心肌组
20170726、20180332);苏木精、伊红染色试剂(上海蓝季 织中 CRP、IL-1β、ET-1、IFN-γ水平。严格按照相应试剂
科技发展有限公司,批号分别为A10034、A10022);其余 盒说明书操作。
试剂均为分析纯,水为蒸馏水。 2.5 心肌组织形态学观察
1.4 动物 取缺血区心肌组织适量,以生理盐水洗净,置于4%
SPF级SD大鼠70只,雌雄各半,9~10周龄,体质量 多聚甲醛溶液中固定 24 h,常规乙醇梯度脱水、二甲苯
170~195 g,由右江民族医学院实验动物中心提供,动物 透明、石蜡包埋、切片(厚度约5 μm),经脱蜡、复水后,行
使用许可证号:SYXK 桂 2017-0004。所有大鼠均分笼 苏木精-伊红(HE)染色、乙醇梯度脱水、二甲苯透明,以
常规饲养,自由饮食、饮水。 中性树脂封片后,使用显微镜观察各组大鼠心肌组织形
2 方法 态学特征并拍照。
2.1 壮通饮水提物的制备 2.6 统计学方法
取扶芳藤、参三七、黄花倒水莲饮片各适量,粉碎, 采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。计量资
过 50 目筛,按处方量以质量比 6 ∶ 3 ∶ 4 混合,用 10 倍量 料以 x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组
(g/mL)水煎煮,滤过。滤液置于水浴锅中,蒸干,即得壮 间比较采用 Tukey’s 或 Dunnett’s t 检验。P<0.05 为差
通饮水提物浸膏(每 100 克药材得浸膏 60 g)。临用前, 异有统计学意义。
将上述浸膏用水稀释,得质量浓度为2.72 g/mL(按水提 3 结果
物浸膏质量计)的药液,备用。 3.1 壮通饮水提物对大鼠心功能的影响
2.2 分组、造模与给药 与对照组比较,模型组大鼠LVEDV、LVESV均显著
采用随机数字表法将大鼠随机分为对照组、假手术 升高,SV、LVEF均显著下降,差异均有统计学意义(P<
组、模型组、阳性组(复方丹参滴丸,0.08 g/kg,以水为溶 0.05或P<0.01);而假手术组大鼠上述指标与对照组比
剂;剂量根据临床成人用量换算而得)以及壮通饮水提 较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,阳
物低、中、高剂量组(6.8、13.6、27.2 g/kg,以水提物浸膏质 性组大鼠 LVEDV、LVESV,壮通饮水提物中、高剂量组
量计,以水为溶剂;剂量设置参考文献[10]),每组 10 大鼠 LVEDV 以及壮通饮水提物各剂量组大鼠 LVESV
只。参考文献[11]及本课题组前期实验方法复制 CHD 均显著降低,阳性组大鼠SV、LVEF,壮通饮水提物各剂
大鼠模型:除对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射 10% 量组大鼠SV以及壮通饮水提物中、高剂量组大鼠LVEF
水合氯醛溶液(3.5 mL/kg)进行麻醉,连接小动物呼吸机 均 显 著 升 高 ,差 异 均 有 统 计 学 意 义(P<0.05 或 P<
进行机械辅助通气(呼吸频率:80 次/min,潮气量:30~ 0.01),详见表1。
40 mL/kg,呼吸时间比:1 ∶ 1),并进行心电图监护。大鼠 表1 各组大鼠心功能检测结果(x±±s,n=10)
经左侧开胸后,暴露心脏,辨认并结扎左心室回旋支末 Tab 1 Determination results of cardiac function of
梢,直至观察到结扎下方心肌颜色逐渐变为灰白色(即 rats in each group(x±±s,n=10)
缺血发生)且心电图出现S-T段抬高0.2 mm或者出现增 组别 LVEDV,mL LVESV,mL SV,mL LVEF,%
高、增宽的QRS波,即表明结扎成功。缝合切口后,置笼 对照组 4.16±0.35 0.51±0.07 3.26±1.12 0.78±0.06
假手术组 4.32±0.37 0.62±0.16 3.38±1.15 0.67±0.14
中饲养,并于大鼠大腿肌内注射青霉素钠80万单位(每
模型组 6.18±0.86 * 5.09±0.34 ** 0.98±0.12 * 0.32±0.15 *
日1次,连续3 d)以预防感染。假手术组只开胸不结扎, 阳性组 4.65±0.43 # 0.57±0.14 ## 3.22±1.02 # 0.72±0.07 #
其余操作同上。术后1周,对照组、假手术组、模型组大 壮通饮水提物低剂量组 5.02±0.47 0.92±0.26 # 2.43±0.22 # 0.42±0.18
鼠均灌胃等体积水,各给药组大鼠均灌胃相应药物;每 壮通饮水提物中剂量组 4.62±0.39 # 0.55±0.12 ## 3.17±0.98 # 0.76±0.04 #
壮通饮水提物高剂量组 4.64±0.41 # 0.68±0.18 # 3.08±0.94 # 0.56±0.19 #
日1次,连续4周。
注:与对照组比较, P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<
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2.3 心功能检测
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0.05,P<0.01
于末次给药2 h后,采用彩色多普勒超声诊断仪(探 Note:vs. control group, P<0.05, P<0.01;vs. model group,
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头频率:2.5 MHz)测量各组大鼠的左室舒张末期容积 # P<0.05,P<0.01
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