Page 39 - 2019年9月第30卷第18期
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植物黄花倒水莲[Polygala aureocauda Dunn]的根。               (LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)、每搏量(SV)、
        1.3 药品与试剂                                           左室射血分数(LVEF),观察并记录至少3个心动周期的
            注射用青霉素钠(华北制药股份有限公司,批号:                          数据,取其平均值作为检测结果。
        D0801320,规格:80万单位);复方丹参滴丸(阳性对照,                     2.4 心肌组织CRP、IL-1β、ET-1、IFN-γ水平检测
        天士力医药集团股份有限公司,批号:151115,规格:薄                            取缺血区心肌组织(对照组和假手术组大鼠取对应
        膜衣滴丸每丸重27 mg);CRP、IL-1β酶联免疫吸附测定                     左心室心尖部分组织,下同)50 mg,加入 4 ℃生理盐水
        (ELISA)检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司,                         适量,超声(功率:250 W,频率:20 kHz)匀浆,于 4 ℃下
        批号分别为1321362318、1345316165);ET-1、IFN-γ ELI-         以4 000 r/min离心10 min,取上清液,置于-20 ℃低温保
        SA检测试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号分别为                           存,待检。采用ELISA法以酶标仪检测各组大鼠心肌组
        20170726、20180332);苏木精、伊红染色试剂(上海蓝季                  织中 CRP、IL-1β、ET-1、IFN-γ水平。严格按照相应试剂
        科技发展有限公司,批号分别为A10034、A10022);其余                     盒说明书操作。
        试剂均为分析纯,水为蒸馏水。                                      2.5 心肌组织形态学观察
        1.4 动物                                                  取缺血区心肌组织适量,以生理盐水洗净,置于4%
            SPF级SD大鼠70只,雌雄各半,9~10周龄,体质量                     多聚甲醛溶液中固定 24 h,常规乙醇梯度脱水、二甲苯
        170~195 g,由右江民族医学院实验动物中心提供,动物                       透明、石蜡包埋、切片(厚度约5 μm),经脱蜡、复水后,行
        使用许可证号:SYXK 桂 2017-0004。所有大鼠均分笼                     苏木精-伊红(HE)染色、乙醇梯度脱水、二甲苯透明,以
        常规饲养,自由饮食、饮水。                                       中性树脂封片后,使用显微镜观察各组大鼠心肌组织形
        2 方法                                                态学特征并拍照。
        2.1  壮通饮水提物的制备                                      2.6  统计学方法
            取扶芳藤、参三七、黄花倒水莲饮片各适量,粉碎,                             采用SPSS 22.0软件对数据进行统计分析。计量资
        过 50 目筛,按处方量以质量比 6 ∶ 3 ∶ 4 混合,用 10 倍量               料以 x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组
        (g/mL)水煎煮,滤过。滤液置于水浴锅中,蒸干,即得壮                        间比较采用 Tukey’s 或 Dunnett’s t 检验。P<0.05 为差
        通饮水提物浸膏(每 100 克药材得浸膏 60 g)。临用前,                     异有统计学意义。
        将上述浸膏用水稀释,得质量浓度为2.72 g/mL(按水提                       3 结果
        物浸膏质量计)的药液,备用。                                      3.1  壮通饮水提物对大鼠心功能的影响
        2.2  分组、造模与给药                                           与对照组比较,模型组大鼠LVEDV、LVESV均显著
            采用随机数字表法将大鼠随机分为对照组、假手术                          升高,SV、LVEF均显著下降,差异均有统计学意义(P<
        组、模型组、阳性组(复方丹参滴丸,0.08 g/kg,以水为溶                     0.05或P<0.01);而假手术组大鼠上述指标与对照组比
        剂;剂量根据临床成人用量换算而得)以及壮通饮水提                            较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,阳
        物低、中、高剂量组(6.8、13.6、27.2 g/kg,以水提物浸膏质                性组大鼠 LVEDV、LVESV,壮通饮水提物中、高剂量组
        量计,以水为溶剂;剂量设置参考文献[10]),每组 10                        大鼠 LVEDV 以及壮通饮水提物各剂量组大鼠 LVESV
        只。参考文献[11]及本课题组前期实验方法复制 CHD                         均显著降低,阳性组大鼠SV、LVEF,壮通饮水提物各剂
        大鼠模型:除对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射 10%                          量组大鼠SV以及壮通饮水提物中、高剂量组大鼠LVEF
        水合氯醛溶液(3.5 mL/kg)进行麻醉,连接小动物呼吸机                      均 显 著 升 高 ,差 异 均 有 统 计 学 意 义(P<0.05 或 P<
        进行机械辅助通气(呼吸频率:80 次/min,潮气量:30~                      0.01),详见表1。
        40 mL/kg,呼吸时间比:1 ∶ 1),并进行心电图监护。大鼠                       表1 各组大鼠心功能检测结果(x±±s,n=10)
        经左侧开胸后,暴露心脏,辨认并结扎左心室回旋支末                            Tab 1 Determination results of cardiac function of
        梢,直至观察到结扎下方心肌颜色逐渐变为灰白色(即                                   rats in each group(x±±s,n=10)
        缺血发生)且心电图出现S-T段抬高0.2 mm或者出现增                        组别           LVEDV,mL  LVESV,mL  SV,mL   LVEF,%
        高、增宽的QRS波,即表明结扎成功。缝合切口后,置笼                          对照组          4.16±0.35  0.51±0.07  3.26±1.12  0.78±0.06
                                                            假手术组         4.32±0.37  0.62±0.16  3.38±1.15  0.67±0.14
        中饲养,并于大鼠大腿肌内注射青霉素钠80万单位(每
                                                            模型组          6.18±0.86 *  5.09±0.34 **  0.98±0.12 *  0.32±0.15 *
        日1次,连续3 d)以预防感染。假手术组只开胸不结扎,                         阳性组          4.65±0.43 #  0.57±0.14 ##  3.22±1.02 #  0.72±0.07 #
        其余操作同上。术后1周,对照组、假手术组、模型组大                           壮通饮水提物低剂量组   5.02±0.47  0.92±0.26 #  2.43±0.22 #  0.42±0.18
        鼠均灌胃等体积水,各给药组大鼠均灌胃相应药物;每                            壮通饮水提物中剂量组   4.62±0.39 #  0.55±0.12 ##  3.17±0.98 #  0.76±0.04 #
                                                            壮通饮水提物高剂量组   4.64±0.41 #  0.68±0.18 #  3.08±0.94 #  0.56±0.19 #
        日1次,连续4周。
                                                               注:与对照组比较, P<0.05, P<0.01;与模型组比较,P<
                                                                                     * *
                                                                                                         #
                                                                             *
        2.3  心功能检测
                                                                ##
                                                            0.05,P<0.01
            于末次给药2 h后,采用彩色多普勒超声诊断仪(探                           Note:vs. control group, P<0.05, P<0.01;vs. model group,
                                                                                        * *
                                                                                *
        头频率:2.5 MHz)测量各组大鼠的左室舒张末期容积                         # P<0.05,P<0.01
                                                                   ##
        ·2482  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18                                中国药房    2019年第30卷第18期
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