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测量其簇晶棱角的角度值，统计分析结果显示，大黄的                           2.1 紫外分光光度法
        草酸钙簇晶棱角的平均角度值为 63.04，与其他药材的                            在中药成分的含量测定研究中，光谱法具有专属性
        簇晶角度有显著性差异（P＜0.05），可作为大黄显微鉴                        强、灵敏、准确、快速等优势。比色法是大黄中总蒽醌、
        定新的参考依据。                                           鞣质和多糖含量测定的常用方法之一。魏江存等 以
                                                                                                       [19]
        1.3 TLC鉴别                                          大黄素为对照品，1％醋酸镁甲醇溶液为显色剂，用紫外
            TLC是进行中药鉴定的一种常用方法和重要技术，                        分光光度法对生大黄和醋大黄中总蒽醌的含量进行了
        准确性和专属性较强。2015 年版《中国药典》（一部）收                       测定，揭示了大黄炮制前后总蒽醌的含量变化。郭东艳
        录了以土大黄苷为鉴别指标的TLC鉴别方法，展开剂为                          等 采用紫外分光光度法测定了大黄炮制前后（即生药
                                                             [20]
        石油醚（30～60 ℃）-甲酸乙酯-甲酸（15 ∶ 5 ∶ 1，V/V/V）的            与炭药）的鞣质含量，以磷钼钨为显色剂，干酪素为鞣质
                [3]
        上层溶液 。为获得更好的检测效果，尚磊 以土大黄                           吸附剂，没食子酸为对照品，在760 nm波长处测定其吸
                                             [14]
        苷为检测指标，对提取溶剂、提取方法、薄层展开剂进                           光度，计算鞣质含量。结果表明，与生药相比，炮制后鞣
        行了优化，最终确定提取溶剂为甲醇，以超声波提取作                           质含量均有不同程度的降低，该法适用于大黄及其炮制
        为供试品溶液制备方法、以苯-甲酸乙酯-甲酸-甲醇                           品中鞣质含量的测定。对于大黄中多糖含量的测定，
       （30 ∶ 10 ∶ 0.1 ∶ 15，V/V/V/V）为展开剂，用于河套大黄和华                  [21]
                                                           何杏等 采用水提醇沉法提取大黄多糖，以葡萄糖为对
        北大黄2种伪品与正品大黄饮片的区分，效果较好；该研                          照品，提取物以硫酸-苯酚显色后用紫外分光光度计测
        究还对 10 批市售大黄饮片进行了检测，结果发现其中
                                                           定吸光度，可实现对大黄中多糖的快速、准确定量分析。
        50％有土大黄苷成分，说明市售药材伪品较多。                             2.2 荧光光谱法
        1.4 分子鉴定
                                                               大黄中的蒽醌类、鞣质类、芦荟苷类等物质多具有
            随着分子生物学的快速发展，分子标记技术已成为
                                                           荧光特性，可采用荧光分光光度法对其进行含量测定。
        中药学研究的一项新的技术手段。DNA分子标记技术
                                                           于建玉等 分别测定了大黄酸和大黄素的荧光光谱，结
                                                                    [22]
        是目前中药分子鉴定的主要形式，为中药四大鉴定（基
                                                           果表明荧光光谱可准确、清晰地对大黄成分进行测定，
        源鉴定、性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别）方法的重要                           测定结果可作为药材评价的参考。李申丽 研究了大
                                                                                                 [23]
        补充。
                                                           黄酚、大黄素甲醚的荧光光谱，建立了直接用溶液荧光
            费凌云 采用 ITS2 碱基序列对中药大黄及其易混
                  [15]
                                                           法测定大黄中芦荟大黄素的分析方法，更为快速、便捷。
        伪品（土大黄、虎杖）原植物进行鉴定，通过对 3 种药材
                                                           2.3  NIR法
        rDNA中ITS2碱基序列的扩增及分析，成功区分了大黄
                                                               NIR技术是近年来新兴的一种绿色分析技术，具有
                             [16]
        与土大黄、虎杖。费烨等 采用matK基因序列分析技术                                                           [24]
        对高山大黄进行了分子鉴定研究，结果表明高山大黄                            高效、简便、无损、环保等优点。耿炤等 通过声光可调
                                                           滤光器-NIR 仪对大黄乙醇提取液比重（密度）及大黄素
       （R. nobile Hook. f. et Thoms）matK基因序列的特异性位
                                                           含量进行在线分析，并采用偏最小二乘法分别建立了
        点与掌叶组和波叶组大黄存在显著差异。张晓芹等                        [17]
                                                           NIR 与含量、比重（密度）的校正模型。结果，其建立的
        通过对大黄正品基源及常用混淆品药材matK基因序列
                                                           大黄乙醇提取液 NIR 校正模型，完成 1 次比重和含量的
        的差异分析，总结了大黄正品基源与混淆品的基因型对
                                                                                                     [25]
        应规律，成功鉴别了混淆品与正品的基源，实现了对大                           测定只需2 min，大大缩短了测定时间。于晓辉等 采用
        黄药材基源品种的鉴定。姬可平等 对大黄种子 DNA                          NIR和径向基函数神经网络对大黄样品中4类有效成分
                                       [18]
        中 rRNA 基因内转录间隔区进行了扩增和测序，其应用                        （蒽醌及其单糖苷类、水溶性蒽苷类、芪苷类、鞣质）的含
        rRNA 基因间隔区碱基序列分析成功实现了对大黄的                          量进行了定量预测，结果表明该法作为中药材复杂体系
        鉴定。                                                中化学组分定量测定的方法，可同时对多种组分进行检
                                                                        [26]
        2 质量控制                                             测。范积平等 通过HPLC法测定了3个不同产地大黄
            2015 年版《中国药典》（一部）采用高效液相色谱                      中大黄素、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素的含量，用41个
       （HPLC）法，以 5 种蒽醌类成分的总量（不得少于 1.5％）                    样品建立了NIR法校正方程，并预测了大黄样品中各上
        及游离蒽醌的总量（不得少于 0.20％）作为含量测定指                        述活性成分的含量，结果其建立的大黄蒽醌类化合物含
        标用于中药大黄的质量控制 。日本药典与韩国药典亦                           量测定方法可实现对大黄指标性成分含量的定量分析，
                                [3]
        采用 HPLC 法，区别在于以“番泻苷 A 含量不得低于                       且简便、快速。
        0.25％”作为大黄质量控制标准。除HPLC法之外，光谱                       2.4 HPLC法
        测定技术[如紫外分光光度法、荧光光谱法、近红外光谱                              HPLC法具有灵敏度、准确度、精密度和自动化程序
       （NIR）法]、色谱及色谱-质谱联用技术（如 HPLC-MS）、                    高、重现性好的特点，是近年来大黄分析研究中应用最
                                                                                    [27]
        毛细管电泳技术（CE）、一测多评技术（QAMS）、指纹图                       广泛的检测方法。刘远平等 采用 HPLC 法对四川、陕
        谱技术、免疫检测技术等也被广泛应用于大黄的质量                            西、云南三地产药用大黄中大黄素、大黄酸、大黄酚、芦
        控制。                                                荟大黄素、大黄素甲醚等5种游离蒽醌类成分的含量进


        中国药房    2019年第30卷第18期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 18  ·2585  ·
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