Page 69 - 2019年8月第30卷第16期
P. 69
表1 安儿宁颗粒的体外抑菌活性(n=3) 表3 安儿宁颗粒对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO
Tab 1 Antibacterial activity of An’erning granule in 的影响(n=3)
vitro(n=3) Tab 3 Effects of An’erning granule on the release of
安儿宁颗粒剂量,mg/mL 达MIC时药 NO in LPS-induced RAW 264.7 cells(n=3)
菌种 MIC
100 50 25 12.5 6.25 3.125 1.562 5 物稀释度 组别 剂量,mg/mL NO含量(x±s),μmol/mL NO释放抑制率,%
伤寒沙门菌 - - + + + + + 2 50. 空白对照组 1.154±0.121
大肠埃希菌(临床分离菌株) - - + + + + + 2 50. LPS模型组 4.240±0.256 *
铜绿假单胞菌 - - - + + + + 4 25. 安儿宁颗粒给药组 1.25 1.235±0.251 Δ 97.39
粪肠球菌 - - - + + + + 4 25. 0.625 2.893±0.461 Δ 43.64
蜡样芽孢杆菌 - - - + + + + 4 25. 0.312 5 2.812±0.070 Δ 46.29
变形杆菌 - - - - + + + 8 12.5 0.156 25 3.912±0.071 10.61
大肠埃希菌(标准菌株) - - - - + + + 8 12.5 注:与空白对照组比较,P<0.05;与LPS模型组比较,P<0.05
*
Δ
肺炎克雷伯菌 - - - - + + + 8 12.5 *
枯草芽孢杆菌 - - - - + + + 8 12.5 Note:vs. blank control group, P<0.05;vs. LPS model group,
Δ P<0.05
肺炎链球菌 - - - - - + + 16 6.25
表皮葡萄球菌 - - - - - + + 16 6.25 克雷伯菌均存在于呼吸道,可引起支气管炎、大叶性肺
注:“+”表示培养基浑浊;“-”表示培养基澄清 炎和脑膜炎等疾病,其中前者为革兰氏阳性球菌,对青
Note:“+”means turbid culture medium;“-”means clear culture
霉素类抗生素的耐药现象目前极少,而后者为革兰氏
medium
[16]
阴性球菌,存在于呼吸道和肠道,其感染致死率较高 。
表2 安儿宁颗粒对RAW 264.7细胞和小鼠脾脏细胞增
粪肠球菌、大肠埃希菌和变形杆菌均可引起消化道感
殖的影响(n=3)
[17]
染,诱发各种疾病 。枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌及
Tab 2 Effects of An’erning granule on the prolifera-
伤寒沙门菌易污染食物产生肠毒素,并导致食物中毒 。
[18]
tion of RAW 264.7 cells and spleen lymphocyte
铜绿假单胞菌感染易引起败血症和菌血症,且具有高度
of mice(n=3)
[19]
耐药性,在烧伤后感染可能导致患者死亡 。本研究发
OD值(x±s)
组别 剂量,mg/ mL 现,安儿宁颗粒对上述多种临床常见细菌均具有一定抑
RAW264.7细胞 小鼠脾脏淋巴细胞
空白对照组 0.145±0.013 0.217±0.007 制作用,表现出较好的广谱抗菌效果;根据 MIC 值结果
安尔宁颗粒给药组 1.25 0.148±0.012 0.226±0.019 可知,其对表皮葡萄球菌和肺炎链球菌具有相对较强的
0.625 0.157±0.009 0.240±0.012 *
0.312 5 0.149±0.012 0.237±0.005 * 抑制作用,对大肠埃希菌(临床分离菌株)和伤寒沙门菌
3.2.2 安儿宁颗粒对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO 的抑制作用较弱。该颗粒剂的体内抗菌效果有待于进
的影响 与空白对照组比较,LPS 模型组细胞中 NO 含 一步研究。
量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),表明炎症模 巨噬细胞是重要的免疫细胞,能对机体起到免疫防
型成功建立;与模型组比较,安儿宁颗粒 0.312 5~1.25 御、免疫监视、免疫调节和抗原呈递等作用,在免疫系
[20]
mg/mL 剂量组细胞中 NO 含量显著降低,差异均有统计 统中发挥着重要作用 。活化后的巨噬细胞对多种肿
学意义(P<0.05),表明上述剂量安儿宁颗粒均能抑制 瘤细胞均有杀灭作用,可通过释放 NO、白细胞介素 1β
LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO,且NO释放抑制率 (IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-12 等因子诱
[21]
呈剂量依赖趋势,提示其抗炎效果良好。安儿宁颗粒对 导细胞免疫,杀灭病原体 。巨噬细胞主要通过释放
LPS 诱导 RAW 264.7 细胞释放 NO 的影响考察结果见 NO 发挥抗病原生物、杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞等
表3。 作用:一方面,巨噬细胞能通过分泌 NO,提高对各种病
3.3 安儿宁颗粒的体外免疫活性 原体杀灭的效率;另一方面,其产生的过量NO可促进炎
与 空 白 对 照 组 比 较 ,安 儿 宁 颗 粒 0.312 5、0.625 症发生,诱导炎症因子,如 TNF-α、IL-1β和 IL-6 等的释
[9]
mg/mL 剂量组细胞 OD 值显著升高,差异有统计学意义 放,从而启动炎症反应 。当巨噬细胞经 LPS 诱导活化
(P<0.05),并呈剂量依赖趋势,表明此剂量能明显促进 后,会合成并释放大量炎症因子如NO,加重机体的炎症
淋巴细胞增殖。安儿宁颗粒对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的 反应,对组织器官造成损伤 。因此,可采用 LPS 建立
[21]
影响考察结果见表2(注:当安儿宁颗粒剂量≥2.5 mg/mL 巨噬细胞炎症模型,并根据药物降低巨噬细胞中 NO 释
时,药液颜色较深,干扰试验结果,略去)。 放量的程度来反映药物的抗炎活性 。本研究发现,安
[10]
4 讨论 儿宁颗粒在0.312 5~1.25 mg/mL的剂量下对细胞中NO
表皮葡萄球菌滋生于人体的皮肤和阴道等,是导致 释放的抑制率达 46.29%~97.39%,表明其能抑制 LPS
医院交叉感染的主要细菌之一 [14-15] 。肺炎链球菌和肺炎 诱导巨噬细胞中NO的产生,具有一定的体外抗炎活性。
·2224 · China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 16 中国药房 2019年第30卷第16期