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表1 安儿宁颗粒的体外抑菌活性(n=3)                          表3   安儿宁颗粒对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO
        Tab 1 Antibacterial activity of An’erning granule in     的影响(n=3)
               vitro(n=3)                                   Tab 3 Effects of An’erning granule on the release of
                            安儿宁颗粒剂量,mg/mL      达MIC时药              NO in LPS-induced RAW 264.7 cells(n=3)
        菌种                                           MIC
                      100  50  25  12.5  6.25 3.125 1.562 5  物稀释度  组别   剂量,mg/mL   NO含量(x±s),μmol/mL  NO释放抑制率,%
        伤寒沙门菌         -   -  +   +  +   +   +     2  50.    空白对照组                     1.154±0.121
        大肠埃希菌(临床分离菌株) -   -  +   +  +   +   +     2  50.    LPS模型组                    4.240±0.256 *
        铜绿假单胞菌        -   -  -   +  +   +   +     4  25.    安儿宁颗粒给药组     1.25         1.235±0.251 Δ  97.39
        粪肠球菌          -   -  -   +  +   +   +     4  25.                 0.625        2.893±0.461 Δ  43.64
        蜡样芽孢杆菌        -   -  -   +  +   +   +     4  25.                 0.312 5      2.812±0.070 Δ  46.29
        变形杆菌          -   -  -   -  +   +   +     8  12.5                0.156 25     3.912±0.071    10.61
        大肠埃希菌(标准菌株)   -   -  -   -  +   +   +     8  12.5      注:与空白对照组比较,P<0.05;与LPS模型组比较,P<0.05
                                                                               *
                                                                                                    Δ
        肺炎克雷伯菌        -   -  -   -  +   +   +     8  12.5                            *
        枯草芽孢杆菌        -   -  -   -  +   +   +     8  12.5      Note:vs. blank control group, P<0.05;vs. LPS model group,
                                                            Δ P<0.05
        肺炎链球菌         -   -  -   -  -   +   +    16   6.25
        表皮葡萄球菌        -   -  -   -  -   +   +    16   6.25  克雷伯菌均存在于呼吸道,可引起支气管炎、大叶性肺
            注:“+”表示培养基浑浊;“-”表示培养基澄清                         炎和脑膜炎等疾病,其中前者为革兰氏阳性球菌,对青
            Note:“+”means turbid culture medium;“-”means clear culture
                                                            霉素类抗生素的耐药现象目前极少,而后者为革兰氏
        medium
                                                                                                         [16]
                                                            阴性球菌,存在于呼吸道和肠道,其感染致死率较高 。
        表2    安儿宁颗粒对RAW 264.7细胞和小鼠脾脏细胞增
                                                            粪肠球菌、大肠埃希菌和变形杆菌均可引起消化道感
              殖的影响(n=3)
                                                                            [17]
                                                            染,诱发各种疾病 。枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌及
        Tab 2 Effects of An’erning granule on the prolifera-
                                                            伤寒沙门菌易污染食物产生肠毒素,并导致食物中毒 。
                                                                                                         [18]
               tion of RAW 264.7 cells and spleen lymphocyte
                                                            铜绿假单胞菌感染易引起败血症和菌血症,且具有高度
               of mice(n=3)
                                                                                                [19]
                                                            耐药性,在烧伤后感染可能导致患者死亡 。本研究发
                                       OD值(x±s)
        组别         剂量,mg/ mL                                现,安儿宁颗粒对上述多种临床常见细菌均具有一定抑
                               RAW264.7细胞    小鼠脾脏淋巴细胞
        空白对照组                   0.145±0.013   0.217±0.007   制作用,表现出较好的广谱抗菌效果;根据 MIC 值结果
        安尔宁颗粒给药组     1.25       0.148±0.012   0.226±0.019   可知,其对表皮葡萄球菌和肺炎链球菌具有相对较强的
                     0.625      0.157±0.009   0.240±0.012 *
                     0.312 5    0.149±0.012   0.237±0.005 *  抑制作用,对大肠埃希菌(临床分离菌株)和伤寒沙门菌
        3.2.2  安儿宁颗粒对LPS诱导RAW 264.7细胞释放NO                   的抑制作用较弱。该颗粒剂的体内抗菌效果有待于进
        的影响      与空白对照组比较,LPS 模型组细胞中 NO 含                   一步研究。
        量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),表明炎症模                            巨噬细胞是重要的免疫细胞,能对机体起到免疫防
        型成功建立;与模型组比较,安儿宁颗粒 0.312 5~1.25                     御、免疫监视、免疫调节和抗原呈递等作用,在免疫系
                                                                               [20]
        mg/mL 剂量组细胞中 NO 含量显著降低,差异均有统计                       统中发挥着重要作用 。活化后的巨噬细胞对多种肿
        学意义(P<0.05),表明上述剂量安儿宁颗粒均能抑制                         瘤细胞均有杀灭作用,可通过释放 NO、白细胞介素 1β
        LPS诱导的RAW 264.7细胞释放NO,且NO释放抑制率                     (IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-12 等因子诱
                                                                                   [21]
        呈剂量依赖趋势,提示其抗炎效果良好。安儿宁颗粒对                            导细胞免疫,杀灭病原体 。巨噬细胞主要通过释放
        LPS 诱导 RAW 264.7 细胞释放 NO 的影响考察结果见                   NO 发挥抗病原生物、杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞等
        表3。                                                 作用:一方面,巨噬细胞能通过分泌 NO,提高对各种病
        3.3 安儿宁颗粒的体外免疫活性                                    原体杀灭的效率;另一方面,其产生的过量NO可促进炎
            与 空 白 对 照 组 比 较 ,安 儿 宁 颗 粒 0.312 5、0.625        症发生,诱导炎症因子,如 TNF-α、IL-1β和 IL-6 等的释
                                                                                [9]
        mg/mL 剂量组细胞 OD 值显著升高,差异有统计学意义                       放,从而启动炎症反应 。当巨噬细胞经 LPS 诱导活化
        (P<0.05),并呈剂量依赖趋势,表明此剂量能明显促进                        后,会合成并释放大量炎症因子如NO,加重机体的炎症
        淋巴细胞增殖。安儿宁颗粒对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的                            反应,对组织器官造成损伤 。因此,可采用 LPS 建立
                                                                                    [21]
        影响考察结果见表2(注:当安儿宁颗粒剂量≥2.5 mg/mL                      巨噬细胞炎症模型,并根据药物降低巨噬细胞中 NO 释
        时,药液颜色较深,干扰试验结果,略去)。                                放量的程度来反映药物的抗炎活性 。本研究发现,安
                                                                                           [10]
        4 讨论                                                儿宁颗粒在0.312 5~1.25 mg/mL的剂量下对细胞中NO
            表皮葡萄球菌滋生于人体的皮肤和阴道等,是导致                          释放的抑制率达 46.29%~97.39%,表明其能抑制 LPS
        医院交叉感染的主要细菌之一              [14-15] 。肺炎链球菌和肺炎        诱导巨噬细胞中NO的产生,具有一定的体外抗炎活性。


        ·2224  ·  China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 16                                中国药房    2019年第30卷第16期
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