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扶正祛邪类中药能通过多途径、多靶点发挥作用， 1 000 g，即得。以甘草酸的含量为指标进行成分转移监
在治疗感染性疾病尤其是呼吸道感染方面优势显著 。 测，每1 g干浸膏粉相当于安儿宁颗粒13.68 g，相当于生
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安儿宁颗粒处方源于藏医经典方“九西更卓”，至今已有 药材6.57 g。因辅料蔗糖可导致抗菌试验产生假阳性结
300 年应用史；该药由天竺黄、人工牛黄、红花、岩白菜、 果，故本研究以安儿宁颗粒未加蔗糖前的干浸膏粉（即
唐古特乌头、高山辣根菜、甘草、洪连和檀香等9味药材 稠膏在鼓风干燥箱中干燥后获得）添加人工牛黄和檀
组方精制而成，具有清热祛风、止咳化痰的功效，主要用 香、红花挥发油制成不含蔗糖的安儿宁颗粒样品，用于
于治疗小儿风热感冒、咽痛发热、咳嗽有痰、上呼吸道感 后续试验。
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染见上述证候者 。在临床实践中发现，安儿宁颗粒不 LPS（美国 Sigma 公司，批号：S11060）；硫酸庆大霉
仅可用于治疗小儿上呼吸道感染，还可用于治疗小儿急 素注射液（辰欣药业股份有限公司，批准文号：国药准字
性支气管炎、支气管肺炎等下呼吸道感染疾病，对以上 H37021973，规格：2 mL/支）；2％RPMI 1640细胞维持液
疾病引起的发热、咳嗽、咳痰、咽痛等症状也有较好的治 [赛默飞世尔科技（中国）有限公司，批号：61870-036]；
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疗作用 。药效学研究证实，安儿宁颗粒有较好的镇咳 MH（B）肉汤（北京奥博星生物技术有限责任公司，批号：
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祛痰、解热镇痛、抗炎作用 ，且处方中的红花、甘草也已 20151206001）；红细胞裂解液（美国Hyclone公司，批号：
明确具有抗菌、抗炎及增强免疫作用 。为明确安儿宁 00-4333-57）；胎牛血清（浙江天杭生物科技股份有限公
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颗粒抗菌、抗炎和增强免疫的作用，本研究作为“安儿宁 司）；青霉素、链霉素（山东鲁抗医药股份有限公司）；
颗粒二次开发”课题的一部分，就该颗粒剂对常见呼吸 pH7.4 磷酸盐缓冲液（PBS，无菌级别）、0.25％胰蛋白
道感染致病菌、脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞炎症反应的 酶-EDTA（美国 Gibco 公司）；二甲基亚砜（DMSO，天津
抑制作用以及对脾脏细胞增殖的影响进行考察，为该颗 化学试剂厂）；噻唑蓝（MTT，北京索莱宝科技有限公
粒剂临床用药适应证范围的拓宽、进一步深入开发及应 司）；生理盐水（辰欣药业股份有限公司）；水为蒸馏水。
用提供实验依据。 1.3 菌株及细胞株
1 材料 革兰氏阳性菌：肺炎链球菌 CMCC（B）31001，大肠
1.1 仪器 埃希菌（标准菌株）CMCC（B）44102，枯草芽孢杆菌
BS110S 型电子天平（北京赛多利斯天平公司）； CMCC（B）63501，蜡样芽孢杆菌 CMCC（B）63301，伤寒
CKX-31 型倒置显微镜（日本 Olympus 公司）；MK3 型酶 沙门菌CMCC（B）50071，粪肠球菌ATCC 35667，大肠埃
标仪（芬兰Finnpipette公司）；TD5Z型酶标板离心机（湖 希菌（临床分离菌株）D1812；革兰氏阴性菌：表皮葡萄球
南凯达科学仪器有限公司）；LH-SDS 型超净工作台（济 菌ATCC 12228，铜绿假单胞菌CMCC（B）10104，变形杆
南隆宏净化设备有限公司）；HF90 型 CO2细胞恒温培养 菌 CMCC（B）49027，肺炎克雷伯菌 CMCC（B）46117。
箱（上海力申科学仪器有限公司）；MJ37600型全自动高 以上菌株均由山东中医药大学微生物教研室提供。
压灭菌锅（山东德强仪器有限公司）；DW-86L286型低温 RAW 264.7 细胞株（单核巨噬细胞）由山东省医学
储物箱（海尔电器有限公司）；101A-1E型电热鼓风干燥 科学院微生物室提供。
箱（上海市试验仪器总厂）；LRH -250A 型生化培养箱 1.4 动物
（广东医疗器械厂）；Vortex3型涡旋振荡器（德国IKA公 BALB/c 小鼠，SPF 级，雄雌各半，体质量（20±2）g，
司）；SZH-82 型气浴恒温振荡器（江苏省金坛市城东久 由济南朋悦实验动物繁育有限公司提供，动物生产许可
久实验仪器厂）。 证号：SCXK（鲁）20140007。
1.2 药品与试剂 2 方法
安儿宁颗粒（批号：02170612）由金诃藏药股份有限 2.1 安儿宁颗粒的体外抑菌试验
公司提供。处方组成：天竺黄 66.7 g、人工牛黄 5.3 g、甘 参考文献[8]，采用微量稀释法进行试验。取“1.2”
草53.3 g、洪连66.7 g、唐古特乌头66.7 g、红花53.3 g、岩 项下不含蔗糖的安儿宁颗粒样品，以生理盐水配制成
白菜 53.3 g、高山辣根菜 53.3 g、檀香 66.7 g。提取及制 100 mg/mL 的药液，以一次性无菌 0.22 μm 微孔过滤器
备工艺：取檀香、红花提取挥发油（另器收集），残渣与天 滤去杂质和细菌，备用。在 96 孔板每行的第 1～8 孔分
竺黄、甘草、洪连、唐古特乌头、岩白菜、高山辣根菜等 6 别加入液体细菌培养基[MH（B）肉汤粉21 g，加入1 000
味药材混合，加入 10 倍量水（mL/g）煎煮 2 次（分别煎煮 mL 水中加热搅拌至溶解，121 ℃灭菌 20 min，即得]100
3、2 h），合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为 1.30～ μL；在第 1 孔中加入 100 mg/mL 的安儿宁颗粒药液 100
1.35（50 ℃）的稠膏；取稠膏加入人工牛黄和蔗糖（辅料） μL，从第 2～6 孔依次对半稀释至最低质量浓度 1.562 5
适量，制粒，干燥；加入檀香、红花挥发油混匀，制成 mg/mL，作为不同给药剂量组（剂量根据文献[8]方法制
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