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为溶剂），每日1次，连续12周。                                   意义（P＜0.01）。与模型组比较，JYP 中、高剂量组大鼠
        2.2.4  相关指标检测及统计分析            分别于造模后（给药            血钙含量均显著升高；尿毒清组大鼠血清 PTH 含量，
        前）和末次给药后1 h取各组大鼠血液并分离血清，采用                         JYP中、高剂量组PTH、IL-6含量以及各给药组TNF-α含
        ELISA法以酶标仪检测血清中Scr、BUN（给药前及给药                      量均显著降低，差异均有统计学意义（P＜0.05 或 P＜
        后）以及PTH、炎症因子（给药后）含量，分别采用甲基百                        0.01）。但 JYP 对大鼠血磷含量的影响无统计学意义
        里香酚蓝比色法和磷钼酸法检测其血钙、血磷含量（给                           （P＞0.05）。
        药后）。严格按照相应试剂盒说明书操作。采用 SPSS                         2.2.5  炎症因子与钙磷代谢相关指标的相关性分析 由
        22.0软件对数据进行统计分析。计量资料以x±s表示，                        于CRF患者除钙磷代谢紊乱等临床症状外，通常还伴随
                                                                               [15]
        多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用SNK                          不同程度的微炎症状态 ，故本研究采用Pearson检验考
        或 Dunnett’s T3 法，相关性分析采用 Pearson 法。P＜              察了各给药组大鼠血清炎症因子与钙磷代谢相关指标
        0.05为差异有统计学意义，结果见表1、表2。                            的相关性。结果显示，各给药组大鼠的炎症因子 IL-6、
        表 1  各组大鼠给药前后血清 Scr、BUN 含量比较（x±±                   TNF-α与血钙、血磷、PTH 的相关性均无统计学意义
             s，n＝10，μmol/L）                                （P＞0.05），详见表3。
        Tab 1 Comparison of serum contents of Scr and BUN       表3 炎症因子与钙磷代谢相关指标的相关性
               in rats of each group before and after admini-  Tab 3 Correlation between inflammatory factors and
               stration（x±±s，n＝10，μmol/L）                         related indexes of calcium and phosphorus me-
                        给药前                 给药后                   tabolism
        组别
                   Scr       BUN         Scr      BUN      炎症   钙磷代     尿毒清组     JYP低剂量组   JYP中剂量组  JYP高剂量组
        正常组      72.46±25.30  4.60±0.38  79.38±27.46  1.90±0.32  因子  谢指标  r  P    r   P     r   P     r  P
        模型组     151.90±82.25 ＊＊  11.35±2.74 ＊＊  243.49±53.54 ＊＊  5.28±0.89 ＊＊  IL-6  血钙  －0.22  0.64  0.25  0.60  0.05  0.91  －0.20 0.70
        尿毒清组    152.34±30.90 ＊＊  12.09±3.89 ＊＊  92.76±36.04 ##ΔΔ  3.23±1.44 ##ΔΔ  血磷  －0.57  0.24  0.08  0.87  －0.46  0.44  －1.94 0.76
        JYP低剂量组  159.52±29.18 ＊＊  13.37±6.34 ＊＊  143.89±37.03 ##ΔΔ  3.56±0.46 ##ΔΔ  PTH  －0.04  0.93  0.46  0.30  0.05  0.91  －0.64 0.17
        JYP中剂量组  162.82±29.10 ＊＊  10.54±1.47 ＊＊  75.22±25.31 ##ΔΔ  3.09±0.79 ##ΔΔ  TNF-α 血钙  0.14  0.72  －0.11  0.81  －0.05  0.90  －0.63 0.10
        JYP高剂量组  155.83±24.35 ＊＊  10.03±1.57 ＊＊  57.97±19.02 ##ΔΔ  3.18±0.45 ##ΔΔ  血磷  0.57  0.18  －0.41  0.50  0.05  0.93  －0.44 0.45
           注：与正常组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.01；与同组给                  PTH    0.29  0.45  －0.62  0.14  0.16  0.69  0.07 0.87
                        ＊＊
                                          ##
        药前比较，P＜0.01                                        3 讨论
               ΔΔ
                                                ##
                            ＊ ＊
           Note：vs. normal group， P＜0.01；vs. model group， P＜0.01；  3.1  含量测定指标成分的选择及方法的优化
                                   ΔΔ
        vs. the same group before administration， P＜0.01
                                                               现代药理研究表明，黄芪甲苷、大黄素和大黄酚具
        表 2  各组大鼠给药后血钙、血磷和炎症因子含量比较
                                                           有良好的免疫调节、抑制炎症因子表达、抑制肾组织纤
            （x±±s，n＝10）
                                                           维化、改善肾功能等作用           [16-18] ；同时，三者作为黄芪、大黄
        Tab 2  Comparison of the contents of blood calcium，
                                                           的指标成分，含量较高，性质稳定             [9，11] ，故结合JYP的制剂
               phosphorus and inflammatory factors in rats
                                                           工艺，本研究选取君药黄芪中的黄芪甲苷作为水提工艺
               of each group（x±±s，n＝10）
                                                           路线的质控指标，使药大黄中的大黄素和大黄酚作为粉
        组别     血钙，mmol/L  血磷，mmol/L  PTH，pg/mL  IL-6，pg/mL  TNF-α，pg/mL  碎入药工艺路线的质控指标，建立其含量测定方法，以
        正常组    1.65±0.09  2.12±0.22  253.68±12.93  4.68±1.82  236.7±21.52
        模型组    1.39±0.13 ＊＊  2.52±0.92  257.24±24.38  13.47±1.75 ＊＊  472.35±63.64 ＊＊  完善JYP的质量控制体系。
        尿毒清组   1.46±0.19  2.36±0.47  183.01±38.85 #  9.55±3.14  196.09±11.89 ##  本研究参照文献[19]建立了黄芪甲苷的含量测定方
        JYP低剂量组  1.57±0.15  2.16±0.18  188.12±25.95  9.59±3.30  205.19±30.86 ##  法，发现若以氨水作为洗涤溶剂，制得的供试品溶液黏
        JYP中剂量组  1.66±0.10 ##  2.09±0.34  176.42±15.80 ##  8.28±2.10 #  185.12±26.23 ##
        JYP高剂量组  1.73±0.07 ##  2.15±0.72  161.92±17.26 ##  7.61±2.53 #  173.18±13.70 ##  度较大，且色谱图基线不平、峰面积波动大、峰形及分离
                                                           度较差，故将氨水更换为1％氢氧化钠溶液，其余条件不
                                          #
                        ＊＊
           注：与正常组比较， P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，P＜0.01
                                                 ##
           Note：vs. normal group， ＊ ＊ P＜0.01；vs. model group，P＜0.05，  变。结果，黄芪甲苷可达到较理想的分离效果，且峰形
                                                 #
        ##                                                 较好，色谱图基线平稳，黄芪甲苷转移率高，可用于样品
         P＜0.01
            由表1可见，造模后（给药前），模型组和各给药组大                       中黄芪甲苷含量的测定。
        鼠血清Scr、BUN含量均较正常组显著升高，差异均有统                            此外在研究过程中，笔者发现黄芪的另一有效活性
        计学意义（P＜0.01）。给药后，模型组大鼠血清 Scr、                      成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷与酒苁蓉中松果菊苷的极性
        BUN 含量均较正常组显著升高，但各给药组大鼠血清                          相似，干扰较大，而变换流动相、色谱柱、柱温、流速、供
        Scr、BUN含量均较模型组和同组给药前显著降低，差异                        试品制备方法均无法将两者有效分离，故本研究暂未将
        均有统计学意义（P＜0.01）。                                   毛蕊异黄酮葡萄糖苷作为水提工艺路线的质控指标。
            由表2可见，与正常组比较，模型组大鼠血钙含量显                            同时，笔者在建立粉碎入药工艺路线指标成分的含
        著降低，IL-6、TNF-α含量均显著升高，差异均有统计学                      量测定方法时发现，由于处方中有多数药材均经粉碎后


        中国药房    2019年第30卷第16期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 16  ·2197  ·
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