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著降低，MDA含量显著升高，差异均有统计学意义（P＜                         表4 EGCG对心肌缺血再灌注损伤模型小鼠心肌组织
        0.05）。与模型组比较，EGCG 组小鼠 SOD 活性显著升                          中凋亡蛋白表达量及通路相关蛋白磷酸化水平的
        高，MDA 含量显著降低，差异均有统计学意义（P＜                                影响（x±±s，n＝9）
        0.05），详见表3。                                        Tab 4 Effects of EGCG on the expression of myocar-
        3.2.3 EGCG 对心肌组织中凋亡蛋白表达量及通路相                              dial apoptosis proteins and phosphorylation
        关蛋白磷酸化水平的影响             与假手术组比较，模型组小                      level of signaling pathway related proteins in
        鼠心肌组织中 Bax 的相对表达量以及 p-PI3K/PI3K、                          mice with myocardial ischemia-reperfusion in-
        p-Akt/Akt值均显著升高，Bcl-2的相对表达量显著降低，                          jury（x±±s，n＝9）
        差异均有统计学意义（P＜0.05）。与模型组比较，EGCG                      组别        Bcl-2       Bax       p-PI3K/PI3K  p-Akt/Akt
        组 小 鼠 心 肌 组 织 中 Bax 的 相 对 表 达 量 以 及 p-PI3K/        假手术组     1.20±0.02  0.32±0.01   0.21±0.01  0.13±0.01
        PI3K、p-Akt/Akt值均显著降低，Bcl-2的相对表达量显著                 模型组      0.25±0.01 ＊  1.12±0.03 ＊  1.13±0.03 ＊  0.89±0.03 ＊
                                                           EGCG组    0.76±0.03 #  0.86±0.02 #  0.73±0.04 #  0.60±0.08 #
        升高，差异均有统计学意义（P＜0.05），详见图3、表4。
                                                                             ＊
                                                                                              #
                                                               注：与假手术组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05
                                                                                                        #
                                                                                     ＊
                                                               Note：vs. sham operation group， P＜0.05；vs. model group，P＜
                  Bcl-2                      20 kDa
                                                           0.05
                  Bax                        26 kDa        应和细胞凋亡来减少肾组织的缺血再灌注损伤；Zhang
                                                               [10]
                                                           F 等 研究表明，EGCG 可通过抑制炎症反应来发挥对
                GAPDH                        37 kDa
                                                           大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。由此可见，
                       假手术组   模型组    EGCG组
                            A. 凋亡蛋白                        EGCG 具有一定的抗缺血再灌注损伤的药理基础。为
                 p-PI3K                      85 kDa        此，本研究通过构建心肌缺血再灌注损伤细胞和动物模
                                             60 kDa
                                                           型，初步考察了EGCG的保护作用及可能机制。
                  PI3K                      110 kDa
                                                               在哺乳动物中，Bcl-2 蛋白及其编码基因在细胞凋
                                             54 kDa        亡调控过程中具有重要作用，其过度表达可减少氧自由
                 p-Akt                       46 kDa
                                                           基的产生和脂质过氧化物的形成，从而抑制细胞凋亡 。
                                                                                                        [16]
                  Akt                        60 kDa        Bax 为促凋亡因子，其促凋亡作用与诱导胱天蛋白酶
                                                           （Caspase）的释放有关 。由此可见，Bax 和 Bcl-2 蛋白
                                                                               [17]
                GAPDH                        37 kDa        表达的改变可用以评估心肌细胞凋亡水平的变化。
                      假手术组    模型组     EGCG组                PI3K/Akt 通路是调控细胞凋亡的重要信号通路之一，
                           B.通路相关蛋白                        PI3K、Akt 蛋白磷酸化水平的升高会上调心肌细胞中
        图3   EGCG对心肌缺血再灌注损伤模型小鼠心肌组织                        Bax 蛋白的表达，同时下调 Bcl-2 蛋白的表达，从而加速
             中凋亡蛋白表达量及通路相关蛋白磷酸化水平影                         心肌缺血再灌注损伤所致的心肌细胞凋亡 。SOD 可
                                                                                                 [18]
             响的电泳图                                         消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质；而
        Fig 3  Electrophoretic diagrams of the effects of  MDA 是细胞膜脂质过氧化作用的产物之一，其可加
               EGCG on the expression of myocardial apop-  剧细胞膜损伤，可作为评估脂质过氧化程度的重要指
               tosis proteins and phosphorylation level of sig-  标 。细胞试验结果显示，模型组细胞存活率和 Bcl-2
                                                              [19]
               naling pathway related proteins in mice with  相对表达量均较对照组显著降低，而Bax的相对表达量
               myocardial ischemia-reperfusion injury      则显著升高，提示细胞受到缺血再灌注损伤，并出现凋
        4 讨论                                               亡。与模型组比较，5、50、100、200 μmol/L EGCG 组细胞
            随着发病率和致死率的逐年攀升，急性心肌梗死已                         存活率以及 100、200 μmol/L EGCG 组细胞中 Bcl-2 的相
        成为严重威胁人们生命安全的疾病之一，该症的主要治                           对表达量均显著升高，而100、200 μmol/L EGCG组细胞
        疗原则是在心肌梗死发病的早期对其进行干预，干预手                           中Bax的相对表达量均显著降低，提示EGCG可抑制心
        段包括药物溶栓、支架植入和外科搭桥手术等 。但                            肌缺血再灌注损伤所导致的细胞凋亡，且这种作用与调
                                                  [13]
        是，对于冠状动脉血管再通（即心肌缺血再灌注）所导致                          控凋亡蛋白的表达有关。结合体外试验结果，本研究以
        的损伤，临床尚无有效的治疗方法，严重影响了患者的                           心肌缺血再灌注损伤模型小鼠为对象，进一步考察了
        预后。EGCG作为绿茶茶多酚的主要组成成分，已有大                          EGCG 对其心肌细胞的保护作用及可能机制。结果显
        量研究证实其在不同组织缺血再灌注损伤中发挥了重                            示，假手术组小鼠未见心肌组织缺血及心腔扩大等现
                     [14]
        要作用：He J等 研究表明，EGCG是最有效的抗氧化多                       象；模型组小鼠可见明显的心肌梗死现象，其心肌梗死
        酚，可有效抵抗过氧化氢生成，从而发挥对心肌组织的                           面积占横截面积百分比、血清 MDA 含量、心肌组织中
                       [15]
        保护作用；Lv J等 研究表明，EGCG可通过抑制炎症反                       Bax 相对表达量以及 p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt 值均显著

        中国药房    2019年第30卷第16期                                            China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 16  ·2191  ·
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