Page 29 - 2019年2月第30卷第4期

菌、抗病毒、抗炎等方面作用显著 。2015 年版《中国药 量瓶中，加甲醇，超声（功率：250 W，频率：40 kHz，下同）
[6]
[1]
典》（一部） 及相关文献 [7-9] 中仅将苦参碱或芍药苷作为 溶解并定容至刻度，摇匀，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，取
痢必灵含量测定的指标，但中药的有效成分多而复杂， 续滤液，即得。
单一成分的含量测定在一定程度上不能准确、全面地反 2.2.2 供试品溶液 取本品粉末约2 g，置于25 mL具塞
映中药质量。为此，在本研究中笔者采用反相高效液相 锥形瓶中，加甲醇15 mL，称定质量，超声处理15 min，放
色谱法（RP-HPLC）建立了同时测定痢必灵片中苦参碱、 冷，再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，
氧化苦参碱、没食子酸、芍药苷、木香烃内酯和去氢木香 经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
内酯含量的方法，旨在为其质量控制提供参考。 2.2.3 阴性样品溶液 按本品处方比例分别制备缺苦
1 材料 参、缺苦参-白芍-木香、缺苦参-白芍、缺苦参-木香的阴
1.1 仪器 性样品，并按“2.2.2”项下方法制备各阴性样品溶液。
Agilent 1260 型 HPLC 仪，包括二极管全波长阵列 2.3 系统适用性试验
检测器、自动进样器、四元梯度泵（美国 Agilent 公司）； 分别精密吸取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品溶
KQ-250 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）； 液、阴性样品溶液各适量，按“2.1”项下色谱条件进样测
HH-2型数显恒温水浴锅（宁波江南仪器厂）；DHG-912A 定，记录色谱，详见图1。由图1可知，在该色谱条件下，
型电热恒温鼓风干燥箱（上海精密科学仪器有限公司）； 各待测成分与其他色谱峰均能达到基线分离，分离度均
AB135-S型分析天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公 大于1.5，理论板数均不低于2 000，且在相同位置上阴性
司]；R 系列旋转蒸发仪（上海申生科技有限公司）； 样品对测定无干扰。
DP30A型单冲压片机（北京国药龙立科技有限公司）。 120 120
1.2 药品与试剂 100 100 3
80
80
痢必灵片（长春中医药大学自制，批号：20170801、 mAU 60 mAU 60
40
40
20170802、20170803，规格：0.44 g/片）；苦参碱对照品（批 20 1 2 20 4 5 6
0 0
号：110805-200815，纯度：98％）、氧化苦参碱对照品（批 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
t，min t，min
号：110780-200317，纯度：98％）、木香烃内酯对照品（批 A.混合对照品（210 nm） B.混合对照品（225 nm）
号：111524-200514，纯度：92％）、去氢木香内酯对照品 120 120 6
100 100
（批号：111525-200001，纯度：95％）均购于中国食品药 80 1 2 80 4 5
60
品检定研究院；没食子酸对照品（批号：110831-201205， mAU 60 mAU 40 3
40
20
纯度：98％）、芍药苷对照品（批号：110736-200833，纯 20 0
0
度：98％）均购于南京景竹生物科技有限公司；甲醇[色 0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
t，min t，min
谱纯，赛默飞世尔科技（中国）有限公司]；磷酸（分析纯， C.供试品（210 nm） D.供试品（225 nm）
北京化工厂）；纯净水（杭州娃哈哈股份有限公司）。 120 120
100 100
2 方法与结果 mAU 80 mAU 80
60
60
2.1 色谱条件 40 40
20 20
色谱柱：ZORBAX SB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）； 0 0
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
流动相：甲醇（A）-0.1％磷酸溶液（B），梯度洗脱（洗脱程 t，min t，min
序见表 1）；流速：1.0 mL/min；检测波长：210 nm（苦参 E.缺苦参的阴性样品（210 nm） F.缺苦参-白芍-木香的阴性样品（225 nm）
120 5 6 120 4
碱、氧化苦参碱）、225 nm（没食子酸、芍药苷、木香烃内 100 100
80 80
酯、去氢木香内酯）；柱温：30 ℃；进样量：5 μL。 mAU 60 mAU 60 3
表1 梯度洗脱程序 40 3 40
20
20
Tab 1 Gradient elution procedure 0 0 10 20 30 40 0 0 10 20 30 40
t，min A，％ B，％ t，min t，min
0～10 13 87 G.缺苦参-白芍的阴性样品（225 nm） H.缺苦参-木香的阴性样品（225 nm）
11～25 28 72 注：1.苦参碱 ；2.氧化苦参碱 ；3.没食子酸；4.芍药苷；5.木香烃内
酯；6.去氢木香内酯
26～30 40 60
31～50 70 30 Note：1.matrine；2.oxymatrine；3.gallic acid；4.peoniflorin；5.cos-
tunolide；6.dehydrocostus lactone
2.2 溶液的制备
图1 高效液相色谱图
2.2.1 混合对照品溶液 分别精密称取苦参碱对照品
Fig 1 HPLC chromatograms
5.28 mg、氧化苦参碱对照品 12.54 mg、没食子酸对照品
1.33 mg、芍药苷对照品 16.94 mg、木香烃内酯对照品 2.4 线性关系考察
4.77 mg、去氢木香内酯对照品7.16 mg，置于同一10 mL 精密吸取“2.2.1”项下混合对照品溶液0.1、0.5、1、2、

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