Page 22 - 2019年2月第30卷第4期

·药学研究·

川 芎 嗪 对 膝 骨 性 关 节 炎 大 鼠 软 骨 下 骨 中 miR-20b/VEGF 和

BMP2/Smad1通路的影响 Δ

1
1
4
1，2
1
3
梁桂洪 1，2＊ ，梁祖建 ，谢平金 ，潘建科 ，曾令烽 ，杨伟毅 ，黄和涛 ，韩燕鸿 ，刘 军 （1.广州中医药大学第二
1，2 #
1
附属医院/广东省中医院大骨科，广州 510120；2.广东省中医药科学院骨与关节退变及损伤研究团队，广州
510120；3.广州中医药大学第三附属医院老年骨科，广州 510240；4.深圳市罗湖区中医院/上海中医药大学深
圳医院骨科，广东 深圳 518001）
中图分类号 R274.9；R96 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2019）04-0448-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.04.04
摘 要 目的：研究川芎嗪对膝骨性关节炎（KOA）模型大鼠软骨下骨中微小核糖核酸miR-20b/血管内皮生长因子（VEGF）和骨
形态发生蛋白2（BMP2）/Smad1通路的影响，并探讨川芎嗪防治KOA的作用机制。方法：取健康雄性SD大鼠18只，随机分为正常
对照组、模型组、川芎嗪组，每组6只。对后两组大鼠通过膝关节腔注射4％木瓜蛋白酶溶液建立KOA模型。末次注射后第2天
起，川芎嗪组大鼠灌胃川芎嗪混悬液（100 mg/kg）2 mL，正常对照组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水，每天1次，连续6周。给药
结束后，暴露大鼠双侧膝关节软骨进行大体情况观察。截取大鼠膝关节，进行切片和苏木精-伊红（HE）染色，在显微镜下观察组
织病理学变化，并采用改良的Mankin’s评分进行组织学评分。采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测大鼠软骨下骨组织中
VEGF、BMP2、Smad1的mRNA表达和miR-20b表达水平；采用Western Blot法检测VEGF、BMP2、Smad1的蛋白表达水平。结果：
模型组和川芎嗪组大鼠的膝关节均出现不同程度的软骨损伤；与正常对照组比较，模型组大鼠膝关节软骨组织Mankin’s评分显
著升高（P＜0.01）；软骨下骨组织中BMP、Smad1的mRNA和蛋白表达以及miR-20b表达水平均显著降低，VEGF的mRNA和蛋白
表达水平均显著升高（P＜0.01）。与模型组比较，川芎嗪组大鼠关节软骨组织Mankin’s评分显著降低（P＜0.01）；软骨下骨组织中
BMP、Smad1 的 mRNA 和蛋白表达以及 miR-20b 表达水平均显著升高，VEGF 的 mRNA 和蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05 或
P＜0.01）。结论：川芎嗪能修复 KOA 模型大鼠损伤的关节软骨，其机制可能是通过上调软骨下骨中 miR-20b 表达水平，促进
VEGF mRNA降解继而抑制VEGF蛋白的表达，同时激活BMP-2/Smad1信号通路而实现的。
关键词 川芎嗪；膝骨性关节炎；软骨下骨；大鼠；miR-20b；血管内皮生长因子；骨形态发生蛋白；Smad；作用机制

Effects of Ligustrazine on miR-20b/VEGF and BMP2/Smad1 Pathways in Subchondral Bone of Knee
Osteoarthritis Model Rats
LIANG Guihong ，LIANG Zujian ，XIE Pingjin ，PAN Jianke ，ZENG Lingfeng ，YANG Weiyi ，HUANG
1，2
1
1，2
3
1
4
1
1
Hetao ，HAN Yanhong ，LIU Jun （1. Dept. of Orthopedics，the Second Affiliated Hospital of Guangzhou
1，2
University of TCM & Guangdong Provincial Hospital of TCM，Guangzhou 510120，China；2. Bone and Joint
Research Team of Degeneration and Injury，Guangdong Provincial Academy of Chinese Medicinal Sciences，
Guangzhou 510120， China； 3. Dept. of Elder Orthopedics， the Third Affiliated Hospital of Guangzhou
University of TCM，Guangzhou 510240，China；4. Dept. of Orthopedics，Shenzhen Luohu District Hospital of
TCM & Shenzhen Hospital of Shanghai University of TCM，Guangdong Shenzhen 518001，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of ligustrazine on miR-20b/VEGF and BMP2/Smad1 pathways in subchondral
bone of knee osteoarthritis（KOA）model rats，and to investigate the mechanism of ligustrazine for KOA prevention and treatment.
METHODS：Totally 18 healthy male SD rats were randomly
Δ 基 金 项 目 ：国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目（No.81473698、
81873314）；广东省自然科学基金项目（No.2014A030310242）；广东省 divided into normal control group， model group and
财政厅项目（No.粤财社〔2014〕157号、粤财社〔2018〕8号） ligustrazine group，with 6 rats in each group. The rats in the
＊研究实习员，硕士。研究方向：骨与关节退变及损伤疾病的基 latter two groups were used to establish KOA model by
础与临床研究。电话：020-81887233-35633。E-mail：liangguihonghe@ intra-articular injection of 4％ papain solution. From the 2nd
163.com day after the last injection， ligustrazine group was given
# 通信作者：主任中医师，博士生导师，硕士。研究方向：骨与关
intragastrical administration of Ligustrazine suspension （100
节退变及损伤疾病的基础与临床研究。电话：020-81887233-35633。 mg/kg） 2 mL；normal control group and model group were
E-mail：liujun.tcm@163.com

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