Page 142 - 2019年1月第30卷第2期
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脂性阳离子、MTS和HK。本文将着重从亲脂性阳离子、                         脂质体（RLP-TPP-白藜芦醇脂质体），在体外细胞毒性试
        MTS和HK等3个方面对线粒体靶向抗肿瘤制剂进行论                          验中，将 6 种质量浓度（脂质浓度依次为 10、50、100、
        述，以期为研发更优的用于肿瘤治疗的线粒体靶向制剂                           200、500、1 000 μg/mL）的空白脂质体、药物浓度 1、2.5、
        提供参考。                                              5、10、25、50 μmol/L 长循环（LP）-白藜芦醇脂质体、
        1  基于亲脂性阳离子修饰的线粒体靶向抗肿瘤制                            LP-TPP-白藜芦醇脂质体和 RLP-TPP-白藜芦醇脂质体
        剂                                                  分别作用于人三阴性乳腺癌 MDA- MB-231 细胞 48 h，
            正常细胞的线粒体膜电位为 130～150 mV，远高于                    以 MTT 法检测各组细胞活性。结果，即使在脂质浓度
        内质网、核糖体等细胞器的膜电位，故亲脂性阳离子可                           高 达 1 000 μ g/mL 的 条 件 下 ，细 胞 存 活 率 依 然 接 近
                                                           100％，表明空白脂质体对人三阴性乳腺癌 MDA-MB-
        以很容易地通过脂质双分子层的疏水屏障并在线粒体
                                                           231 细胞无明显毒性；随着药物浓度的增加，各组含药脂
              [8]
        中积聚 。此外，肿瘤细胞较正常细胞具有更高的线粒
                                                           质体对人三阴性乳腺癌MDA-MB- 231细胞的毒性逐渐
        体膜电位（大约为 200 mV），那么可将抗肿瘤药物优先
                                                           增加；在相同药物浓度下，RLP-TPP-白藜芦醇和 LP-
                                                  [11]
        靶向于肿瘤细胞的线粒体，诱导肿瘤细胞凋亡 。因
                                                           TPP-白藜芦醇脂质体对人三阴性乳腺癌 MDA-MB-231
        此，通过亲脂性阳离子对抗肿瘤药物进行修饰，以实现
                                                           的细胞毒性显著高于 LP-白藜芦醇脂质体[半数抑制浓
        将药物递送至线粒体的目的。目前使用最多的亲脂性
                                                           度（IC50 ）分别为4.95、8.56 、116.20 μmol/L]。这表明 TPP
        阳离子为三苯基膦（TPP）和地喹氯铵囊泡状聚合体
                                                           的修饰显著增加了白藜芦醇在线粒体内的蓄积浓度，从
       （DQAsomes）。
                                                           而增强了其细胞毒性。此外，RLP-TPP-白藜芦醇脂质体
        1.1 TPP
                                                           毒性略高于LP-TPP-白藜芦醇脂质体，提示RGD的修饰
            TPP是一种可穿过线粒体膜的亲脂性阳离子，因化
                                                           有助于提高细胞对脂质体的摄取量。
        学结构中含有3个苯基，使得该分子具有很强的脂溶性；
                                                               Lee JH 等  [20] 研究了基于三苯基膦-香豆素探针
        同时，结构中磷原子上的正电荷可以离域到3个苯环上，
                                                           （TPP-C）的线粒体靶向药物制剂的抗肿瘤效果，制备了
        形成离域正电荷，促使TPP穿过脂质双分子层 。基于
                                                [12]
                                                           由 TPP 和多柔比星（DOX）修饰的制剂（TPP-C-DOX）。
        上述两个结构特征，TPP可成为线粒体靶向的基本结构
                                                           在体外细胞毒性试验中，将质量浓度（10～50 μmol/L）的
        单元。
                                                           TPP-C和TPP-C- DOX分别作用于多种肿瘤细胞系如人
            近年来，许多研究人员将抗肿瘤药物装载于各种新
                                                           宫颈癌HeLa细胞、人卵巢颗粒癌COV434细胞、人结肠
        剂型中，如脂质体、聚合物纳米粒、胶束及固体脂质纳米
                                                           癌HCT116细胞和人非小细胞肺癌A549细胞24 h，采用
        粒等，通过连接具有某种靶向作用的载体，使其靶向于
                                                           CellTiter-Glo 发光法细胞活力检测试剂盒法检测各组
                                                                      ®
        肿瘤部位以达到良好的治疗效果              [13-16] 。这样的方式为线
                                                           细胞活性。结果，TPP-C 组的肿瘤细胞存活率为 85％，
        粒体靶向抗肿瘤制剂提供了一个新的设计思路，将TPP
                                                           表明 TPP-C 对肿瘤细胞系无明显的细胞毒性。与空白
        分子与抗肿瘤药物结合，制备成具备线粒体靶向功能的                           对照细胞比较，TPP-C-DOX 对细胞有很高的细胞毒性
                                [17]
        新型制剂。Boddapati SV等 研究了线粒体靶向递送神
                                                           作用，肿瘤细胞系观察到较低的细胞存活率，这与DOX
        经酰胺在体内的抗肿瘤效果，制备了由十八烷基 TPP                          的化学治疗效果有关。通过线粒体靶向配体 TPP 介导
       （STPP）修饰的神经酰胺脂质体，在体内抗肿瘤实验中将                         的线粒体跨膜过程，TPP-C-DOX 被内化于线粒体中。
        雌性 BALB/c 小鼠接种小鼠乳腺癌 4T1 细胞以产生肿                     随后，通过 TPP-C 的药物释放性质，DOX 从线粒体中的
        瘤，将小鼠分成3组，即缓冲溶液组、STPP脂质体组及含                        TPP-C- DOX 释放，并且释放的 DOX 将作用于线粒体
        神经酰胺的 STPP 脂质体组，每 2 天注射剂量为 6 mg/kg                 DNA（mtDNA），导致肿瘤细胞线粒体功能障碍，最终死
        的神经酰胺。结果，缓冲溶液组、STPP 脂质体组、含神                        亡。这一结果体现了该载体作为未来临床药物系统的
        经酰胺的 STPP 脂质体组的肿瘤体积每天增长 40、43、                     可靠性，特别是针对细胞器靶向抗肿瘤药物制剂。
        17 mm 。与缓冲溶液组、STPP脂质体组比较，含神经酰                          综上，经TPP修饰的上述抗肿瘤制剂成功地实现了
             3
        胺的 STPP 脂质体组能显著抑制肿瘤生长速率（P＜                         线粒体靶向，且在一定程度上抑制了肿瘤细胞增殖，达
        0.05）。此外，研究中使用的剂量为 6 mg/kg，比 Stover                到了最佳的治疗效果及较低的给药剂量。由此可见，
        TC 等 报道的有效剂量（36～72 mg/kg）至少低6倍，在                   TPP是线粒体靶向抗肿瘤制剂的重要载体，探究TPP与
             [18]
        这种低剂量下，肿瘤生长率也可以显著降低，体现了线                           其他功能性载体的结合，能为新型线粒体靶向抗肿瘤制
        粒体靶向抗肿瘤制剂用药剂量低的特点。此外，段佳                            剂治疗肿瘤提供新的研究思路。
        等 以前药TPP-白藜芦醇为模型药，制备细胞靶向肽精                         1.2 DQAsomes
          [19]
        氨酸-甘氨酸-门冬氨酸（RGD）修饰的线粒体靶向长循环                            地喹氯铵（DQA）是由两个对称分子组成的一种双


        中国药房    2019年第30卷第2期                                               China Pharmacy 2019 Vol. 30 No. 2  ·273  ·
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