Page 64 - 《中国药房》2026年9期
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          主要用于治疗偏头痛及风湿类疾病 。目前商品白芷按                            开花,根部饱满。植株经南方医科大学中医药学院田恩
                                               [2]
          产地分为川白芷、杭白芷、祁白芷和禹白芷 ,均为栽培                           伟副教授鉴定为兴安白芷A. dahurica(Fisch. ex Hoffm.)
          品。兴安白芷 A. dahurica (Fisch.ex Hoffm.) Benth. et      Benth.  et  Hook.  f.  ex  Franch.  et  Savat.。 收 集 根(编 号
          Hook. f. ex Franch. et Savat. 是栽培白芷的近缘类群,主          XABZ_R1~XABZ_R3)、茎(编 号 XABZ_S1~XABZ_
                                            [2]
          要分布在河北、北京、山西和陕西等地区 。分子系统学                           S3)、叶(编号 XABZ_L1~XABZ_L3)3 个部位的样本,
          和群体基因组学证据表明,杭白芷和白芷最近的野生祖                            液氮速冻后,转至-80 ℃超低温冰箱中保存,备用。
          先是兴安白芷,二者由兴安白芷在不同历史时期分别驯                                2-氯-L-苯丙氨酸(批号C105993,纯度98.0%)、甲酸
          化而来   [3―4] ,这一重要发现对于丰富白芷资源、改良现有                    铵(批号 70221,纯度 99.0%)均购自上海阿拉丁生化科
          品种具有重要意义。                                           技股份有限公司。甲醇、乙腈、甲酸均为色谱级,水为超
              目前,栽培白芷的化学物质基础及药理活性等研究                          纯水。
          受到了广泛关注 。研究发现,香豆素、挥发油、多糖、氨                          2 方法
                        [5]
                                     [6]
          基酸等是白芷的主要化学成分 。其中,香豆素及挥发                            2.1 供试品溶液制备
          油类化学成分被证实具有较强的抗炎、镇痛、抗氧化、抗                               将样本从-80 ℃冰箱中取出后,于液氮环境下研磨
                           [7]
          肿瘤以及美白活性 。然而,兴安白芷的相关研究较为                            成细粉。精确称量 100 mg 样本粉末于 2 mL 离心管中,
                                       [8]
          薄弱,当前仅对其根部脂溶性成分 及挥发油成分                     [9―10] 进  加入含内标(2-氯-L-苯丙氨酸,4 mg/L)的冷甲醇 600
          行了报道,忽视了对其茎、叶等非药用部位的挖掘利用。                           μL,涡旋振荡 30 s;加入 100 mg 玻璃珠,放入组织研磨
          由于生理功能差异,植物不同器官次生代谢物的积累往                            器中,在 60 Hz 频率下研磨 90 s,于室温下超声 15 min;
          往具有组织特异性,部分药用植物的非药用部位在某些                            再于 4 ℃下以 12 000 r/min 离心 10 min 后,取上清液以
          活性成分的积累上甚至优于主要药用部位                    [11―12] 。随着   0.22 μm滤膜过滤,滤液加入检测瓶中,待测。
          资源可持续利用理念的推广,探索非药用部位的潜在价                            2.2 色谱条件
          值已成为中药资源研究的重要方向。目前,兴安白芷整                                色谱柱为 ACQUITY UPLC  HSS T3 (150 mm×2.1
                                                                                         ®
          体的次生代谢轮廓及不同部位的代谢差异尚不清楚,限                            mm,1.8 µm)柱,流速为0.25 mL/min,柱温为40 ℃,进样
          制了其资源的进一步开发和利用。因此,系统比较兴安                            量为2 μL。正离子检测模式的流动相为0.1%甲酸乙腈
          白芷根、茎、叶的代谢物差异,不仅有助于揭示其组织特                          (B2)和 0.1% 甲酸水(A2),梯度洗脱程序为:0~1 min,
          异性代谢规律,而且可为白芷非药用部位的资源化利用                            2%B2;1~9 min,2%B2→50%B2;9~12 min,50%B2→
          提供科学依据。                                             98%B2;12~13.5 min,98%B2;13.5~14 min,98%B2→
              代谢组学技术可以对特定时间和条件下生物体中                           2%B2;14~20 min,2%B2。负离子检测模式的流动相为
          所含的整体代谢物进行定性和定量分析,已被广泛用于                            乙腈(B3)和5 mmol/L甲酸铵水(A3),梯度洗脱程序为:
          中药有效成分积累、质量控制、鉴定及质量评价等领                             0~1 min,2%B3;1~9 min,2%B3→50%B3;9~12 min,
            [13]
          域 。因此,本研究拟采用超高效液相色谱-串联质谱                            50%B3→98%B3;12~13.5 min,98%B3;13.5~14 min,
         (UPLC-MS/MS)非靶向代谢组学技术,结合多元统计分                        98%B3→2%B3;14~17 min,2%B3。
          析方法,对兴安白芷根、茎、叶的次生代谢物进行分析,                           2.3 质谱条件
          探讨兴安白芷不同部位的代谢物差异,为白芷药用资源                                采用电喷雾离子源,在正、负离子模式下检测。喷
          的开发和利用提供参考。                                         雾电压为正离子 3.5 kV,负离子 2.5 kV;鞘气流速均为
          1 材料                                                30 arb,辅助气流速均为10 arb;毛细管温度均为325 ℃。
          1.1 主要仪器                                            一级全扫描分辨率为60 000,扫描范围为m/z 100~1 000;
              本研究所用的主要仪器有:Thermo Vanquish 型                   高能碰撞解离二级裂解,碰撞能量为 30 eV,分辨率为
          UPLC系统、Thermo Orbitrap Exploris 120型MS仪(美国          15 000。采集信号强度排名前 4 位的离子进行碎裂,同
          Thermo Fisher Scientific 公司),H1850-R 型冷冻离心机         时采用动态排除策略,去除不必要的MS/MS信息。
         (湖南湘仪实验室仪器开发有限公司),BE-96 型混匀仪                         2.4 样本检测及数据处理
         (海门市其林贝尔仪器制造有限公司),MB-96型组织研                              取“2.1”项下供试品溶液,按“2.2”和“2.3”项下条件
          磨器(浙江美壁仪器有限公司),KQ-800DE 型超声波清                       进行测定,记录数据。通过 Proteowizard(v3.0.8789)软
          洗器(昆山市超声仪器有限公司)。                                    件 中 MSConvert 工 具 将 原 始 质 谱 下 机 文 件 转 换 为
          1.2 主要药品与试剂                                         mzXML格式,然后用Rv3.3.2软件的XCMS包进行峰检
              3 株兴安白芷植株均采自吉林省通化市柳河县                           测、对齐及归一化处理。基于 Human Metabolome Data‐
         (N42°25′49″,E126°06′36″)的同一野生种群,采集时间                 base(HMDB,https://hmdb.ca/)、High Quality Mass Spec‐
          为 2023 年 7 月底;所有植株均处于营养生长期,未抽薹                      tral  Bank(MassBank,https://www. massbank. jp/Mass‐


          · 1162 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 9                              中国药房  2026年第37卷第9期
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