Page 58 - 《中国药房》2026年8期
P. 58

缺血性脑卒中（ischemic stroke，IS）是一种由于脑血               雅吉生物科技有限公司；肿瘤坏死因子 α（tumor necro‐
          管突发性阻塞或管腔狭窄，导致局部脑组织发生缺血性                            sis factor-α，TNF-α）、白细胞介素 1β（interleukin-1β，IL-
          损伤及缺氧性坏死的急性脑血管疾病，具有发病急、致                            1β）、IL-6酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（批号分别
                                                  [1]
          残率高等特点，约占全部脑卒中的 60%～80% 。IS 病                       为ER006、ER008-16、ER003-48）均购于上海吉泰依科赛
          理机制复杂，涉及能量代谢紊乱、氧化应激、炎症级联反                           生物科技有限公司；超氧化物歧化酶（superoxide dis‐
                                   [2]
          应及神经元凋亡等多重环节 。其中，神经元凋亡和神                            mutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、脑源性
          经炎症反应的相互作用被认为是脑缺血再灌注损伤的                             神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）
                                               [2]
          核心机制，直接影响患者的预后与功能恢复 。                               检测试剂盒（批号分别为 A001-3、A003-1、H069-1-2）均
              已有研究表明，生长停滞特异性蛋白 6（growth                       购于南京建成生物工程研究所；TUNEL检测试剂盒（批
          arrest-specific protein 6，Gas6）可通过结合 Axl 受体酪氨       号Y1040S）购于优利科（上海）生命科学有限公司；4’，6-
          酸激酶（Axl receptor tyrosine kinase，简称为“Axl”）受体        二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色液（批号 B1061）购于北
          激活下游磷脂酰肌醇 3 激酶/蛋白激酶 B（phosphoinosi-                 京普利莱基因技术有限公司；ECL 化学发光试剂（货号
          tide 3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt）和丝裂原活化      32106）购 于 美 国 Thermo  Fisher  Scientific 公 司 ；兔 抗
          蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）等信
                                                              Gas6、Bcl-2、Bax、甘油醛 3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-
          号通路，进而促进抗凋亡蛋白[如B细胞淋巴瘤2（B-cell
                                                              3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）多克隆抗体（批号
          lymphoma-2，Bcl-2）]的生成、抑制促凋亡蛋白[如 Bcl-2
                                                              分 别 为 13795-1-AP、26593-1-AP、50599-2-Ig、10494-1-
          相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）]的表达，从
                                                              AP）均购于武汉三鹰生物技术有限公司；兔抗磷酸化
                          [3]
          而减轻神经元凋亡 。
                                                              Axl（phosphorylated Axl，p-Axl）、Axl 多克隆抗体（批号
              红花多糖（safflower polysaccharide，SPS）是从菊科
                                                              分别为 bs-5181R、bs-5180R）均购于北京博奥森生物技
          植物红花 Carthamus tinctorius L. 中提取的一种天然活
                                                              术有限公司；辣根过氧化物酶标记的免疫球蛋白G二抗
          性多糖复合物，具有抗氧化、抗炎及神经保护作用。有
                                                             （批号abs20002）购于爱必信（上海）生物科技有限公司。
          研究证实，SPS可通过下调关键凋亡相关蛋白的表达，有
                                                              1.3 实验动物
          效阻断神经细胞程序性死亡通路的激活，进而抑制脑缺
                                                                  本研究选用 55 只 7 周龄 SD 雄性大鼠，体重 180～
                                           [4]
          血再灌注诱发的神经元凋亡病理进程 。基于此，本研
                                                              200 g，购于武汉贝赛模式生物科技有限公司，实验动物
          究以Gas6/Axl信号通路为核心，初步探讨SPS对IS大鼠
                                                              生产许可证号为 SCXK（鄂）2022-0029。大鼠饲养于温
          神经元凋亡及炎症反应的影响及机制，以期为IS的治疗
                                                              度（22±2）℃、相对湿度（60±5）%、12 h昼夜节律光照的
          提供新靶点，同时为中药活性成分的神经保护作用机制
                                                              环境中。动物实验经深圳北京大学香港科技大学医学
          的阐明提供实验依据。
                                                              中心实验动物伦理委员会批准（实验编号：2023-522）。
          1 材料
                                                              2 方法
          1.1 主要仪器
                                                              2.1 SPS溶液的制备
              DTX880 型多功能酶标仪购于美国 Beckman Coul‐
                                                                              [5]
                                                                  参考相关研究 ，采用醇沉法分离纯化得到SPS，经
          ter公司；CFX96 Touch型实时荧光定量聚合酶链式反应
                                                              高效液相色谱（HPLC）法测定其纯度为 74.05%；实验前
         （qRT‑PCR）仪购于美国 Bio-Rad 公司；4200SF 型凝胶成
          像分析系统购于上海天能科技有限公司；Canon EOS                         用磷酸盐缓冲液（PBS）将 SPS 溶解并配制为 40 g/L 的
          90D 型 数 字 成 像 系 统 购 于 日 本 Canon 公 司 ；Nikon          溶液。
          Eclipse Ni‑E 型正置显微镜购于尼康精机（上海）有限公                    2.2 建模、分组与给药
          司；FA604B 型电子分析天平购于上海精密仪器仪表有                             取45只大鼠，采用改良线栓法构建大鼠大脑中动脉
          限公司。                                                闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）IS 模型，
          1.2 主要药品与试剂                                         以术后 24 h 大鼠的 Zea-Longa 神经功能评分＞1 分判定
                                                                        [6]
              红花饮片（批号 200301）由黑龙江雪灵峰中药饮片                      为建模成功 。最终，41只大鼠建模成功。取40只模型
          有限责任公司提供，经上海中医药大学中药学院安叡教                            大鼠随机分为模型（Model）组，SPS 低、高剂量（SPS-L、
                                                                                [4]
          授课题组鉴定为 C. tinctorius L. 的干燥花；尼莫地平                  SPS-H，50、100 mg/kg ）组和中西药结合（SPS-H+Nim，
                                                                                       [4]
         （nimodipine，Nim）对照品（货号 N149，纯度 99.86%）购              SPS 100 mg/kg+Nim 15 mg/kg ）组，每组10只。另取10
          于美国MCE公司；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE；               只正常大鼠，仅行皮肤切开缝合操作，作为假手术
          货号 C0105S）染色试剂盒购于上海碧云天生物技术股                        （Sham）组。各组大鼠灌胃相应剂量的药物或等体积生
          份有限公司；TTC 染色试剂盒（货号 BB-4291）购于上海                     理盐水，连续干预14 d。


          · 1016 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 8                              中国药房  2026年第37卷第8期
   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63