Page 62 - 《中国药房》2026年5期
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增生性瘢痕是皮肤创面愈合过程中的一种纤维增                           号分别为 JH2305、JH2306）均购自杭州璟鸿生物技术有
                                                  [1]
          殖性疾病，表现为成纤维细胞激活和胶原沉积 。增生                            限公司。
          性瘢痕可引起患者出现瘙痒、疼痛、睡眠障碍、焦虑、抑                           1.3 实验动物
          郁等情况，甚至导致毁容，这对患者身体及心理造成了                                本研究所用动物为雄性新西兰白兔，共 40 只，体重
                  [2]
          严重影响 。然而，目前针对增生性瘢痕的治疗方法仍                            2.4～2.8 kg，3～4 月龄，均购自武汉市万千佳兴生物科
                                             [3]
          无法有效实现无瘢痕愈合或纤维化逆转 。因此，探索                            技有限公司，动物生产许可证号为 SCXK（鄂）2021-
          能有效治疗增生性瘢痕的药物至关重要。                                  0011。兔饲养于武汉市万千佳兴生物科技有限公司，饲
              积雪草是伞形科植物积雪草 Centella asiatica（L.）              养环境温度为25 ℃、湿度为50%、明暗交替。本研究通
          Urb.的干燥全草，具有清热利湿、解毒消肿的功效，在治                         过武汉市万千佳兴生物科技有限公司动物伦理委员会
          疗湿热黄疸、痈肿疮毒、跌扑损伤等方面疗效显著。研                            批准（批准号为202408337）。
          究发现，积雪草在创面愈合过程中可改善微循环功能，                            2 方法
                                            [4]
          对烧伤、胃溃疡等具有明显的改善作用 。积雪草苷是                            2.1 模型构建
          积雪草的有效活性成分，其可改善增生性瘢痕的色素沉                                参考文献[9]构建兔耳增生性瘢痕模型，具体方法如
          积 ，但具体作用机制尚不清楚。Wnt/β-catenin 通路是                    下：将兔耳腹侧毛发剃除，然后对术区进行麻醉，使用已
            [5]
          胚胎发育和成人组织再生的重要通路，其与伤口愈合、                            消毒的钻孔刀于两只耳朵上各制成4个创面（创面为圆
          色素沉积等密切相关          [6―7] 。既往研究发现，积雪草苷可              形，直径为 1 cm，每个创面间隔 1.5 cm），将各创面中的
          通过调控Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达，促进糖尿病                     真皮、表皮及软骨膜（操作过程中注意保持软骨完整）去
          溃疡愈合 。然而，积雪草苷是否可通过调控 Wnt/                           除。术后每天观察兔耳创面愈合和增生性瘢痕形成的
                   [8]
          β-catenin通路抑制增生性瘢痕形成尚不明确。基于此，                       情况。当兔耳创面愈合并出现上皮化，瘢痕明显隆起于
          本研究拟构建兔耳增生性瘢痕模型，从Wnt/β-catenin通                     皮面（厚度≥1.0 mm），呈红/紫红色，触之质硬，则提示
          路角度出发，研究积雪草苷对增生性瘢痕的抑制作用及                            模型构建成功。
          机制，以期为临床治疗增生性瘢痕提供参考。                                2.2 分组及给药
          1 材料                                                    造模成功后，将该部分兔分为模型组、积雪草苷低
          1.1 主要仪器                                            剂量组（于瘢痕内基底部注射12 mg/kg的积雪草苷 ）、
                                                                                                          [10]
              Anthos 2010 型酶标仪购自奥地利 Anthos Labtec             积雪草苷高剂量组（于瘢痕内基底部注射24 mg/kg的积
                                                                    [10]
          Instruments公司；4200SF型凝胶成像分析系统购自上海                   雪草苷 ）、阳性对照组（于瘢痕内基底部注射 40 mg/kg
                                                                                  [5]
          天能科技有限公司；NE910型荧光显微镜购自北京瑞宏                          的醋酸曲安奈德注射液 ），另设对照组（不造模，仅做兔
          诚科技发展有限公司；1658033 型蛋白电泳及转印系统                        耳腹侧毛发剃除处理），每组8只。对照组和模型组兔于
          购自美国Bio-Rad公司；Neofuge 15R型台式高速冷冻离                   相同部位注射等体积生理盐水，每天给药 1 次，连续
          心机购自力新仪器（上海）有限公司；BX3型普通光学显                          28 d。
          微镜购自日本Olympus公司。                                    2.3 兔耳增生性瘢痕外观观察
          1.2 主要药品与试剂                                             末次给药结束后，观察各组兔耳增生性瘢痕外观
              积雪草苷对照品（批号221091，纯度98%）购自上海                    （包括颜色、形状），并拍照记录。
          一基实业有限公司；醋酸曲安奈德注射液（批号210901，                        2.4 兔耳增生性瘢痕指数测定
          规格5 mL∶50 mg）购自上海通用药业股份有限公司；白                           观察兔耳外观后，使用游标卡尺测定增生性瘢痕厚
          细胞介素 6（interleukin-6，IL-6）、IL-10 酶联免疫吸附测            度（即瘢痕表面到软骨表面的厚度），同时测定瘢痕旁正
          定（ELISA）试剂盒（批号分别为221204、220911）均购自                  常皮肤厚度（即正常皮肤表面到软骨表面的厚度），以此
          上海酶研生物科技有限公司；Masson 染色试剂盒（批号                        计算增生性瘢痕指数（增生性瘢痕指数＝增生性瘢痕厚
          HL-0288）购自上海哈灵生物科技有限公司；鼠源Ⅰ型胶                        度/正常皮肤厚度）。
          原（collagen type Ⅰ，COLⅠ）抗体、兔源Ⅲ型胶原（colla‐             2.5 兔耳增生性瘢痕组织中炎症因子水平测定
          gen type Ⅲ，COLⅢ）抗体、兔源 Wnt4 抗体（批号分别为                     增生性瘢痕厚度测定结束后，麻醉各组兔，切取兔
          ab6308、ab184993、ab150596）均购自英国 Abcam 公司；            耳增生性瘢痕组织（每只兔耳有4份增生性瘢痕组织），
          兔源 β-catenin 抗体、兔源 GAPDH 抗体（批号分别为                   每组取 8 份（每只兔取 1 份）兔耳增生性瘢痕组织置于
          8480、2118）均购自美国CST公司；辣根过氧化物酶标记                      4% 甲醛溶液中进行固定，剩余部分置于－80 ℃保存备
          的羊抗兔免疫球蛋白G及羊抗鼠免疫球蛋白G二抗（批                            用。每组取 8 份（每只兔取 1 份）兔耳增生性瘢痕组织，


          · 608 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 5                               中国药房  2026年第37卷第5期
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