Page 31 - 《中国药房》2025年17期
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2.5.2 皮肤相容性评价 部皮肤组织,常规制备石蜡切片(厚5 μm),分别进行HE
采用BALB/c小鼠皮肤刺激性模型进行评价。实验 染色和 Masson 染色,封片后通过高通量切片扫描仪察
分为FCN组和对照组,每组3只小鼠。FCN组小鼠背部 小鼠背部皮肤组织病理学变化。
2
皮肤(面积为 1 cm×1 cm)连续涂抹 FCN(20 mg/cm), 2.8 统计学方法
对照组小鼠涂抹等量生理盐水。每隔1 d记录小鼠的体 采用 GraphPad Prism 8.0 软件进行作图和统计分
重,分别在实验初始(第0天)、早期(第3天)、中期(第11 析。计量资料满足正态分布的以x±s表示,两组间比较
天)、晚期(第 20 天)对小鼠背部皮肤拍照观察,评价 采用两独立样本t检验。检验水准α=0.05。
FCN 对皮肤组织的刺激性(参考国际标准 ISO 10993- 3 结果
10:2021)。 3.1 材料表征结果
2.5.3 血液相容性检测 3.1.1 氧化铈纳米颗粒的表征结果
实验分为FCN组和对照组,每组6只小鼠。FCN组 透射电镜结果(图 1A)显示,氧化铈纳米颗粒呈不
2
小鼠背部皮肤连续涂抹 FCN(20 mg/cm),对照组小鼠 规则球形,平均粒径约 20 nm。X 射线衍射分析图谱结
涂抹等量生理盐水。分别在第11天和第20天每组各取 果(图1B)显示,氧化铈纳米颗粒具有典型的立方萤石晶
3只小鼠进行麻醉,进行眼球取血,将血液滴入EDTA抗 体结构(JCPDS No.34-0394),衍射峰位与标准卡片完全
凝管和无菌 EP 管中。EDTA 抗凝管中样本轻轻颠倒混 吻合,表明所制备的氧化铈纳米颗粒具有良好的结晶
匀后,于4 ℃下暂存,用于血常规检测。无菌EP管中样 性。紫外-可见吸收光谱表征结果(图 1C)显示,氧化铈
本室温静置30 min,形成凝块,以3 000×g离心10 min, 纳米颗粒在 UVB(290~320 nm)和 UVA(>320~400
取上清液分装至无菌EP管中,用于生化指标检测。 nm)波段均表现出明显的吸收特性。
2.6 FCN的皮肤黏附性能评价 2 000 0.7
0.6
本研究采用小动物三维活体成像技术对其皮肤驻 1 500 0.5
0.4
留性和可清除性进行定量分析。实验分为人工汗液冲 氧化铈纳米颗粒 强度 1 000 A 0.3
0.2
500
刷组和干态清洁组,每组3只小鼠。人工汗液冲刷组模 0 0.1 0
20 30 40 50 60 70 80 200 300 400 500
拟人体生理环境,使用标准人工汗液(pH5.5,含 0.5% 2θ/° 波长/nm
A.透射电镜图 B.X射线衍射分析图 C.紫外-可见吸收光谱图
NaCl和0.1%乳酸),以2 cm/min的生理流速对经过FCN 120 4
3
处理30 min后的小鼠皮肤表面进行持续冲刷,采用标准 透过率/% 80 A 2
清洁程序,在压力 5 kPa 下往复冲刺 10 次。干态清洁组 富勒醇纳米颗粒 40 1
对经过FCN处理30 min后的小鼠采用标准清洁程序,在 0 1 000 2 000 3 000 4 000 0 200 300 400 500
波数/cm -1 波长/nm
2
压强0.5 N/cm 下往复擦拭10次。采用荧光定量获得经 D.透射电镜图 E.红外吸收光谱图 F.紫外-可见吸收光谱图
2.0
过 30 min 的汗液冲刷或经干态清洁前后皮肤表面残留 1.5 FCN
的荧光物质的荧光强度,并计算材料清除率。材料清除 A 1.0
FCN 0.5
率(%)=(初始荧光强度-残留荧光强度)/初始荧光强
0 200 250 300 350 400 450 500
度×100%。 波长/nm
G.扫描电镜图(标尺:100 μm) H.扫描电镜图(标尺:500 μm) I.紫外-可见吸收光谱图
2.7 FCN的防晒伤能力评价
图1 不同材料的表征结果
2.7.1 皮肤防晒伤观察
为系统评价FCN的体内光保护效果,本研究建立了 3.1.2 富勒醇纳米颗粒的表征结果
[13]
BALB/c 小鼠紫外线诱导皮肤光损伤模型 。实验分为 透射电镜结果(图 1D)显示,富勒醇纳米颗粒粒径
对照组、紫外线照射组、防护组,每组9只。实验过程中, 分布均匀,平均粒径约 10 nm。红外吸收光谱表征结果
将小鼠置于光源下方25 cm处,第一阶段紫外线照射4 d, (图 1E)显示,其特征吸收峰分别位于 1 000~800 cm -1
-1
2
每日总剂量约 300 mJ/cm ;第二阶段紫外线照射 3 d,以 (C—C 键伸缩振动)、1 428~800 cm (C=C 键伸缩振
-1
相同照射强度每日照射30 min,照射前30 min提前涂抹 动)、1 380~800 cm (C—O 键伸缩振动)、1 640~800
-1
-1
FCN 样品 1 遍,涂抹量为 2 mg/cm 。每日观察小鼠伤口 cm (C=O键伸缩振动)以及3 400~800 cm (O—H键
2
愈合情况,总实验周期为 20 d。在实验过程中,分别在 伸缩振动)。紫外-可见吸收光谱表征结果(图1F)显示,
实验第3、11、20天每组各取3只小鼠拍照记录其皮肤红 富勒醇纳米颗粒在 200~400 nm 波长范围内具有较强
斑、溃疡、晒伤创面情况。 吸收。
2.7.2 组织病理学观察 3.1.3 FCN的表征结果
在“2.7.1”实验基础上,分别在紫外线照射后的第3、 扫描电镜结果(图1G、图1H)显示,FCN呈均匀的球
11、20天记录创面情况后,各处死每组的3只小鼠,取背 形结构,且该球形结构是由大量纳米级小球自组装形成
中国药房 2025年第36卷第17期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 17 · 2109 ·

