Page 31 - 《中国药房》2025年17期
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2.5.2 皮肤相容性评价                                      部皮肤组织,常规制备石蜡切片(厚5 μm),分别进行HE
              采用BALB/c小鼠皮肤刺激性模型进行评价。实验                       染色和 Masson 染色,封片后通过高通量切片扫描仪察
          分为FCN组和对照组,每组3只小鼠。FCN组小鼠背部                         小鼠背部皮肤组织病理学变化。
                                                       2
          皮肤(面积为 1 cm×1 cm)连续涂抹 FCN(20 mg/cm),               2.8 统计学方法
          对照组小鼠涂抹等量生理盐水。每隔1 d记录小鼠的体                              采用 GraphPad Prism 8.0 软件进行作图和统计分
          重,分别在实验初始(第0天)、早期(第3天)、中期(第11                      析。计量资料满足正态分布的以x±s表示,两组间比较
          天)、晚期(第 20 天)对小鼠背部皮肤拍照观察,评价                        采用两独立样本t检验。检验水准α=0.05。
          FCN 对皮肤组织的刺激性(参考国际标准 ISO 10993-                    3 结果
          10:2021)。                                          3.1 材料表征结果
          2.5.3 血液相容性检测                                      3.1.1 氧化铈纳米颗粒的表征结果
              实验分为FCN组和对照组,每组6只小鼠。FCN组                           透射电镜结果(图 1A)显示,氧化铈纳米颗粒呈不
                                            2
          小鼠背部皮肤连续涂抹 FCN(20 mg/cm),对照组小鼠                     规则球形,平均粒径约 20 nm。X 射线衍射分析图谱结
          涂抹等量生理盐水。分别在第11天和第20天每组各取                          果(图1B)显示,氧化铈纳米颗粒具有典型的立方萤石晶
          3只小鼠进行麻醉,进行眼球取血,将血液滴入EDTA抗                         体结构(JCPDS No.34-0394),衍射峰位与标准卡片完全
          凝管和无菌 EP 管中。EDTA 抗凝管中样本轻轻颠倒混                       吻合,表明所制备的氧化铈纳米颗粒具有良好的结晶
          匀后,于4 ℃下暂存,用于血常规检测。无菌EP管中样                         性。紫外-可见吸收光谱表征结果(图 1C)显示,氧化铈
          本室温静置30 min,形成凝块,以3 000×g离心10 min,                 纳米颗粒在 UVB(290~320 nm)和 UVA(>320~400
          取上清液分装至无菌EP管中,用于生化指标检测。                            nm)波段均表现出明显的吸收特性。
          2.6 FCN的皮肤黏附性能评价                                                     2 000           0.7
                                                                                               0.6
              本研究采用小动物三维活体成像技术对其皮肤驻                                            1 500           0.5
                                                                                               0.4
          留性和可清除性进行定量分析。实验分为人工汗液冲                             氧化铈纳米颗粒         强度  1 000       A  0.3
                                                                                               0.2
                                                                               500
          刷组和干态清洁组,每组3只小鼠。人工汗液冲刷组模                                              0              0.1 0
                                                                                20  30  40  50  60  70  80  200   300   400   500
          拟人体生理环境,使用标准人工汗液(pH5.5,含 0.5%                                               2θ/°           波长/nm
                                                                  A.透射电镜图        B.X射线衍射分析图     C.紫外-可见吸收光谱图
          NaCl和0.1%乳酸),以2 cm/min的生理流速对经过FCN                                    120              4
                                                                                                3
          处理30 min后的小鼠皮肤表面进行持续冲刷,采用标准                                          透过率/%  80      A  2
          清洁程序,在压力 5 kPa 下往复冲刺 10 次。干态清洁组                     富勒醇纳米颗粒           40              1
          对经过FCN处理30 min后的小鼠采用标准清洁程序,在                                          0  1 000      2 000     3 000     4 000  0 200   300   400   500
                                                                                     波数/cm -1        波长/nm
                     2
          压强0.5 N/cm 下往复擦拭10次。采用荧光定量获得经                           D.透射电镜图          E.红外吸收光谱图    F.紫外-可见吸收光谱图
                                                                                               2.0
          过 30 min 的汗液冲刷或经干态清洁前后皮肤表面残留                                                         1.5      FCN
          的荧光物质的荧光强度,并计算材料清除率。材料清除                                                            A  1.0
                                                              FCN                              0.5
          率(%)=(初始荧光强度-残留荧光强度)/初始荧光强
                                                                                                0 200  250  300  350  400  450  500
          度×100%。                                                                                    波长/nm
                                                              G.扫描电镜图(标尺:100 μm) H.扫描电镜图(标尺:500 μm)  I.紫外-可见吸收光谱图
          2.7 FCN的防晒伤能力评价
                                                                         图1 不同材料的表征结果
          2.7.1 皮肤防晒伤观察
              为系统评价FCN的体内光保护效果,本研究建立了                        3.1.2 富勒醇纳米颗粒的表征结果
                                             [13]
          BALB/c 小鼠紫外线诱导皮肤光损伤模型 。实验分为                            透射电镜结果(图 1D)显示,富勒醇纳米颗粒粒径
          对照组、紫外线照射组、防护组,每组9只。实验过程中,                         分布均匀,平均粒径约 10 nm。红外吸收光谱表征结果
          将小鼠置于光源下方25 cm处,第一阶段紫外线照射4 d,                     (图 1E)显示,其特征吸收峰分别位于 1 000~800 cm               -1
                                                                                             -1
                               2
          每日总剂量约 300 mJ/cm ;第二阶段紫外线照射 3 d,以                 (C—C 键伸缩振动)、1 428~800 cm (C=C 键伸缩振
                                                                              -1
          相同照射强度每日照射30 min,照射前30 min提前涂抹                     动)、1 380~800 cm (C—O 键伸缩振动)、1 640~800
                                                                -1
                                                                                                   -1
          FCN 样品 1 遍,涂抹量为 2 mg/cm 。每日观察小鼠伤口                  cm (C=O键伸缩振动)以及3 400~800 cm (O—H键
                                      2
          愈合情况,总实验周期为 20 d。在实验过程中,分别在                        伸缩振动)。紫外-可见吸收光谱表征结果(图1F)显示,
          实验第3、11、20天每组各取3只小鼠拍照记录其皮肤红                        富勒醇纳米颗粒在 200~400 nm 波长范围内具有较强
          斑、溃疡、晒伤创面情况。                                       吸收。
          2.7.2 组织病理学观察                                      3.1.3 FCN的表征结果
              在“2.7.1”实验基础上,分别在紫外线照射后的第3、                        扫描电镜结果(图1G、图1H)显示,FCN呈均匀的球
          11、20天记录创面情况后,各处死每组的3只小鼠,取背                        形结构,且该球形结构是由大量纳米级小球自组装形成


          中国药房  2025年第36卷第17期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 17    · 2109 ·
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