Page 48 - 《中国药房》2025年13期
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The  histological  structure  of  the  gastric  antrum  tissue  was  normal.  Except  for  the  B.  subtilis  group  and  the  B.  subtilis+AFI  group，
          the pathological states of the duodenum in the remaining rats gradually recovered. Compared with each single drug group， most of
          above indexes in rats from each combination group showed further improvement （P＜0.05）. CONCLUSIONS  The combination of
          AFI with two probiotics can improve gastrointestinal motility in FD rats， and the effect is superior to that of using the drugs alone.
          The  specific  underlying  mechanisms  may  be  related  to  the  activation  of  the  SCF/c-Kit  signaling  pathway  and  the  inhibition  of  the
          TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway.
          KEYWORDS     functional dyspepsia； Aurantii Fructus Immaturus； Bacillus subtilis； Lactobacillus acidophilus； probiotics； SCF/c-
          Kit signaling pathway； TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway


              功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）是常见             公司；ECLIPSE CI-L 型正置白光显微镜、ECLIPSE 80I
          的功能性消化疾病，具有发病率高、易反复等特点，通常                           型正置荧光显微镜购自日本尼康公司。
          表现为胃排空延迟、十二指肠屏障受损与微炎症、肠道                            1.2 主要药品及试剂
          菌群紊乱以及脑-肠肽失调等            [1―2] 。现代医学对 FD 多用             枳实药材（批号 230612B）采自江西省樟树市，经江
          促胃肠动力药或益生菌等进行治疗 。枯草芽孢杆菌和                            西中医药大学中药鉴定教研室邓可众教授鉴定为酸橙
                                        [3]
          嗜酸乳杆菌是常见的益生菌，可通过调节胃肠道菌群、                            C. aurantium L.的干燥幼果。多潘立酮片（批号NHJ3542，
          胃肠激素水平、分泌有益代谢物等发挥改善 FD 的作                           规格 10 mg）购自西安杨森制药有限公司；戊巴比妥钠
          用 [4―5] 。枳实为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其           （批号 P3761）购自美国 Sigma 公司；羧甲基纤维素钠
          栽培变种或甜橙 C.sinensis Osbeck 的干燥幼果，具有破                （批号 2208302）购自西陇科学股份有限公司；胃泌素
                                [5]
          气消积、化痰消痞的功效 。在中医看来，FD 可归属于                         （gastrin，GAS）、P 物质（substance P，SP）、血管活性肠肽
         “胃脘痛”“痞满”的范畴 ，病机为气机阻滞、脾胃运化无                         （vasoactive intestinal peptide，VIP）、生长抑素（somatosta‐
                              [6]
          力，因此应以健脾和胃、疏肝理气为总治疗原则，多以枳                           tin，SS）、胆囊收缩素（cholecystokinin，CCK）酶联免疫吸
          实及其相关方剂进行治疗            [7―8] 。近年来研究发现，中药/           附 测 定（ELISA）试 剂 盒（批 号 分 别 为 MM-21284R1、
                                               [9]
          化学药联合益生菌治疗FD具有较好的疗效 。因此，笔                           MM-0444R1、MM-0625R1、MM-0493R1、MM-0034R1）
          者推测枳实与上述两种益生菌联用治疗FD可能也具有                            均 购 自 江 苏 酶 免 实 业 有 限 公 司 ；鼠 源 β - 肌 动 蛋 白
          较好的疗效。                                             （β-actin）抗体（批号 H681707031）购自杭州华安生物技
              研究表明，FD 患者的胃 Cajal 间质细胞（interstitial            术有限公司；兔源 c-Kit 抗体、兔源 SCF 抗体、辣根过氧
          cells of Cajal，ICC）会发生异常改变，从而影响胃肠道平                 化物酶（HRP）标记的山羊抗大鼠二抗、HRP标记的山羊
          滑肌细胞间的信息传递、神经传递及自发性电活动的产                            抗 兔 二 抗（批 号 分 别 为 18696-1-AP、26582-1-AP、
                                      [9]
          生，进而导致胃肠道功能性障碍 。而干细胞因子（stem                         SA00001-1、SA00001-2）均购自武汉三鹰生物技术有限
          cell factor，SCF）在调节 ICC 的增殖、分化和功能方面至                公司；兔源 TLR4、MyD88、NF-κB 抗体（批号分别为 HY-
                                          [10]
          关重要，与平滑肌功能障碍密切相关 。SCF 是 ICC 细                       P80918、HY-P80760、HY-P80765）均购自美国MedChem‐
          胞膜中酪氨酸激酶受体 c-Kit 的配体，c-Kit 信号途径                     express 公司；FastPure 型粪便 DNA 分离试剂盒（批号
                                     [11]
          被阻断可导致 ICC 的异常增殖 。还有研究表明，十二                         C01-10000）购自上海美吉逾华生物医药科技有限公司。
          指肠炎症及屏障受损是造成 FD 的主要原因之一，而十                          1.3 实验动物
          二指肠炎症与 Toll 样受体 4（Toll-like receptor 4，TLR4）/           本研究所用大鼠为SPF级雄性SD大鼠，体重180～
          髓 样 分 化 因 子 88（myeloid  differentiation  factor  88，  220 g，共 64 只，购自斯贝福（北京）生物技术有限公司，
          MyD88）/核因子κB（nuclear factor κB，NF-κB）信号通路           动物生产许可证号为 SCXK（京）2019-0010。大鼠在标
              [12]
          有关 。TLR4 的激活可启动 MyD88/NF-κB 信号通路                    准实验室条件下适应性饲养 7 d，均自由进食饮水。本
          的下游促炎途径，使之释放大量炎症介质，导致肠道损                            实验均按照江西中医药大学实验动物伦理审查标准进
            [13]
          伤 。 有 鉴 于 此 ，本 研 究 拟 基 于 SCF/c-Kit 和 TLR4/          行，伦理编号为20241107010。
          MyD88/NF-κB 信号通路，研究枳实与上述两种益生菌                       1.4 细菌
          联用对FD大鼠的改善作用及可能机制，以期为FD的临                               嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus，GIM 1.208）
          床治疗提供新参考。                                           由广东省科学院微生物研究所提供；枯草芽孢杆菌[Ba‐
          1 材料                                                cillus subtilis，CMCC（B）63501]由中国医学微生物菌种
          1.1 主要仪器                                            保藏中心提供。
              Multiskan Go1510 型酶标仪、NanoDrop2000 型超微          2 方法
          量分光光度计购自美国 Thermo Fisher Scientific 公司；             2.1 供试药液的制备
          Centrifuge5430R 型低温冷冻离心机购自德国 Eppendorf                  取枳实粉末50 g，加2 500 mL纯水，加热回流1.5 h，
          公司；SPW-DM型电泳仪购自武汉赛维尔生物科技有限                          提取2次，合并药液，过滤后浓缩成质量浓度为0.9 g/mL
                             +
          公司；Chemic DoxXR 型凝胶成像仪购自美国 Bio-Rad                 （以生药量计）的供试药液。

          · 1594 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 13                            中国药房  2025年第36卷第13期
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