Page 42 - 《中国药房》2025年12期
P. 42

内皮细胞增殖的正向调控                          卵巢。待大鼠恢复7 d，再进行激素诱导，具体诱导方法
                          纤溶酶原激活的负调控
                G蛋白偶联受体信号通路，与环核苷酸第二信使偶联                       为：（1）NR 期（动情后期）首日中午 12：00，皮下注射
                          糖酵解过程的正向调节
                               血管收缩                           0.012 5 μg/μL苯甲酸雌二醇0.04 mL；（2）NR期（动情间
                            正调控血管生成                 BP
                       细胞内类固醇激素受体信号通路                         期）次日晚上 8：00，皮下注射 0.012 5 μg/μL 雌二醇 0.04
                               缺氧反应
                       PI3K/Akt信号转导的正向调控                      mL；（3）NR 期（动情前期）第 3 天上午 8：00，皮下注射
                             化学突触传递
                                                              0.012 5 μg/μL 孕酮 0.04 mL；（4）R 期不进行任何干预。
                               突触后膜
                               质膜外侧                           通过激素连续诱导 2 个动情周期，同时于每天下午
                              树突棘密度
                                轴突                            1：00－3：00 进行阴道电阻筛查（大鼠 NR 期的阴道电阻
                             神经元细胞体                                                          [15]
                               细胞表面                 CC        值＜3 kΩ，R期的阴道电阻值≥3 kΩ ），当连续3 d出现
                        丝氨酸蛋白酶抑制剂复合物
                                突触                            NR 期、1 d 出现 R 期时，视为一个规律的周期。筛选至
                                树突
                                质膜                            少连续2个动情周期规律的大鼠进行后续实验。
                            类固醇受体活性                           2.3.2 造模、分组与给药
                              蛋白酶结合
                               肽结合                                将筛选所得大鼠分为正常组（n＝10）和造模组（n＝
                             相同蛋白结合
                              核受体活性                           50）。采用择时束缚应激法构建PMDD肝气郁证大鼠模
                                                    MF
                              类固醇结合
                           神经递质受体活性                           型，具体操作如下：于NR期，大鼠每天以束缚筒（管状塑
                        G蛋白偶联血清素受体活性
                              血清素结合                           料筒，长 20 cm、直径 6 cm）束缚 5 h（下午 2：00－7：00）。
                           雌激素反应元件结合
                                                              于束缚的第3个动情周期的动情间期和动情期进行强迫
                                  0    3   6   9
                                        －lgP                  游泳实验和旷场实验，作为大鼠造模后 NR 期和 R 期的
                         A. GO功能富集分析（前10位）
                                                              数据。将上述造模后NR期和R期强迫游泳悬浮不动时
                         缺氧诱导因子1信号通路               基因数
                           环磷酸腺苷信号通路                 5.0
                             Ras信号通路                 7.5      间的差值从小到大进行排序，剔除差值较小的前30%大
                              钙信号通路                  10.0                                                [10]
                        神经活性配体-受体相互作用                12.5     鼠，其余大鼠视为 PMDD 肝气郁证模型构建成功 ，最
                              2型糖尿病                  P        终筛选出造模成功的大鼠 36 只。本研究将造模成功的
                               前列腺癌                  5×10 －5
                               胰腺癌                   4×10 －5
                               恰加斯病                  3×10 －5  大鼠随机分为模型组、氟西汀组（阳性对照）、芦丁组，每
          程序性死亡配体1表达与肿瘤中的程序性死亡受体1免疫检查点通路             2×10 －5
                              胰岛素抵抗                  1×10 －5  组 12 只。每天上午 9：00，氟西汀组大鼠灌胃氟西汀 2.7
                              内分泌抵抗                                                                        [15]
                       流体剪切应力与动脉粥样硬化                          mg/kg（以生理盐水为溶剂，为成人临床剂量的 8 倍） ，
                           癌症中的蛋白聚糖
                            癌症的发病途径                           芦丁组大鼠灌胃芦丁 8.65 mg/kg（以生理盐水为溶
                          脂肪细胞因子信号通路                             [11]
                            催乳素信号通路                           剂） ，正常组和模型组大鼠灌胃生理盐水，灌胃体积均
                            5-羟色胺能突触
                           神经营养素信号通路                          为10 mL/kg。灌胃2个动情周期后进行行为学测试。灌
                           甲状腺激素信号通路
                                                              胃期间除正常组外的其余各组大鼠均持续进行择时慢
                                   4     8    12   16
                                          富集分数
                        B. KEGG通路富集分析（前20位）                   性束缚应激干预。
             PI3K/Akt：磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B；Ras：大鼠肉瘤病毒癌基             2.3.3 行为学测试
          因同源物。                                                   分别在动情周期的 NR、R 期进行行为学评价。在
              图1 芦丁-PMDD交集靶点的富集分析气泡图
                                                              开始给药的第3个动情周期的动情间期和动情期给药1 h
          2.3 动物实验验证                                          后进行旷场实验、强迫游泳实验和Y迷宫实验。每只大
          2.3.1 动情周期的人工诱导                                     鼠测试前均进行阴道电阻测试以确定其所处周期。
              雌性性成熟大鼠规律的动情周期一般为 4 d，分为                           （1）旷场实验：旷场实验箱的长、宽、高分别为 50、
          动情前期、动情期、动情后期、动情间期，其中动情前期、                          50、40 cm。将各组大鼠放置在旷场的中央区域，使用动
          动情后期、动情间期又称非接受（non-receptive，NR）期，                  物行为采集分析系统记录其 6 min 内的运动总距离、中
                                      [14]
          动情期又称接受（receptive，R）期 。由于每只大鼠所处                     央区域运动距离、中央区域停留时间。采用 GraphPad
          的动情周期不完全一致，且动情周期规律性难以保证，                            Prism 8.0软件对数据进行统计分析；实验数据以x±s表
          故本研究通过手术摘除大鼠卵巢后统一进行人工激素                             示，多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用
          诱导，以保证所有大鼠动情周期规律保持一致。                               LSD-t检验；检验水准α＝0.05（统计方法下同）。
              大鼠适应性饲养 7 d 后，予戊巴比妥钠麻醉后摘除                          （2）强迫游泳实验：强迫游泳实验装置为高 50 cm、


          · 1452 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 12                            中国药房  2025年第36卷第12期
   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47