Page 37 - 《中国药房》2025年8期
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acid，  hederagenin，  cauloside A，  and  cauloside  C.  Its  mechanism  may  be  related  to  the  inhibition  of  JAK/STAT  signaling  pathway
          and the reduction of inflammatory responses.
          KEYWORDS    Caulophyllum  robustum  Maxim；  Joint  injection  of  Caulophyllum  robustum  Maxim；  rheumatoid  arthritis；  JAK/
          STAT signaling pathway； network pharmacology



              类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种常           公司；Janus激酶2（Janus kinase 2，JAK2）抗体、信号转导
          见的慢性全身性免疫疾病，全球平均患病率为 0.4%～                         与转录激活因子3（signal transducer and activator of tran‐
              [1]
          1.3% ，严重威胁着患者的健康和生活质量。RA的主要                        scription  3，STAT3）抗 体 、磷 酸 化（p）-JAK2 抗 体 、p-
          病理特征包括滑膜增生、关节内炎症以及持续的关节破                           STATA3抗体、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）抗体（货号
          坏，这些变化不仅导致关节疼痛、肿胀和功能障碍，还可能                         分别为bs23004R、bs1141R、bs2485R、bs22386R、bs41373R）
                            [2]
          引发关节畸形和残疾 。当前，临床上常用的RA治疗药                          均购自北京博奥森生物技术有限公司；辣根过氧化物酶
          物虽然在一定程度上能够缓解病情，但由于药物剂型（片                          标记的羊抗兔IgG二抗（货号SA00001-4）购自美国Pro‐
          剂、贴剂等）的影响，其在机体内的代谢复杂，往往难以直                         teintech 公司；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳快
          接到达病变部位，从而影响治疗效果，并可能带来消化道、                         速制备试剂盒、BCA 蛋白浓度测定试剂盒、全蛋白提取
          肾脏损伤等不良反应 。关节腔内注射能够使药物在关                           试剂盒（货号分别为 WLA013、WLA004、WLA019）均购
                            [3]
          节内积蓄，并以恒定或需要的速度释放，从而有效控制关                          自沈阳万类生物科技有限公司；聚偏二氟乙烯（polyviny-
          节炎症、减轻疼痛，为RA患者提供了新的治疗选择 。                          lidene fluoride，PVDF）膜（货号 IPVH00010）购自美国
                                                   [4]
              类叶牡丹 Caulophyllum robustum Maxim. 别称红毛         Millipore公司。
          七，为小檗科红毛七属类叶牡丹的根及根茎，性温，味苦                          1.3 实验动物
          辛，作为一种传统中药，具有散瘀止痛、活血通络等功                               清洁级雌性日本大耳兔36只，体重（2.5±0.5）kg，购
                                       [5]
          效，在民间常用于治疗 RA 等疾病 。现代研究表明，类                        自辽宁长生生物技术股份有限公司，动物生产许可证
          叶牡丹含有皂苷、生物碱等多种活性成分，这些成分具                           号：SCXK（辽）2020-0001。大耳兔在温度 18～24 ℃、相
                                            [5]
          有抗风湿、抗炎和免疫调节等药理活性 。《全国医药产                          对湿度40%～60%的环境中适应性喂养1周。动物实验
          品大全》（1988 年版）记载，民间曾将单味类叶牡丹制成                       经黑龙江中医药大学实验动物伦理委员会批准（审批
          注射液用于RA治疗，能够有效缓解RA患者的疼痛和肿                          号：2023091820），所有实验操作均遵守国际和当地实验
          胀等症状，改善关节功能，但因其工艺、质量与作用机制                          动物使用和保护委员会颁布的条例。
                               [6]
          均不够明确，未推广使用 。本研究通过网络药理学技                           2 方法与结果
          术，对类叶牡丹的皂苷类成分进行分析，预测其抗RA的                          2.1 网络药理学分析
          潜在靶点和通路，并通过体内实验验证关键通路，进而                           2.1.1 类叶牡丹主要化学成分及靶点检索
          探究类叶牡丹关节注射液抗 RA 的作用机制，以期并为                             皂苷类成分是类叶牡丹中的主要药效成分 ，本文
                                                                                                      [7]
          开发新型抗RA药物提供理论支持。                                   选择类叶牡丹中已知的主要皂苷类成分（LYMD1～15，
          1 材料                                               见表 1），通过 Swiss Target Prediction 网站（http：//www.
          1.1 主要仪器                                           swisstargetprediction.ch/）检索成分靶点，整理得到的靶
              LXI- Ⅱ 型 离 心 机 购 自 上 海 医 用 分 析 仪 器 厂 ，         点经 UniProt 数据库（https：//www.uniprot.org/）数据校准
          Synergy-H1 型酶标仪购自美国 PerkinElmer 公司，4600            后，对获得的靶点分别根据可能性（大于0）和norm fit值
                                                                     [8]
          型凝胶成像系统购自上海天能科技有限公司，Moticam                        进行筛选 ，去除重复值后，共获得195个靶点。
          3000型显微摄影成像系统购自美国Motic公司，EPS 300                   2.1.2 RA相关靶点的获取和筛选
          型电泳仪、VE-186型转移槽、VE 180型垂直电泳槽、iCEN-                     以“rheumatoid arthritis”为关键词在GeneCards数据
          24R型超速冷冻离心机均购自杭州奥盛仪器有限公司。                          库（https：//www.genecards.org/）、OMIM 数据库（https：//
          1.2 主要试剂                                           www.omim.org/）中对疾病靶点进行检索，分别获得5 961、
              鹿瓜多肽注射液（货号 230910，规格 2 mL/支）购自                 42个疾病靶点，去重后获得5 990个与RA相关的靶点。
          哈尔滨誉衡制药有限公司；类叶牡丹关节注射液（实验                           2.1.3 “药物-成分-靶点”网络构建及可视化分析
          室自制，批号20230904，规格2 mL/支，每1 mL类叶牡丹                      将获得的药物成分靶点与疾病靶点相互映射，获得
          关节注射液中类叶牡丹皂苷C、D、G、H和leoniticin D 5种                143 个交集靶点。将类叶牡丹 15 种皂苷类成分和交集
          皂苷的总含量不低于0.90 mg）；弗氏完全佐剂（complete                  靶点上传至 Cytoscape 3.9.1 软件（https：//cytoscape.org/）
          Freund’s adjuvant，CFA；货号F6801）购自北京博奧拓科             作图，构建“药物-成分-靶点”网络。对网络进行拓扑分
          技有限公司；白细胞介素 1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-           析，该网络有143个节点和387边。根据度值（度值越大
          6、肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis factor α，TNF-α）酶联        表明相连节点越多）筛选排前5名的皂苷类成分作为类
          免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（货号分别为ML027836、                    叶牡丹关节注射液治疗RA的核心成分，分别为刺囊酸、
          ML051629、ML001696）均购自上海酶联生物科技有限                    齐墩果酸、常春藤皂苷元、葳岩仙皂苷A、葳岩仙皂苷C。


          中国药房  2025年第36卷第8期                                                 China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 8    · 927 ·
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