Page 76 - 《中国药房》2025年7期

2.4 血清中IgE、HIS及炎症因子水平检测 （4.83±0.51）、（2.17±0.23）分]均显著降低（P＜0.05），且
鼻炎症状评分结束后，腹腔注射戊巴比妥钠麻醉大 QUE-H组较QUE-L组变化更明显（P＜0.05）；与QUE-H
鼠后取腹主动脉血，取部分血样离心收集上清液，然后 组 比 较 ，QUE-H+LPS 组 大 鼠 鼻 炎 症 状 评 分 [（4.25±
按照ELISA试剂盒说明书方法检测血清中IgE、HIS、IL- 0.44）分]显著升高（P＜0.05）。
17、IL-10水平。 3.2 槲皮素对AR大鼠血清中IgE、HIS水平的影响
2.5 全血中免疫细胞比例检测 与 Control 组比较，AR 组大鼠血清中 IgE、HIS 水平
取“2.4”项下剩余腹主动脉血，并分离全血中的淋巴 均显著升高（P＜0.05）；与AR组比较，QUE-L组、QUE-H
细胞，加入佛波酯、离子霉素、莫能菌素刺激，然后分别 组大鼠血清中 IgE、HIS 水平均显著降低（P＜0.05），且
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加入 CD3 CD4 CD25 Foxp3 及 CD3 CD4 IL-17 抗体（稀 QUE-H组较QUE-L组变化更明显（P＜0.05）；与QUE-H
释比例均为 1∶1 000），采用流式细胞仪检测全血中 组比较，QUE-H+LPS 组大鼠血清中 IgE、HIS 水平均显
Treg、Th17比例，并计算Th17/Treg比值。 著升高（P＜0.05）。结果见表1。
2.6 鼻黏膜组织病理观察 表1 各组大鼠血清中IgE、HIS水平比较（x±s，n＝12）
取血结束后，处死各组大鼠并取鼻黏膜组织。各组 组别 IgE/（U/mL） HIS/（ng/mL）
任选6只大鼠的鼻黏膜组织，用4%多聚甲醛固定，常规 Control组 1.75±0.18 15.34±1.62
AR组 4.28±0.45 a 39.62±4.08 a
制备石蜡切片，脱蜡至水后进行常规HE染色，显微镜下
QUE-L组 3.16±0.33 b 28.07±2.95 b
[9]
观察切片并进行病理学评分。评分标准 ：0分——上皮 QUE-H组 1.91±0.20 bc 16.25±1.73 bc
正常，纤毛完整，少量杯状细胞；1分——杯状细胞增多， QUE-H+LPS组 3.02±0.31 d 26.79±2.86 d
可见少量炎症细胞；2 分——纤毛倒伏不整齐、偶见脱 a：与Control组比较，P＜0.05；b：与AR组比较，P＜0.05；c：与QUE-
L组比较，P＜0.05；d：与QUE-H组比较，P＜0.05。
落，杯状细胞密布，炎症细胞增多；3分——上皮层破坏、
3.3 槲皮素对AR大鼠血清中炎症因子水平的影响
结构紊乱，纤毛大量脱落，杯状细胞密布，炎症细胞大量
与 Control 组比较，AR 组大鼠血清中 IL-17 水平显
浸润。
著升高（P＜0.05），IL-10水平显著降低（P＜0.05）；与AR
2.7 鼻黏膜组织中TLR4/IRAK4/NF-κB信号通路相关
组比较，QUE-L 组、QUE-H 组大鼠血清中 IL-17 水平均
蛋白检测
显著降低（P＜0.05），IL-10 水平均显著升高（P＜0.05），
取各组剩余 6 只大鼠的鼻黏膜组织，研碎后加入蛋
且 QUE-H 组 较 QUE-L 组 变 化 更 明 显（P＜0.05）；与
白裂解液提取总蛋白，采用BCA法对总蛋白进行定量，
QUE-H组比较，QUE-H+LPS组大鼠血清中IL-17水平显
并进行高温变性。将变性蛋白进行 SDS-PAGE 电泳
著升高（P＜0.05），IL-10水平显著降低（P＜0.05）。结果
（120～150 V 电泳约 1 h）分离，再将蛋白质湿转（110 V
见表2。
转移60 min）至PVDF膜上，然后加入脱脂奶粉封闭1 h。
表2 各组大鼠血清中IL-17、IL-10水平比较（x±s，n＝
加入β-actin（稀释比例为1∶1 000）以及TLR4、p-IRAK4、
12，pg/mL）
IRAK4、p-NF-κB p65、NF-κB p65 一抗（稀释比例均为
组别 IL-17 IL-10
1∶500），4 ℃孵育过夜；洗膜后，加入 HRP 标记的二抗
Control组 142.36±15.26 59.84±6.13
（稀释比例为1∶10 000），室温孵育1 h。洗膜后进行曝光 AR组 259.78±27.13 a 22.31±2.35 a
显色，采集图像并用 Image J 软件分析条带灰度值。以 QUE-L组 213.60±22.34 b 37.19±3.87 b
QUE-H组 159.42±16.58 bc 56.78±5.79 bc
目的蛋白和内参（β-actin）蛋白条带灰度值比值表示目的 QUE-H+LPS组 203.51±21.52 d 39.05±4.05 d
蛋白的相对表达量，并计算 p-IRAK4/IRAK4、p-NF-κB a：与Control组比较，P＜0.05；b：与AR组比较，P＜0.05；c：与QUE-
p65/NF-κB p65比值。 L组比较，P＜0.05；d：与QUE-H组比较，P＜0.05。
2.8 统计学方法 3.4 槲皮素对AR大鼠全血中免疫细胞比例的影响
采用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。计量资 与 Control 组比较，AR 组大鼠全血中 Th17 比例和
料符合正态分布的以x±s表示，多组间比较采用单因素 Th17/Treg 比值均显著升高（P＜0.05），Treg 比例显著降
方差分析，组间两两比较采用 SNK-q 检验。检验水准 低（P＜0.05）；与 AR 组比较，QUE-L 组、QUE-H 组大鼠
α＝0.05。 全血中 Th17 比例和 Th17/Treg 比值均显著降低（P＜
3 结果 0.05），Treg 比例均显著升高（P＜0.05），且 QUE-H 组较
3.1 槲皮素对AR大鼠鼻炎症状评分的影响 QUE-L 组变化更明显（P＜0.05）；与 QUE-H 组比较，
与Control组[（0.50±0.09）分]比较，AR组大鼠鼻炎 QUE-H+LPS 组大鼠全血中 Th17 比例和 Th17/Treg 比值
症状评分[（7.08±0.74）分]显著升高（P＜0.05）；与AR组 均显著升高（P＜0.05），Treg 比例显著降低（P＜0.05）。
比较，QUE-L 组、QUE-H 组大鼠鼻炎症状评分[分别为 结果见表3。

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