Page 75 - 《中国药房》2025年7期
P. 75

过敏性鼻炎（allergic rhinitis，AR）属于耳鼻喉科常             物科技有限公司，批号分别为PL0303692、PL0402581），
          见的免疫慢性炎症疾病，临床症状主要表现为鼻腔瘙                            磷酸化 NF-κB p65（p-NF-κB p65）、NF-κB p65 抗体（沈
          痒、鼻塞、打喷嚏、流涕等，常伴随鼻窦炎、鼻息肉、中耳                         阳 万 类 生 物 科 技 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为 WL02169、
          炎、哮喘等疾病发生，严重影响患者正常生活，加之其发                          WL01980），辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗（北京达
          病率高且反复难愈，已成为世界公共的卫生难题 。目                           科为生物技术有限公司，批号8018021），CD3、CD4抗体
                                                    [1]
          前，AR患者主要通过服用鼻内抗胆碱能药、抗组胺（his‐                      （上海信裕生物科技有限公司，批号分别为 bs-10498R、
          tamine，HIS）药、糖皮质激素等进行治疗，虽然服药后病                     XY-02121），CD25、Foxp3、IL-17 抗体[爱必信（上海）生
                                           [2]
          情可得到缓解，但长期服用副作用显著 。因此，寻求安                          物科技有限公司，批号分别为 abs149147、abs118887、
          全的、疗效显著的新型治疗AR的药物至关重要。                             abs121447]，β-肌动蛋白（β-actin）抗体（南京赛戈巍生物
              槲皮素作为一种黄酮类化合物，具有抗炎、抗氧化、                        科技有限公司，批号48139）。
          抗肿瘤、调节免疫、抗过敏等多种药理作用，在治疗变应                          1.3 动物
                                [3]
          性疾病方面具有重要作用 。研究显示，槲皮素可通过                               本研究所用动物为健康 SPF 级 SD 成年雄性大鼠，
          平衡辅助性T细胞1（helper T cells 1，Th1）/Th2、Th17/调         共 62 只，体重（200±20） g，7～8 周龄，购自湖北贝恩特
          节性T细胞（regulatory T cells，Treg）比例，降低血清中免            生物科技有限公司[动物生产许可证号：SCXK（鄂）
          疫球蛋白E（immunoglobulin E，IgE）、HIS及炎症因子水              2021-0027]。 将 大 鼠 饲 养 在 温 度（25±2）  ℃ 、湿 度
          平，从而减轻AR症状 。Toll样受体4（Toll-like receptor            55%～65%、光照 12 h/黑暗 12 h 的环境中，并给予充足
                            [4]
          4，TLR4）/白细胞介素 1（interleukin 1，IL-1）受体相关激           食物与水。本研究已通过贝恩特生物中心动物伦理委
          酶（IL-1  receptor-associated  kinase，IRAK4）/核 因 子 κB  员会审核批准（审批号：BNT-2023-0092）。
         （nuclear factor κB，NF-κB）信号通路作为经典免疫炎症               2 方法
          相关通路，参与了 AR 的发生发展，抑制 TLR4/IRAK4/                   2.1 AR大鼠模型构建
          NF-κB信号通路的激活可减少炎症因子的释放，抑制过                             所有大鼠先适应性喂养1周，然后将62只大鼠随机
                                      [5]
          敏性炎症反应，从而减轻AR症状 。但槲皮素能否通过                          分为对照组（Control组，n＝12）和造模组（n＝50）。造模
          调控TLR4/IRAK4/NF-κB信号通路来减轻AR大鼠的炎                    组大鼠腹腔注射 1 mL OVA 混悬液[0.3 mg OVA、15 mg
          症反应尚不清楚。鉴于此，本研究从 TLR4/IRAK4/NF-                    Al（OH） 3、1 mL 0.9% NaCl 溶液]致敏，隔日注射 1 次，连
          κB信号通路出发，初步探讨槲皮素对AR大鼠炎症反应                          续 7 次；实验第 15 天在造模大鼠双侧鼻腔中分别滴入
          的影响及作用机制，以期为AR治疗提供新思路。                             0.05 mL OVA混悬液继续致敏，每天1次，连续7 d 。对
                                                                                                        [6]
          1 材料                                               照组大鼠同步腹腔注射、滴鼻等体积生理盐水。末次滴
          1.1 主要仪器                                           鼻后，观察大鼠30 min内的挠鼻次数、喷嚏个数、流涕程
                                                                                                 [7]
              本研究所用的主要仪器有：SuPerMax 3000FL 型多                 度并进行评分，总分≥5 分表示造模成功 。最终共有
          功能酶标仪（上海闪谱生物科技有限公司）、BX51 型显                        48只大鼠造模成功。
                                              +
          微镜（日本 Olympus 公司）、ChemiDoc XRS 型凝胶成像               2.2 分组与给药
          分析系统（美国Thermo Fisher Scientific公司）、BD FAC‐             将 48 只造模成功的大鼠随机分为 AR 组，槲皮素
          SCalibur型流式细胞仪（美国BD公司）。                            低、高剂量组（QUE-L、QUE-H 组）和槲皮素高剂量+
          1.2 主要药品与试剂                                        TLR4 激活剂组（QUE-H+LPS 组），每组 12 只。QUE-L
              本研究所用的主要药品与试剂有：槲皮素对照品                          组、QUE-H 组大鼠分别灌胃 17.5、35 mg/kg 槲皮素并尾
                                                                                     [4]
         （上海阿拉丁生化科技股份有限公司，批号Q463731，纯                        静脉注射10 mL/kg生理盐水 ，QUE-H+LPS组大鼠灌胃
                                                                                                    [8]
          度 ≥95%），TLR4 激 活 剂 脂 多 糖（lipopolysaccharide，       35 mg/kg 槲皮素并尾静脉注射 0.4 mg/kg LPS ，Control
          LPS；北京索莱宝科技有限公司，批号 L8880，纯度≥                       组和 AR 组大鼠灌胃 10 mL/kg 生理盐水并尾静脉注射
          99%），卵白蛋白（ovalbumin，OVA；四川省维克奇生物科                  10 mL/kg生理盐水；每天给药1次，连续21 d。
          技有限公司），IgE、HIS酶联免疫吸附试验测定（ELISA）                    2.3 鼻炎症状评分
          试剂盒（武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号分                               末次给药后30 min内，观察大鼠挠鼻、流涕、打喷嚏
                                                                                              [7]
          别为 E-EL-R0517、E-EL-0032），白细胞介素 17（interleu‐        症状，并进行评分。具体评分标准如下 ：挠鼻——1分，
          kin-17，IL-17）、IL-10 ELISA 试剂盒（南京森贝伽生物科             轻擦鼻几次；2分，抓挠鼻频繁；3分，挠鼻、挠面不止，到
          技有限公司，批号分别为SBJ-R0601、SBJ-R0095），TLR4               处摩擦。流涕——1 分，流到鼻前孔；2 分，过鼻前孔；
          抗体（南京莱富赛生物科技有限公司，批号35463），磷酸                       3 分，流涕满面，挂满须毛。打喷嚏——1 分，1～3 个；
          化 IRAK4（p-IRAK4）、IRAK4 抗体（深圳市豪地华拓生                 2分，4～10个；3分，11个及以上。


          中国药房  2025年第36卷第7期                                                 China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 7    · 833 ·
   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80