Page 103 - 《中国药房》2025年4期

卡培他滨分别为 1 000、2 500、5 000、10 000、50 000、 μL，加水100 μL稀释，于15 ℃下混匀10 min，再以4 000
200 000、500 000 ng/mL，紫杉醇分别为 100、250、500、 r/min离心5 min，取上清液，进样测定。
1 000、5 000、20 000、50 000 ng/mL，多西他赛分别为50、 2.3 色谱与质谱条件
125、250、500、2 500、10 000、25 000 ng/mL，他莫昔芬分 2.3.1 色谱条件
别为50、125、250、500、2 500、10 000、25 000 ng/mL，来曲 以 Agilent Eclipse Plus C18 （100 mm×3.0 mm，3.5
唑分别为50、125、250、500、2 500、10 000、25 000 ng/mL， μm）为色谱柱，以水（含 0.1% 甲酸和 0.04% 5 mmol/L 甲
甲氨蝶呤分别为500、1 250、2 500、5 000、25 000、100 000、 酸铵）为流动相A相、乙腈（含0.1%甲酸）为流动相B相，
250 000 ng/mL）和质控工作溶液（伊立替康质量浓度分 进行洗脱梯度（0～0.1 min，20%B；0.1～1.5 min，20%B→
别为 300、3 000、40 000 ng/mL，卡培他滨分别为 3 000、 40%B；1.5～2.8 min，40%B→98%B；2.8～3.8 min，98%B；
30 000、400 000 ng/mL，紫杉醇分别为 300、3 000、40 000 3.8～3.81 min，98%B→20%B；3.81～5.5 min，20%B）；流
ng/mL，多西他赛分别为 150、1 500、20 000 ng/mL，他莫 速为0.6 mL/min；柱温为40 ℃；进样量为10 μL；分析时
昔芬分别为150、1 500、20 000 ng/mL，来曲唑分别为150、 间为5.5 min。
1 500、20 000 ng/mL，甲氨蝶呤分别为 1 500、150 000、 2.3.2 质谱条件
200 000 ng/mL）。 采用电喷雾离子源（electrospray ionization，ESI）在
2.1.3 标准血浆样品溶液和质控血浆样品溶液 正、负离子模式下以多反应监测模式（multiple reaction
精密量取“2.1.2”项下标准曲线工作溶液 10 μL，加 monitoring，MRM）进行扫描 ；毛细管电压为 4 500～
入空白血浆490 μL，制成伊立替康质量浓度分别为2、5、 5 500 V；离子源温度为 550 ℃；雾化气压力为 70 psi；辅
10、20、100、400、1 000 ng/mL，卡培他滨分别为 20、50、 助气压力为 70 psi；气帘气压力为 20 psi；碰撞气压力为
100、200、1 000、4 000、10 000 ng/mL，紫杉醇分别为2、5、 6 psi。7种抗肿瘤药物的质谱参数见表1（内标略）。
10、20、100、400、1 000 ng/mL，多西他赛分别为1、2.5、5、 表1 7种抗肿瘤药物的质谱参数
10、50、200、500 ng/mL，他莫昔芬分别为1、2.5、5、10、50、 药物名称 入口电压/V 碰撞能/V 去簇电压/V 出口电压/V 母离子m/z 子离子m/z 驻留时间/ms
伊立替康 8 38 44 13 587.1 167.1 25
200、500 ng/mL，来曲唑分别为 1、2.5、5、10、50、200、500
卡培他滨 11 38 43 12 360.1 244.1 20
ng/mL，甲氨蝶呤分别为10、25、50、100、500、2 000、5 000 紫杉醇 8 40 88 16 876.4 308.0 25
ng/mL的标准血浆样品溶液。精密量取“2.1.2”项下质控 多西他赛 11 30 80 14 830.3 304.2 25
他莫昔芬 10 34 80 10 372.1 129.1 20
工作溶液，同法制成伊立替康质量浓度分别为 6、60、 来曲唑 －10 －25 －70 －8 284.1 242.1 20
800 ng/mL，卡培他滨分别为 60、600、8 000 ng/mL，紫杉 甲氨蝶呤 10 10 80 12 455.0 308.0 20
醇分别为 6、60、800 ng/mL，多西他赛分别为 3、30、400 2.4 方法学考察
ng/mL，他莫昔芬分别为3、30、400 ng/mL，来曲唑分别为 根据 2020 年版《中国药典》（四部）“9012 生物样品
3、30、400 ng/mL，甲氨蝶呤分别为 30、300、4 000 ng/mL 定量分析方法验证指导原则”进行方法学考察。
的质控血浆样品溶液。以上血浆样本溶液均于－80 ℃ 2.4.1 专属性
冷藏，备用。 分别取 6 个不同来源的空白血浆，混匀后，取 100
2.1.4 混合内标溶液 μL，除不加内标外，其余按“2.2”项下方法处理，再按
分别取伊立替康-d10、卡培他滨-d11、紫杉醇-d5、多 “2.3”项下条件进样测定，记录色谱图（图 1A）。取
西他赛-d9、他莫昔芬-d5、来曲唑-d4、甲氨蝶呤-d3 对照 “2.1.2”项下标准曲线工作溶液（伊立替康、卡培他滨、紫
品，用 DMSO 溶解，制成上述各成分质量浓度均为 1 杉醇、多西他赛、他莫昔芬、来曲唑、甲氨蝶呤的质量浓
mg/mL的内标储备液。取上述各内标储备液，用萃取剂 度分别为500、5 000、500、250、250、250、2 500 ng/mL）10
[含 0.1% 甲酸的甲醇-乙腈混合液（1∶1，V/V）]稀释，制 μL，加入上述混匀空白血浆 90 μL，按“2.2”项下方法处
成各成分质量浓度均为 10 ng/mL 的混合内标溶液， 理后，再按“2.3”项下条件进样测定，记录色谱图（图
于－20 ℃冷藏，备用。 1B）。取某患者服用伊立替康后的血样，按“2.2”项下方
2.2 血浆样本的前处理 法处理后，再按“2.3”项下条件进样测定，记录色谱图（图
取患者血样，置于乙二胺四乙酸二钾抗凝管中，以 1C）。结果显示，在正离子模式下，伊立替康、卡培他滨、
4 000 r/min 离心 5 min，取血浆，备用。精密量取血浆样 紫杉醇、多西他赛、他莫昔芬和甲氨蝶呤的保留时间分
本 100 μL，置于 1.5 mL 离心管中，加入“2.1.4”项下混合 别约为1.5、1.8、2.4、2.3、2.1、1.2 min，负离子模式下来曲
内标溶液 300 μL，混合，以 2 500 r/min 振荡混匀 5 min 唑的保留时间约为 2 min；血浆内源性物质对各药物的
后，于 4 ℃下以 14 000 r/min 离心 5 min；取上清液 100 测定不产生干扰，专属性良好。

中国药房 2025年第36卷第4期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 4 · 477 ·