Page 57 - 《中国药房》2025年3期

缺血性脑卒中是由大脑局部供血障碍所导致的神 1.2 主要药品与试剂
经功能受损、脑组织坏死的一类疾病，其发病率、致残 心脑舒通胶囊（批号2108026，规格为每粒含呋甾皂
率、复发率、病死率均较高，给患者家庭和社会带来沉重 苷15 mg）购自吉林敖东洮南药业股份有限公司；银杏叶
[1]
的经济负担 。目前，缺血性脑卒中的临床治疗以静脉 提取物片（批号 7491222，规格为每片含银杏叶提取物
溶栓和动脉内血栓切除术为主，以恢复缺血脑组织的血 40 mg）购自德国威玛舒培博士药厂；组织铁、脂质过氧
液供应。然而，缺血脑组织在快速再灌注时，会发生一 化 物（lipid peroxide，LPO）、丙 二 醛（malondialdehyde，
系列继发性病理损伤，即脑缺血再灌注损伤（cerebral MDA）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量检测试剂盒
ischemia-reperfusion injury，CIRI），进而阻碍患者神经功 （批号分别为2309001、2309002、1310003、2310004）均购
能的恢复；CIRI的病理机制较为复杂，涉及炎症反应、氧 自北京索莱宝科技有限公司；TTC 染色试剂盒（批号
化应激、细胞凋亡等过程 [2―3] 。因此，深入研究CIRI的病 20230630）购自南京建成科技有限公司；兔源 HO-1、
理过程对于探索有效的防治策略至关重要。 GPX4 抗体（批号分别为 ab189491、ab125066）均购自英
铁在脑组织内存在着动态平衡，当脑缺血再灌注 国 Abcam 公司；兔源 Nrf2 抗体（批号 16396-1-AP）购自
武汉三鹰生物技术有限公司；兔源甘油醛-3-磷酸脱氢酶
时，脑组织细胞损伤，血脑屏障破坏，脑实质内的铁水平
（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗
急剧升高，从而引发铁超载、脂质过氧化、铁代谢紊乱
体（批号AB-P-R001）购自杭州贤至生物科技有限公司；
等，最终导致脑细胞铁死亡 [4―5] 。近年来，相关研究证
辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白G二抗（批
实，铁死亡是诱发 CIRI 的一种新机制，与脑组织细胞死
号B42Q00103）购自北京鼎国昌盛生物技术有限责任公
亡密切相关 [6―7] 。可见，抑制铁死亡逐渐成为减轻 CIRI
司；ECL化学发光底物试剂盒、逆转录试剂盒、荧光定量
患者神经损伤的一种重要方法。
试剂盒（批号分别为BL520A、BL699A、BL697A）均购自
心脑舒通胶囊是由中药蒺藜干燥的地上全草提取
北京兰杰柯科技有限公司；引物由武汉赛维尔生物科技
后制成的胶囊剂，其主要成分是蒺藜总皂苷，具有活血
有限公司设计、合成。
化瘀、舒利血脉等药理作用 。药理实验研究显示，心脑
[8]
1.3 主要仪器
舒通胶囊能够显著提高CIRI沙鼠的成活率，减轻沙鼠海
本研究所用主要仪器有 Synergy NEO 型全自动多
马 CA1 区的神经细胞损伤 ；心脑舒通胶囊可促进大鼠
[9]
功能酶标仪（美国 Bio-Rad 公司）、Fluor Chem R 型凝胶
[10]
脑缺血后微血管新生和神经功能恢复 。研究显示，核
成像分析仪（美国 ProteinSimple 公司）、TG16KK 型高速
转录因子红系2相关因子2（nuclear factor-erythroid 2-re‐
低温离心机（长沙东旺实验仪器有限公司）、Quanstudio
lated factor 2，Nrf2）/血红素氧合酶 1（heme oxygenase 1，
5 型实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）仪（美国
HO-1）/谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，
Thermo Fisher Scientific公司）。
GPX4）是铁死亡的关键通路，激活 Nrf2/HO-1/GPX4 信
2 方法
号通路可抑制CIRI大鼠神经元铁死亡 。基于此，本研
[11]
2.1 分组与给药
究拟采用短暂性大脑中动脉闭塞（transient middle cere‐
将大鼠随机分为假手术组，模型组，心脑舒通低、高
bral artery occlusion，tM-CAO）法建立CIRI大鼠模型，并
剂量组（220、440 mg/kg，低、高剂量分别为临床等效剂量
从 Nrf2/HO-1/GPX4 信号通路角度出发，探讨心脑舒通
的2、4倍），银杏叶提取物组（阳性对照，150 mg/kg，剂量
胶囊是否可通过调控铁死亡途径改善CIRI，以期为心脑
根据临床等效剂量换算而得），每组10只。各给药组大
舒通胶囊的临床应用提供实验依据。
鼠灌胃相应药液，假手术组和模型组大鼠灌胃等量生理
1 材料 盐水，均连续7 d。
1.1 实验动物 2.2 造模与取材
本研究所用实验动物为SPF级6周龄雄性SD大鼠， 采用 tM-CAO 法构建 CIRI 大鼠模型。术前禁食不
共 50 只，体重 180～200 g，购自济南朋悦实验动物繁育 禁水 12 h，各给药组大鼠腹腔注射 2% 戊巴比妥钠（40
有限公司，动物生产许可证号为 SCXK（鲁）20220006。 mg/kg）麻醉后，以仰卧位固定于手术台，沿颈部正中间
大鼠饲养于河南省中西医结合医院实验动物中心，温度 切口并进行钝性肌肉分离，暴露出颈总动脉（common
22～25 ℃、湿度50%～70%的环境中，自由进食与饮水。 carotid artery，CCA），然后小心分离出右侧颈内动脉
本实验经河南省中西医结合医院实验动物伦理委员会 （internal carotid artery，ICA）和颈外动脉（external carotid
批准，批准号为HNTCMDW-2024050502。 artery，ECA），结扎 CCA 近心端和 ECA，将尼龙线栓由

中国药房 2025年第36卷第3期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 3 · 307 ·