Page 52 - 《中国药房》2025年3期
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98.8%）、甘草酸铵对照品（批号 110731-202122，纯度                  2.3.2 稳定性试验
          94.4%）、大 黄 酸 对 照 品（批 号 110757-201607，纯 度                取精天颗粒（S11）适量，按“2.2.1”项下方法制备供
          96.0%）、大 黄 素 对 照 品（批 号 110756-201913，纯 度            试品溶液，分别于室温条件下放置 0、2、4、8、12、24 h 时
          96.0%）、甘草次酸对照品（批号 110723-202316，纯度                  按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以 16 号
          99.6%）、大 黄 酚 对 照 品（批 号 110796-201922，纯 度            峰为参考峰，计算得各共有峰相对保留时间和相对峰面
          99.4%）、芦荟大黄素对照品（批号 110795-201710，纯度                 积的 RSD 均不大于 3.8%（n＝6），表明在室温下 24 h 内
          98.3%）均购自中国食品药品检定研究院；乙腈、磷酸均                         供试品溶液稳定。
          为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。                               2.3.3 重复性试验
          2 方法与结果                                                 取精天颗粒（S11）适量，按“2.2.1”项下方法平行制
          2.1 色谱条件                                            备 6 份供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件分别进样测
                     ®
              以 Luna   Omega  Polar  C18（150  mm×2.1  mm，1.6   定，记录峰面积。以16号峰为参考峰，计算得各共有峰
          μm）为色谱柱，以乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B）为流动相                      相对保留时间和相对峰面积的RSD均不大于4.4%（n＝
                                                              6），表明该方法重复性良好。
          进行梯度洗脱（0～3 min，5%A→8%A；3～15 min，8%A→
                                                              2.4 精天颗粒指纹图谱的建立
          15%A；15～50 min，15%A→26%A；50～60 min，26%A→
                                                                  取13批精天颗粒，分别按“2.2.1”项下方法制备供试
          42%A；60～68 min，42%A→44%A；68～73 min，44%A→
                                                              品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，得到13批样品
          70%A；73～76 min，70%A→5%A；76～80 min，5%A）；
                                                              的 UPLC 图，再导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系
          进样量为 1 μL；流速为 0.2 mL/min；柱温为 30 ℃；检测
                                                              统（2012 版）》软件进行分析，设定样品 S13 的图谱为参
          波长为265 nm。
                                                              照图谱、时间窗宽度为0.1 min，采用中位数法，结合多点
          2.2 溶液的制备
                                                              校正并进行 Mark 峰匹配，生成精天颗粒对照指纹图谱
          2.2.1 供试品溶液的制备
                                                             （R）及13批样品的UPLC叠加指纹图谱（图1）。由对照
              取精天颗粒适量，研细，精密称定 2 g，置具塞锥形
                                                              指纹图谱标定出25个共有峰；相似度分析结果显示，13
          瓶中，精密加入甲醇 20 mL，称质量，超声（功率 250 W，
                                                              批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为 0.955～
          频率45 kHz）处理30 min；放冷后再次称质量，用甲醇补
                                                              0.996，均在 0.9 以上，说明各批次间样品具有高度相似
          足减失的质量；滤过，滤液以 0.22 μm 微孔滤膜过滤，即
                                                              性，各批次精天颗粒的制备工艺较为稳定，质量一致性
          得供试品溶液。
                                                              较好。
          2.2.2 对照品溶液的制备
                                                                1 200
              分别精密称取5-羟甲基糠醛、红景天苷、绿原酸、肉
                                                                1 000
          桂酸、大黄酸、甘草酸铵、大黄素、甘草次酸、大黄酚、芦
          荟大黄素对照品适量，加甲醇制成一定浓度的单一对照                               800
          品贮备液；分别取上述各单一对照品贮备液适量，置于                             mAU  600
          同一容量瓶中，加甲醇定容，制成质量浓度分别为                                 400
          49.00、103.50、26.52、18.96、76.96、25.97、12.62、9.68、       200
          13.22、20.16 μg/mL的混合对照品溶液。                              0
          2.2.3 单味饮片供试品溶液的制备                                       0    10   20   30   40   50   60   70   80
                                                                                      t/min
              按处方比例分别称取10味饮片，再按精天颗粒制备                            S1～S13：精天颗粒；R：对照指纹图谱。
          工艺制样，得各单味饮片样品；取各单味饮片样品，按                            图1 13批精天颗粒的指纹图谱叠加图及对照指纹图谱
         “2.2.1”项下方法处理，即得单味饮片的供试品溶液。                          2.5 精天颗粒共有峰的指认与归属
          2.3 方法学考察                                               取按“2.2.3”项下方法制备的单味饮片供试品溶液，
          2.3.1 精密度试验                                         按“2.1”项下色谱条件进样检测，得各单味饮片的UPLC
              取精天颗粒（S11）适量，按“2.2.1”项下方法制备供                    图。将该色谱图与混合对照品溶液的UPLC图（R1）、精
          试品溶液，按“2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记                       天颗粒对照指纹图谱（R）同时进行比对（图2），对样品中
          录峰面积。以16号峰（峰形较好且响应值较高）为参考                           各共有峰进行指认，共指认出其中 10 个，分别是 3 号峰
          峰，计算得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD                           5-羟甲基糠醛、5号峰红景天苷、8号峰绿原酸、15号峰肉
          均不大于2.9%（n＝6），表明该方法精密度良好。                           桂酸、19 号峰芦荟大黄素、20 号峰甘草酸铵、21 号峰大


          · 302 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 3                               中国药房  2025年第36卷第3期
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