Page 66 - 《中国药房》2025年1期

2.6 大鼠FINS及IR相关指标检测 3 结果
取“2.4”项下各组大鼠的血清样品，按照相应试剂盒 3.1 各组大鼠一般情况比较
说明书要求，采用ELISA法检测血清中FINS水平，并按 对照组大鼠反应灵敏、活跃，毛发柔顺光泽，日排尿
下式计算稳态模型胰岛素抵抗指数（homeostasis model 量、饮水量均正常；与对照组比较，模型组大鼠精神状态
assessment of insulin resistance，HOMA-IR）和胰岛素敏
欠佳，消瘦，毛发干枯晦暗，部分见脱毛、尾部溃烂症状，
感 性 指 数（insulin sensitivity index，ISI）：HOMA-IR＝
反应迟缓，活动减少，喜聚群，日排尿量、饮水量均显著
[16]
FBG×FINS/22.5 ；ISI＝1/（FBG×FINS）[因 ISI 值为非
增加（P＜0.05）。与模型组比较，各给药组大鼠上述表
正态分布，故以其计算结果的自然对数（insulin action in‐
现均有不同程度减轻，日排尿量、饮水量均显著降低
[17]
dex，IAI）表示并分析] 。
（P＜0.05）。
2.7 大鼠肝脏组织中脂质过氧化、内源性抗氧化活性指
3.2 各组大鼠FBG及生化指标比较
标及Fe 、Fe水平检测
2+
给药前，与对照组比较，其余各组大鼠 FBG 水平
取“2.4”项下各组大鼠冻存的肝脏组织样品，按照相
均显著升高（P＜0.01）。给药后，与对照组比较，模型
应试剂盒说明书要求，以羟胺法检测各组大鼠肝脏组织
组大鼠 FBG、TC、TG、LDL-C、AST、ALT 水平均显著升
中SOD、MDA 水平，以比色法检测GSH 水平，以亚铁嗪
高，HDL-C 水平显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，
+
2+
比色法检测Fe 、Fe水平，以微板法检测NADP /NADPH
QG组和Fer-1组大鼠FBG、TC、TG、LDL-C、ALT水平均
水平，使用流式细胞仪检测大鼠ROS水平。
显 著 降 低 ，HDL-C 水 平 均 显 著 升 高（P＜0.05 或 P＜
2.8 大鼠肝脏组织病理形态学观察
0.01），QG组AST水平显著降低（P＜0.05）。与QG组比
取“2.4”项下各组大鼠经固定（48 h）的肝脏组织，用
较，QG+erastin 组大鼠 FBG、ALT、AST、TC、TG、LDL-C
水冲洗，经乙醇脱水后，包埋、切片；取切片，进行 HE 染
水平均显著升高，HDL-C 水平显著降低（P＜0.01）。结
色后，脱水封片，使用显微镜观察大鼠肝脏组织病理形
果见表1。
[18]
态并拍照 。
3.3 各组大鼠FINS及IR相关指标比较
2.9 大鼠肝脏组织铁死亡相关蛋白表达水平检测
与对照组比较，模型组大鼠 FINS 水平、HOMA-IR
采用Western blot法检测。取“2.4”项下各组大鼠冻
存的肝脏组织样品，提取总蛋白后，以BCA法测定蛋白 均显著升高，IAI 显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，
浓度，并将蛋白煮沸变性；配制分离胶、上样、电泳、转 QG 组和 Fer-1 组大鼠 FINS 水平、HOMA-IR 均显著降
膜、洗膜、封闭；分别加入GPX4、FTH1、ACSL3、ACSL4、 低，IAI 均显著升高（P＜0.05 或 P＜0.01）。与 QG 组比
FTMT、xCT一抗（稀释度均为1∶2 000）及内参β-actin一 较，QG+erastin 组大鼠 FINS 水平、HOMA-IR 均显著升
抗（稀释度为 1∶10 000），4 ℃孵育过夜；洗膜、加入相应 高，IAI显著降低（P＜0.01）。结果见表2。
二抗（稀释度均为 1∶10 000），于室温下孵育 60 min；以 3.4 各组大鼠脂质过氧化、内源性抗氧化活性指标及
2+
TBST洗膜，加入ECL化学发光试剂进行显色，置于凝胶 Fe 、Fe水平比较
成像系统成像，采用 Image J 软件进行灰度值检测和数 与对照组比较，模型组大鼠 GSH、SOD 水平均显著
+
2+
据分析，以目的蛋白与内参β-actin的灰度值比值表示目 降低，MDA、ROS、Fe 、Fe 水平和 NADP /NADPH 均显
的蛋白的表达水平。 著升高（P＜0.01）。与模型组比较，QG 组与 Fer-1 组大
2+
2.10 统计学方法 鼠GSH、SOD水平均显著升高，MDA、ROS、Fe 、Fe水平
+
使用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。符合正 和 NADPH/NADP 均显著降低（P＜0.01）。与 QG 组比
态分布的计量资料以x±s表示，多组间比较采用方差分 较 ，QG+erastin 组 大 鼠 GSH、SOD 水 平 均 显 著 降 低 ，
2+
+
析 ，进 一 步 两 两 比 较 使 用 LSD-t 检 验 。 检 验 水 准 MDA、ROS、Fe 、Fe 水平和 NADP /NADPH 均显著升高
α＝0.05。 （P＜0.01）。结果见表3。
表1 各组大鼠FBG、AST、ALT、TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比较（x±s）
FBG/（mmol/L）
组别 例数 TC/（mmol/L） TG/（mmol/L） LDL-C/（mmol/L） HDL-C/（mmol/L） AST/（U/L） ALT/（U/L）
给药前 给药后
对照组 12 5.18±0.21 5.03±0.69 1.56±0.10 0.54±0.12 0.67±0.06 2.54±0.12 50.54±5.45 36.42±10.82
模型组 8 22.68±4.29 a 23.63±4.23 a 3.22±0.28 a 2.27±0.25 a 1.49±0.20 a 1.07±0.16 a 142.84±18.15 a 156.93±16.97 a
QG组 9 23.23±4.82 a 12.88±2.80 b 2.20±0.17 b 1.31±0.15 b 0.99±0.14 b 2.00±0.06 b 86.12±14.21 c 74.37±14.98 b
Fer-1组 10 23.31±2.25 a 12.72±2.55 b 2.17±0.29 b 1.30±0.11 b 1.00±0.06 c 1.97±0.11 b 116.01±9.91 107.04±9.28 c
QG+erastin组 7 23.60±3.50 a 23.54±2.83 d 3.38±0.33 d 2.76±0.40 d 1.46±0.17 d 1.09±0.20 d 158.65±28.11 d 163.36±8.16 d
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组比较，P＜0.05；d：与QG组比较，P＜0.01。

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