Page 42 - 《中国药房》2024年23期
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2.2 干姜拌捣五味子炮制前后供试品溶液的制备                             2.4.4 稳定性试验
              根据传统炮制和临床用药情况，采用水作为提取溶                              取干姜（编号G1）和五味子（编号W1）适量，按“2.2”

          剂。取“2.1”项下炮制前后的样品各10 g，分别置于圆底                       项下方法制备干姜拌捣五味子炮制前后样品的供试品
          烧瓶中，加10倍量水，浸泡30 min后加热回流1 h，提取2                     溶液，在室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按“2.4.1”项下
          次；过滤，合并滤液并转移至 200 mL 容量瓶中，加水定                       色谱条件进样测定，记录色谱图。以 9 号峰（五味子醇
          容。取一定量定容后的溶液离心，经 0.22 μm 微孔滤膜                       甲）为参照峰，计算得各共有峰的相对峰面积和相对保
          过滤，收集滤液，即得干姜拌捣五味子炮制前后供试品                            留时间的RSD均小于1.99%（n＝6），表明干姜拌捣五味
          溶液  [7―8] 。                                         子炮制前后样品的供试品溶液在室温下放置 24 h 稳定
          2.3 对照品溶液的制备                                        性良好。
              精密称取适量6-姜酚、五味子醇甲、五味子醇乙、8-                       2.4.5 指纹图谱的建立及相似度评价
                                                                  按“2.2”项下方法将五味子饮片（编号W1～W10）与
          姜酚、10-姜酚、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素对
                                                              干姜饮片（编号G1～G10）按编号顺序两两配伍，分别制
          照品，分别置于 5 mL 容量瓶中，加甲醇至刻度线，即得
                                                              备干姜拌捣五味子炮制前后样品的供试品溶液，按
          各成分单一对照品溶液。取各成分单一对照品溶液适
                                                             “2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。将10批干
          量，混匀，使用甲醇稀释为含6-姜酚448.50 μg/mL、五味
                                                              姜-五味子配伍药对样品和10批干姜拌捣五味子样品的
          子醇甲409.20 μg/mL、五味子醇乙210.24 μg/mL、8-姜酚
                                                              色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012
          77.40 μg/mL、10-姜酚 162.80 μg/mL、五味子甲素 127.00
                                                              版）》，设置时间窗宽度为0.1 min，使用多点校正Mark分
          μg/mL、五味子乙素 153.80 μg/mL、五味子丙素 55.56
                                                              析方法建立 10 批干姜-五味子配伍药对样品（依次命名
          μg/mL的混合对照品溶液。
                                                              为 Z1～Z10）和干姜拌捣五味子样品（依次命名为 S1～
          2.4 干姜拌捣五味子炮制前后样品指纹图谱的建立
                                                              S10）的叠加指纹图谱，并采用中位数法生成各自的对照
          2.4.1 色谱条件
                                                              指纹图谱Rz、Rs，详见图2、图3。由图2、图3可知，10批
              采 用 Agilent  Zorbax  SB-C18 色 谱 柱（4.6  mm×250
                                                              干姜-五味子配伍药对样品指纹图谱中共标定出14个共
          mm，5 μm），以乙腈（A）-磷酸溶液（B）为流动相进行梯
                                                              有峰，10批干姜拌捣五味子样品指纹图谱中共标定出22
          度洗脱（0～15 min，8%A→20%A；15～20 min，20%A→
                                                              个共有峰。以2种样品各自的对照指纹图谱Rz、Rs为参
          30%A；20～25 min，30%A→55%A；25～35 min，55%A→            照，进一步对2种样品的指纹图谱分别进行相似度评价。

          60%A；35～41 min，60%A→65%A；41～55 min，65%A→
                                                              结果显示，2种样品间的相似度均大于0.98，表明相同样
          75%A；55～58 min，75%A→8%A；58～60 min，8%A）；             品间相似度良好，指纹图谱的质量稳定，可反映干姜拌
          流速为1.0 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为10 μL；检测                  捣五味子炮制前后样品的成分特征。

          波长为250 nm。                                            1 650
          2.4.2 精密度试验                                           1 500
              取干姜（编号G1）和五味子（编号W1）适量，按“2.2”                      1 250
          项下方法制备干姜拌捣五味子供试品溶液，按“2.4.1”项                         U/mV  1 000
          下色谱条件连续进样测定 6 次，记录色谱图。以 9 号峰                           500
         （五味子醇甲）为参照峰，计算得各共有峰的相对峰面积                               250
          和相对保留时间的RSD均小于1.92%（n＝6），表明方法
                                                                  0
          精密度良好。                                                    0     10    20     30    40     50    60
                                                                                      t/min
          2.4.3 重复性试验                                         图2 10 批干姜-五味子配伍药对样品的叠加指纹图谱
              取同一批次的干姜（编号G1）和五味子（编号W1），                            和对照指纹图谱Rz
          按“2.2”项下方法平行制备 6 份干姜拌捣五味子供试品                        2.4.6 共有峰的指认及归属

          溶液，按“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。                            通过比对相同进样条件下的混合对照品溶液、干
          以9号峰（五味子醇甲）为参照峰，计算得各共有峰的相                           姜-五味子配伍药对供试品溶液、干姜拌捣五味子供试
          对峰面积和相对保留时间的RSD均小于1.97%（n＝6），                       品溶液和单味捣干姜供试品溶液、单味捣五味子供试品
          表明方法的重复性良好。                                         溶液（均按“2.2”项下方法提取制备）图谱，进行炮制前后


          · 2872 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 23                            中国药房  2024年第35卷第23期
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