Page 82 - 《中国药房》2024年21期
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94 ℃变性 5 s，52 ℃退火 5 s，80 ℃延伸 5 s，内部 5 个循            生率等。采用 Mann-Whitney U 检验分析不同基因型间
          环，持续外部40个循环；最后72 ℃延伸3 min。                          的MTX血药浓度差异。
          2.2.4 MALDI-TOF-MS法检测                               3 结果
              向反应产物的 384 孔板中加入 16 μL 三蒸水，以                    3.1 一般资料
          2 000 r/min离心3 min；加入6 mg树脂，在反转摇匀仪上                     本研究共纳入颅内肿瘤患儿 75 例（男 43 例、女 32
          进行树脂纯化反应 35 min 脱盐；反应完成后再次以                         例），其中髓母细胞瘤48例，室管膜瘤21例，星形细胞瘤
          2 000 r/min 离心 3 min。将脱盐处理后的样品点在样品                  3例，中分化松果体实质瘤、原始性神经外胚瘤和低级别
          靶上，自然结晶；采用MALDI-TOF-MS法检测，以Typer                    脑胶质瘤各 1 例；患儿就诊时的年龄为 2（2，6）岁，MTX
                                                                                       2
          4.0 软件检测质谱峰，根据质谱峰图判读各样本目标位                          的剂量为4.63（4.37，4.87）g/m 。
          点的基因型。                                              3.2 MTRR rs10380 C＞＞T基因型在颅内肿瘤患儿中的
          2.3 指标观察                                            分布
          2.3.1 MTX血药浓度指标                                         在 75 例颅内肿瘤患儿中，野生 CC 和变异 CT 基因
              本研究以MTX血药浓度和剂量之间的比值（concen-                     型的分布频率分别为62.67%和37.33%，C和T等位基因
          tration-to-dose ratios，C/D 比值）考察 MTRR rs10380 C＞    的分布频率分别为 81.33% 和 18.67%，均符合 Hardy-
          T 基因型对 MTX 血药浓度的影响。C/D 比值＝给药后                       Weinberg平衡（P＞0.05），具有群体代表性。
          24 h或42 h测定的MTX血药浓度/MTX给药剂量。                        3.3 C/D比值
          2.3.2 MTX不良反应判定                                         CC基因型患儿的24 h和42 h C/D比值均高于CT基
              本研究 MTX 不良反应包括在 MTX 化疗周期内观                      因型患儿，但差异均无统计学意义（P＞0.05）。结果见表1。
          察到的血液学、肝、电解质、心脏、呼吸、皮肤和黏膜、凝                          表1 MTRR rs10380基因型对颅内肿瘤患儿MTX C/D
                                                                                                2
          血等方面的不良反应，依据常见药物不良反应术语评定                                 比值的影响[M（P25，P75 ），（μmol·m）/（L·g）]
                   [9]
          标准5.0版 进行不良反应判定。计算MTX不良反应发                          基因型      患儿例数        24 h C/D比值      42 h C/D比值
                                                              CC        47        25.28（20.37，28.84）  0.14（0.10，0.19）
          生率，不良反应发生率（%）＝发生不良反应例数/总例                           CT        28        22.72（17.38，32.36）  0.13（0.10，0.17）
          数×100%。                                             P                      0.76            0.83
          2.3.3 预后指标                                          3.4 不良反应发生率
              本研究分析的预后指标包括随访期内颅内肿瘤患                               CC 基因型患儿的电解质紊乱发生率显著高于 CT
          儿的复发率和转移率。复发率（%）＝随访期内复发例                            基因型患儿（P＜0.05）。CC 基因型患儿中黏膜炎、呼吸
          数/总例数×100%；转移率（%）＝随访期内发生转移例                         系统反应、白细胞减少症的发生率低于CT基因型患儿，
          数/总例数×100%。                                         肝功能损害、胃肠道反应、骨髓抑制、贫血和血小板减少
          2.4 生物信息学分析                                         症的发生率高于 CT 基因型患儿，但以上不良反应发生
                                                      [10]
              采 用 3DSNP  v2.0（https：//omic. tech/3dsnpv2/） 和  率差异均无统计学意义（P＞0.05）。结果见表2。
          HaploReg  v4.2（https：//pubs. broadinstitute. org/mammals/  表2 MTRR rs10380基因型对颅内肿瘤患儿MTX不良
                             [11]
          haploreg/haploreg.php） 数据库对 rs10380 进行功能注                反应的影响[例数（%%）]
          释，采用 GTEx 数据库（https：//www.gtexportal.org/home/      不良反应            CC（n＝47）    CT（n＝28）     P
          index.html）对rs10380进行表达数量性状基因座分析，采                  黏膜炎             19（40.43）   12（42.86）    0.84
                                                              肝功能损害           27（57.45）   10（35.71）    0.07
          用STRING数据库（https：//cn.string-db.org/）对MTRR进
                                                              电解质紊乱           24（51.06）    7（25.00）    0.03
          行蛋白互作网络分析，对MTRR相互作用蛋白进行基因                           胃肠道反应           26（55.32）   12（42.86）    0.30
          本体（gene ontology，GO）功能富集分析和京都基因与基                   呼吸系统反应          12（25.53）   13（46.43）    0.07
                                                              骨髓抑制            24（51.06）   14（50.00）    0.93
          因 组 百 科 全 书（Kyoto  encyclopedia  of  genes  and  ge‐
                                                              白细胞减少症          40（85.11）   25（89.29）    0.61
          nomes，KEGG）通路富集分析。                                  贫血              36（76.60）   21（75.00）    0.88
          2.5 统计学处理                                           血小板减少症          19（40.43）    8（28.57）    0.30
              采用 GraphPad Prism 9.0 软件进行统计分析，统计               3.5 转移率和复发率
          分析均基于双尾，检验水准α＝0.05。年龄、剂量、C/D比                           共34例患儿伴有转移，其中CC基因型27例、CT基
          值等计量资料不满足正态分布，以中位数（四分位间距）                           因型 7 例，CC 基因型患儿的转移率显著高于 CT 基因型
          [M（P25，P75 ）]表示；计数资料以例数或率（%）表示。采用                   患儿（P＜0.05）。共15例患儿在随访期内复发，其中CC
           2
          χ 检验或 Fisher’s 精确检验分析 MTRR rs10380 C＞T 基            基因型9例、CT基因型6例，CC基因型患儿的复发率低
          因多态性分布是否符合 Hardy-Weinberg 平衡以及不同                    于CT基因型患儿，但差异无统计学意义（P＞0.05）。结
          基因型间的颅内肿瘤复发率、转移率、MTX不良反应发                           果见表3。


          · 2648 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 21                            中国药房  2024年第35卷第21期
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