Page 53 - 《中国药房》2024年19期

对25种祁菊花干燥样品的外观性状进行评价，结果 2.3.2 供试品溶液的制备
如下：样品S1的花瓣皱缩，易掉落；R1～R6的花瓣湿软， 将祁菊花药材粉碎，过一号筛。精密称取上述粉末
花朵形态差；R7的花瓣皱缩；R8、R9的花瓣皱缩、轻微发 2.0 g，置于 50 mL 锥形瓶中，加入 70% 甲醇 25 mL，称定
黄；B1～B3 的花瓣皱缩、部分发黄；W1～W3 的花瓣轻 质量，超声（功率 40 W，频率 40 kHz，下同）提取 40 min，
微发黄、平整度高、质地较脆；ZS1发生褐变，ZS2、ZS3的 冷却至室温；再次称定质量，用 70% 甲醇补足减失的质
花瓣轻微粘连；WS1～WS3的花瓣轻微发黄、平整度高； 量，摇匀，取上清液过0.45 μm微孔滤膜，即得。
RS1～RS3 的花瓣湿软，花朵形态差。根据上述结果可 2.3.3 色谱条件与系统适用性实验
知，样品 ZS1 发生褐变；R1～R6、RS1～RS3 水分含量疑 色 谱 柱 为 Sharpsil-AR ODS（250 mm×4.6 mm，5
超标，且外观性状较差。因此，以上样品对应的10种干 μm）柱，以0.1%磷酸溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯
燥方法应被淘汰，其余样品外观性状均合格。 度洗脱（0～5 min，85%A→80%A；5～7 min，80%A；7～
2.2 祁菊花水分测定
22 min，80%A→70%A；22～30 min，70%A→65%A；
按照 2020 年版《中国药典》（四部）通则“0832 第二
30～34 min，65%A；34～40 min，65%A→60%A；40～45
[9]
法”测定各干燥样品的水分。每种样品测定3次，取平
min，60%A→40%A；45～50 min，40%A→85%A；50～60
均值，结果详见表 2。结果显示，样品 R1～R6、ZS1 及
min，85%A）；流速为0.8 mL/min；检测波长为327 nm；柱
RS1～RS3的水分含量不合格，后续储存易霉变，对应的
温为25 ℃；进样量为10 μL。取“2.3.1”项下混合对照品
10 种干燥方法应被淘汰，其余样品水分测定均合格（满
溶液、“2.3.2”项下供试品溶液和阴性对照溶液（70% 甲
足药典中水分不得超过15.0%的要求）。结合“2.1”项下
醇），按上述色谱条件进样测定。结果显示，各待测成分
结果，本研究选择除样品 R1～R6、ZS1 及 RS1～RS3 外
色谱峰与相邻色谱峰间的分离度均大于 1.5，理论板数
的15种样品进行后续研究。
按 3，5-O-咖啡酰基奎宁酸峰计不低于 8 000，且阴性对
表2 25个祁菊花样品的水分测定结果（n＝3，%%）
照对测定无干扰。色谱图见图1。
样品编号 水分含量 样品编号 水分含量
120 1 200
S1 7.65 W1 11.05 3 3
100 1 000
R1 75.21 W2 11.33
R2 72.84 W3 10.93 80 1 2 5 800
R3 71.81 ZS1 15.25 mAU 60 4 mAU 600
40 6 400 1 2
R4 68.84 ZS2 14.86
20 200 4
R5 67.93 ZS3 14.49 56
R6 58.24 WS1 3.17 0 0
0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60
R7 14.71 WS2 2.93 t/min t/min
R8 13.46 WS3 2.90 A.混合对照品溶液 B.供试品溶液
R9 13.11 RS1 59.10
120
B1 14.51 RS2 49.52 100
B2 14.22 RS3 45.95 80
B3 13.89
mAU 60
40
2.3 祁菊花有效成分含量测定及多元统计分析
20
采用HPLC法测定。按照2020年版《中国药典》（一 0
部）规定，选择绿原酸、木犀草苷、3，5-O-咖啡酰基奎宁 0 10 20 30 40 50 60
t/min
酸作为祁菊花质量评价的决定性成分，按干燥品计算， C.阴性对照溶液
三者含量分别不得少于 0.20%、0.08%、0.70%。查阅相 1：绿原酸；2：木犀草苷；3：黄芩苷；4：3，5-O-咖啡酰基奎宁酸；5：
槲皮素；6：木犀草素。
[10]
[11]
关文献后，另外再选择槲皮素 、木犀草素 、黄芩苷 [12]
图1 各溶液的HPLC图
作为有效成分评价指标。
2.3.1 混合对照品溶液的制备 2.3.4 方法学考察
精密称取 6 种对照品，用 70% 甲醇配制成绿原酸、 （1）线性关系考察。取适量“2.3.1”项下混合对照品
木犀草苷、黄芩苷、3，5-O-咖啡酰基奎宁酸、槲皮素、木 溶液，分别稀释 1、2、4、8、16 倍，制成 5 个系列质量浓度
犀草素质量浓度分别为 0.106 04、0.102 48、0.100 08、 的线性工作液。取上述线性工作液，按“2.3.3”项下色谱
0.110 40、0.112 40、0.099 64 mg/mL 的单一对照品溶液。 条件进样测定，以峰面积（x）为横坐标、质量浓度（y）为
吸取上述6种单一对照品溶液各200 μL，制成上述成分 纵坐标拟合标准曲线方程。结果显示，各待测成分在各
2
质量浓度分别为 0.017 67、0.017 08、0.016 68、0.018 40、 自进样质量浓度范围内线性关系均良好，R 均不低于
0.018 73、0.016 61 mg/mL的混合对照品溶液。 0.999。结果见表3。

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