Page 48 - 《中国药房》2024年19期

续表1
序号 加合离子种类 保留时间/min 质量偏差/ppm 碎片离子（m/z） 分子式 来源 鉴定成分
Y14 [M+H] + 8.381 －1.0 201.090 6、187.074 6、145.101 0、119.086 2 C 14H 12O 3 三七姜醇提物、尿液 白藜芦醇（resveratrol）
Y15 [M+H] + 8.754 －1.1 253.084 4、243.066 3、215.069 9、153.070 4 C 15H 10O 5 三七姜醇提物、尿液、血清 染料木素（genistein）
Y16 [M－H] － 9.684 －2.7 232.110 5、217.086 5 C 15H 20O 3 三七姜醇提物、粪便 白术内酯Ⅲ（atractylenolide Ⅲ）
Y17 [M+H] + 10.083 －1.8 121.064 1、95.049 1、67.054 9 C 9H 8O 3 三七姜醇提物、尿液、粪便、血清 对香豆酸（p-coumaric acid）
Y18 [M+H] + 10.688 －2.3 259.097 0、177.093 2、137.059 7 C 17H 24O 3 三七姜醇提物、粪便、血清 6-姜烯酚（6-shogaol）
Y19 [M+H] + 10.757 －1.8 317.209 5、299.233 6 C 20H 30O 4 三七姜醇提物、粪便 14-去氧穿心莲内酯（14-deoxyandrographolide）
Y20 [M－H] － 10.954 －1.6 483.314 6、457.330 5、439.317 4、421.313 8、413.221 4 C 30H 46O 6 三七姜醇提物、粪便 苜蓿酸（medicagenic acid）
Y21 [M+H] + 11.458 2.4 219.174 9、201.163 5、81.070 4、69.070 4、67.055 0 C 15H 24O 2 三七姜醇提物、粪便、血清 莪术二酮（curdione）
M1 [M－H] － 8.358 －2.0 268.037 9、239.034 7、212.045 7 C 16H 12O 5 尿液、血清 汉黄芩苷水解产物（汉黄芩素）
M2 [M－H] － 8.759 1.0 251.043 9、241.051 5、223.048 4、195.050 7 C 15H 10O 5 尿液 汉黄芩素去甲基化产物
M3 [M－H] － 6.904 －0.3 269.043 8 C 21H 18O 11 尿液 汉黄芩素去甲基后葡萄糖醛酸化产物
注：“序号”下的Y表示原型成分，M表示代谢物。
3.2 血清差异代谢物的筛选结果
15 M C M C
根据 PCA 得分图（图 3）可知，所有 QC 样本聚在一 10 20
起，说明样本及分析过程中仪器的稳定性良好、模型可 （ 9.5% ） 5 （ 24.1% ） 10
靠，所得差异代谢物能够反映样本之间的生物学差异； 0 0
给药组和空白组的血清样本之间表现出明显的分离现 Component2 －5 Component2 －10
象。PLS-DA结果（图4）显示，2组样本之间的差异十分 －10
－20
2
明显，并且PLS-DA模型在正离子模式下的R（表示模型 －15
的解释率，数值越接近 1 表示模型的差异性越大）为 －10 －5 0 5 10 15 －10 －5 0 5 10
Component1（59.7%） Component1（47.7%）
2
0.999 5、Q（表示模型的预测能力，数值越接近 1 表示模 A.正离子模式 B.负离子模式
型的可靠性越强）为 0.982 7，在负离子模式下的 R ＝ M：给药组；C：空白组。
2
图 4 2组血清样品在正、负离子模式下的PLS-DA得分图
2
0.997 9、Q ＝0.925 4，均接近1，表明该模型在正、负离子
模式下均展现出了良好的解释率和预测能力。根据VIP 磺酸代谢，α-亚麻酸代谢，花生四烯酸代谢，丙氨酸、天
值＞1及P＜0.05的标准，共筛选出2组大鼠血清样本中 冬氨酸和谷氨酸代谢，半胱氨酸和蛋氨酸代谢，色氨酸
71 个差异代谢物（正、负离子模式下分别筛选出 39、32 代谢等11条通路上。
个）。其中，与空白组相比，给药组中阿魏酸、甘草素、异嗪 3.0
苯丙氨酸代谢
皮啶和刺芒柄花素等44个差异代谢物的水平上调，花生四
2.5
烯酸和苯乙酰谷氨酰胺等27个差异代谢物的水平下调。
2.0
10
C C
M M
QC QC
10
5 －log 10 P 1.5 苯丙氨酸、酪氨酸和
5 （ 27.8% ） 0 1.0 核黄素代谢 色氨酸的生物合成
（ 32.3% ） 0 PC2 －5 丙氨酸、天冬氨 D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢
酸和谷氨酸代谢
PC2 －10 0.5 色氨酸代谢
－5 α-亚麻酸代谢
0 半胱氨酸和 花生四烯酸代谢
蛋氨酸代谢
－15 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
－10
－10 －5 0 5 10 15 －10 －5 0 5 10 15 pathway impact
PC1（49.6%） PC1（43.6%） A.正离子模式
A.正离子模式 B.负离子模式
M：给药组；C：空白组。
2.0
图3 各样本在正、负离子模式下的PCA得分图
3.3 血清差异代谢物的代谢通路分析结果 1.5 丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢
将“3.2”项下鉴定得到的差异代谢物导入 Metabo‐
Analyst 5.0软件，在通路富集分析和拓扑分析的基础上， －log 10 P 1.0
得到代谢通路富集图（图 5）。pathway impact 的大小能 D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢
0.5
够反映代谢通路的重要程度，－log10P 值被用于评估代 牛磺酸和次牛磺酸代谢 亚油酸代谢
谢通路富集分析的显著性。以 pathway impact＞0.2 为
0 花生四烯酸代谢
筛选标准，发现差异代谢物主要富集在苯丙氨酸、酪氨 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
pathway impact
酸和色氨酸的生物合成，亚油酸代谢，苯丙氨酸代谢，核 B.负离子模式
黄素代谢，D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢，牛磺酸和次牛 图5 血清差异代谢物的代谢通路富集图

· 2362 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 19 中国药房 2024年第35卷第19期