Page 45 - 《中国药房》2024年19期

differential metabolites， such as arachidonic acid， phenylacetylglutamine， were down-regulated. The 71 differential metabolites
were mainly enriched in 11 metabolic pathways， including phenylalanine metabolism， linoleic acid metabolism， arachidonic acid
metabolism， and tryptophan metabolism. CONCLUSIONS Ferulic acid， liquiritigenin， isofraxidin and formononetin may be the
material basis that directly exert pharmacological effects of S. involucratus. S. involucratus may exert anti-inflammatory effects by
affecting metabolic pathways， including arachidonic acid metabolism and tryptophan metabolism.
KEYWORDS Stahlianthus involucratus； chemical constituents； pharmacodynamic substances； internal metabolism； inflammation；
UPLC-Q-Exactive-MS technology

广西民间传统的壮药三七姜收载于《广西壮族自治 RP220610、RP210525、RP190405，纯度均大于98%）均购
区壮药质量标准》（第二卷），为姜科植物姜叶三七Stah- 自成都麦德生科技有限公司；甲醇和乙腈（质谱级）购自
lianthus involucratus（King ex Baker） Craib ex Loes. 的干 美国Merck公司；甲酸（色谱级）购自上海安谱实验科技
[1]
燥根茎和块根 ，又称姜田七、姜三七、竹叶三七等，多见 股份有限公司；甲酸铵（色谱级）购自美国Sigma公司；2-
[2]
于广西、广东、福建、云南等省份 。其性温、味辛，具有 氯苯丙氨酸（分析纯）购自上海源叶生物科技有限公司。
化瘀、镇痛、止血等功效，多用于活血散瘀、消肿止痛、跌 1.3 动物
打损伤、风湿骨痛、吐血衄血、月经过多、虫蛇咬伤、外伤 本研究所用动物为雄性清洁级健康 SD 大鼠，共 24
[1]
出血等的治疗 。 只，体重（220±20） g，购自湖南斯莱克景达实验动物有
研究发现，三七姜含有酚类、挥发油类、黄酮类和有 限公司，动物生产许可证号为SCXK（湘）2019-0004。本
机酸类等化学成分 [3―5] ，具有镇痛、抗炎、抗肿瘤和抗氧 研究涉及的动物实验方案已获广西中医药大学实验动
化等药理作用 [4―8] 。但目前有关其体内代谢的相关研究 物福利伦理委员会批准，批准编号为DW20230302-015。
较少，其药效成分、作用靶点及作用机制尚未明确。中 2 方法
药化学成分复杂，各化学成分性质不一，而超高效液相 2.1 三七姜醇提物的制备
色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱（UPLC-Q- 称取三七姜药材适量，粉碎成粗粉，加入 8 倍量的
Exactive-MS）技术因具有高灵敏度、高选择性和高分辨 80% 乙醇溶液，加热回流提取 3 次，每次 2 h；过滤，合并
率的特点，被广泛应用于天然产物成分分析、蛋白质组 滤液，60 ℃减压回收乙醇，浓缩，得三七姜醇提物浸膏
学和代谢物研究。因此，本研究利用 UPLC-Q-Exactive- （得率7.0%）。
MS技术对三七姜醇提物、入血成分和代谢物进行分析， 2.2 动物分组与给药
并推测其可能的代谢通路，以期为三七姜的药效物质基 将24只雄性SD大鼠随机分为空白组（n＝12）、给药
础研究提供理论支持。 组（n＝12）。实验前，所有大鼠均于 SPF 级屏障环境中
1 材料 适应性喂养7 d，其间自由摄食、饮水。给药前禁食12 h
1.1 主要仪器 （自由饮水），给药组大鼠按以生药量计为 15.75 g/kg 的
本研究所用的主要仪器有：Ultimate 3000 型 UPLC 剂量（人用剂量的10倍）灌胃三七姜醇提物药液；空白组
仪、Q-Exactive 型高分辨质谱仪（美国 Thermo Fisher 大鼠灌胃等体积纯化水。每天灌胃药液/纯化水2次，每
Scientific 公司）、XW-80A 型涡旋仪（上海沪西分析仪器 次灌胃间隔6～8 h，连续3 d。
厂有限公司）、5415R型低温高速离心机（艾本德中国有 2.3 生物样品的收集与处理
限公司）、NDK200-2N 型氮吹仪（杭州米欧仪器有限公 末次给药后 1 h，取给药组大鼠 6 只，用戊巴比妥钠
司）、Milli-Q Gradient A10型超纯水纯化系统（美国Milli‐ 麻醉后行腹主动脉采血，于4 ℃下以3 000 r/min离心20
pore公司）。 min，取上清液，得血清样品。将给药组剩余的6只大鼠
1.2 主要药品与试剂 置于代谢笼中，收集其12 h内的尿液和粪便。将收集的
三七姜药材于2023年2月采自广西南宁，经广西中 尿液以3 500 r/min离心10 min，取上清液，得尿液样品；
医药大学药学院滕建北教授鉴定为姜科植物姜叶三七 将收集的粪便于50 ℃烘干，碾碎，得粪便样品。空白组
S. involucratus（King ex Baker） Craib ex Loes. 的干燥根 大鼠同法收集血清、尿液及粪便样品。以上样品均置
茎和块根。对照品汉黄芩苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、 于－80 ℃冰箱中保存。
柚皮素、柠檬酸、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、阿魏酸、咖啡 2.4 供试液和对照品溶液的制备
酸、尿苷、莪术二酮（批号分别为 RP221114、RP221223、 2.4.1 血清样品供试液的制备
RP220113、RP220527、RP220605、RP210609、RP210730、 常温下解冻血清样本后，取 100 μL 于 2 mL 离心管

中国药房 2024年第35卷第19期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 19 · 2359 ·