Page 39 - 《中国药房》2024年19期
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significantly （P＜0.05）.  Compared  with  the  model  group，  the  pathological  damages  of  the  liver  and  the  spleen  tissues  in  mice
          alleviated  in  BCP  high-dose  and  low-dose  groups，  and  most  of  liver  and  spleen  indexes，  the  above  indexes  of  serum  and  liver
          tissue were reversed significantly （P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS  BCP has a protective effect on ALI， the mechanism of
          which may be related to the inhibition of TLR4/NF-κB signaling pathway and the activation of the Nrf2/HO-1 signaling pathway.
          KEYWORDS    Bupleurum  chinense  polysaccharides；  acute  liver  injury；  TLR4/NF- κB  signaling  pathway；  Nrf2/HO-1  signaling
          pathway



              急性肝损伤（acute liver injury，ALI）是一种常见的            限公司；肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-
          全球性肝脏疾病，多与病毒感染、过度饮酒、自身免疫性                          α）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）、IL-1β的酶联免疫
                                    [1]
          疾病以及某些药物的滥用有关 ，其特征为转氨酶和免                           吸附测定（ELISA）试剂盒（批号分别为 RX202412M、
          疫球蛋白 G 水平显著升高、血清自身抗体阳性、浆细胞                         RX203063M、RX203049M）均购自泉州市睿信生物科技
                [2]
          浸润等 。ALI发病机制复杂，而治疗ALI的临床药物十                        有限公司；丙氨酸转氨酶（alanine transaminase，ALT）、天
          分匮乏。因此，开发有效、安全的保肝药物具有重要的                           冬氨酸转氨酶（aspartate transaminase，AST）、乳酸脱氢
          意义和价值。                                             酶（lactate dehydrogenase，LDH）、超氧化物歧化酶（su‐
              中药治疗疾病具有多靶点、多途径的特点，在治疗                         peroxide  dismutase，SOD）、丙 二 醛（malondialdehyde，
          肝脏疾病方面显示出独特的优势。柴胡为伞形科植物                            MDA）试剂盒（批号分别为C009-2-1、C010-2-1、A020-2-2、
          柴胡 Bupleurum chinense DC. 或狭叶柴胡 B. scorzoneri‐     A001-3-2、A003-1-2）均购自南京建成生物工程研究所有
          folium Willd. 的干燥根，具有疏散退热、疏肝解郁、升举                  限公司；苏木精-伊红（HE）染液（批号 G1101）购于武汉
                    [3]
          阳气的功效 。柴胡含有皂苷、黄酮、多糖及挥发油等化
                                                             塞维尔生物科技有限公司；兔源 Nrf2、HO-1 抗体（批号
                                                  [4]
          学成分，其中多糖是柴胡的主要活性成分之一 。相关
                                                             分别为AF0639、AF5393）均购自江苏亲科生物研究中心
          研究发现，柴胡多糖对肝损伤小鼠具有一定的保护作
                                                             有限公司；兔源TLR4、NF-κB、β-肌动蛋白（β-actin）抗体
            [5]
          用 ，但具体作用机制尚不明确。Toll样受体4（Toll-like
                                                             和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白G（批号
          receptor 4，TLR4）/核因子 κB（nuclear factor-κB，NF-κB）
                                                             分别为 AF1234、AF8187、AF5003、AF0246）均购自上海
          是机体重要的炎症通路，可调节肝细胞的生长、凋亡和
                                                             碧云天生物技术有限公司。
          炎症反应，进而缓解肝组织病理损伤 。研究显示，氧化
                                         [6]
                                                             1.3 实验动物
          应激反应与肝损伤密切相关，核转录因子红系2相关因
                                                                 本研究所用动物为 SPF 级雄性 BALB/c 小鼠，共 40
          子 2（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）/血
                                                             只，体重20～22 g，购于广东省医学实验动物中心，动物
          红素加氧酶 1（heme oxygenase-1，HO-1）是调控氧化应
                                                             生产许可证号为 SCXK（粤）2018-0002。所有动物均饲
                                    [7]
          激进而缓解肝损伤的重要通路 。鉴于此，本研究基于
                                                             养于温度 25 ℃、相对湿度（50±10）%的环境中，自由饮
          上述两条信号通路，探讨柴胡多糖对ALI小鼠的保护作
                                                             水进食，经适应性饲养 7 d 后进行实验。本研究动物实
          用及机制，以期为柴胡多糖的临床应用提供参考。
                                                             验在广东省医学实验动物中心完成，且经该单位动物伦
          1 材料
                                                             理委员会审查批准，伦理审批号为C202301-1。
          1.1 主要仪器
                                                             2 方法
              本研究所用主要仪器有 SCIENTZ-48L 型冷冻型高
                                                             2.1 动物分组、造模与给药
          通量组织研磨器（宁波新芝生物科技有限公司）、MX-F
          型涡旋器（美国Scilogex公司）、H1750R型台式高速冷冻                       将小鼠按体重随机分为正常组、模型组、阳性对照
          离心机（湖南湘仪实验室仪器开发有限公司）、Epoch 2                       组、柴胡多糖低剂量组、柴胡多糖高剂量组，每组 8 只。
          型酶标仪（美国 BioTek 公司）、DYY-6C 型电泳仪（北京                  根据前期预实验结果和相关文献确定给药剂量，柴胡多
          六一生物科技有限公司）、QuickChemi 5200型化学发光                   糖高剂量组和柴胡多糖低剂量组小鼠分别灌胃 400、
          成像系统[莫纳（苏州）生物科技有限公司]等。                             100 mg/kg柴胡多糖    [5，8] ；阳性对照组小鼠灌胃550 mg/kg
          1.2 主要药品与试剂                                        护肝片（根据临床等效剂量换算而得）；正常组和模型组
              柴胡多糖由本课题组自制（得率为 5.35%），其中总                     小鼠灌胃等体积纯水。各组小鼠每天灌胃给药1次，连
          糖含量为（58.01±1.65）%、醛酸含量为（30.62±0.89）%、              续 7 d。末次给药 1 h 后，除正常组外，其余各组小鼠均
          蛋 白 质 含 量 为（3.95±0.50）% 。 刀 豆 蛋 白 A（批 号            尾静脉注射刀豆蛋白A溶液（20 mg/kg，临用时以生理盐
                                                                                 [9]
          C2010）购 自 美 国 Sigma Aldrich 公 司 ；护 肝 片（批 号         水溶解）建立 ALI 模型 ，正常组小鼠注射等体积生理
          Z44021877，规格0.35 g/片）购自广东省惠州市中药厂有                  盐水。


          中国药房  2024年第35卷第19期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 19    · 2353 ·
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