Page 65 - 《中国药房》2024年15期
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表2 各组细胞中ROS水平和SOD、CAT活性检测结果 3.2.2 沉默 Nrf2 后 Thp 对 PDGF-BB 诱导的 VSMCs 氧
(x±s,n=5) 化应激的影响
组别 ROS SOD/(U/mg) CAT/(U/mg) 与 PDGF-BB+NC-siNrf2 组比较,PDGF-BB+siNrf2
对照组 1.01±0.08 6 523.23±389.42 106.28±5.89 组、PDGF-BB+Thp+siNrf2 组 VSMCs 中 ROS 水平显著
PDGF-BB组 3.11±0.07 a 2 849.31±301.77 a 49.22±5.14 a 升高(P<0.01),SOD、CAT 活性均显著降低(P<0.01);
Thp低浓度组 2.25±0.05 b 3 351.94±335.55 b 61.27±5.69 b
Thp中浓度组 1.78±0.09 b 4 231.75±348.42 b 73.66±6.17 b 与 PDGF-BB+Thp+NC-siNrf2 组比较,PDGF-BB+siNrf2
Thp高浓度组 1.34±0.08 b 5 425.59±394.37 b 88.41±5.88 b 组、PDGF-BB+Thp+siNrf2 组 VSMCs 中 ROS 水平显著
a:与对照组比较,P<0.01;b:与PDGF-BB组比较,P<0.01。
升高(P<0.01),SOD、CAT 活性均显著降低(P<0.01)。
结果见表5。
Nrf2 68 kDa
3.2.3 沉默siNrf2后Thp对PDGF-BB诱导的VSMCs中
HO-1 28 kDa Nrf2、HO-1蛋白表达的影响
与 PDGF-BB+NC-siNrf2 组比较,PDGF-BB+siNrf2
β-actin 42 kDa
组、PDGF-BB+Thp+siNrf2 组 VSMCs 中 Nrf2、HO-1 蛋白
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 的相对表达量均显著降低(P<0.01);与 PDGF-BB+
Ⅰ:对照组;Ⅱ:PDGF-BB 组;Ⅲ:Thp 低浓度组;Ⅳ:Thp 中浓度
Thp+NC-siNrf2 组 比 较 ,PDGF-BB+siNrf2 组 、PDGF-
组;Ⅴ:Thp高浓度组。
BB+Thp+siNrf2 组 VSMCs 中 Nrf2、HO-1 蛋白的相对表
图3 各组细胞中Nrf2、HO-1蛋白表达的电泳图
达量均显著降低(P<0.01)。结果见图6、表6。
表3 各组细胞中Nrf2、HO-1蛋白的相对表达量测定结 4 讨论
果(x±s,n=5) PCI术后血管再狭窄的发生是局部血管损伤后的一
组别 Nrf2/β-actin HO-1/β-actin 种修复反应过程,其作用机制主要包括血管弹性回缩、
对照组 1.02±0.08 0.79±0.08 血管重塑、血栓形成、血小板沉积以及 VSMCs 过度增
PDGF-BB组 0.59±0.07 a 0.31±0.07 a
Thp低浓度组 0.71±0.05 b 0.43±0.05 b 殖、迁移等,其中VSMCs过度增殖和迁移在血管再狭窄
Thp中浓度组 0.89±0.09 b 0.59±0.09 b 发生的过程中占据主导地位 。本研究使用 PDGF-BB
[11]
Thp高浓度组 0.98±0.08 b 0.68±0.08 b
处理 VSMCs,观察 VSMCs 的增殖、迁移情况,结果发
a:与对照组比较,P<0.01;b:与PDGF-BB组比较,P<0.01。
现,经 PDGF-BB 处理的 VSMCs 的增殖、迁移能力显著
DAPI
EDU
Merge
PDGF-BB+NC-siNrf2组 PDGF-BB+Thp+NC-siNrf2组 PDGF-BB+siNrf2组 PDGF-BB+Thp+siNrf2组
图4 沉默Nrf2后各组细胞的EdU染色结果
中国药房 2024年第35卷第15期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 15 · 1859 ·