Page 10 - 《中国药房》2024年14期
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3.1.3 脑脊液样本                                         放入无菌采样管内，标记条码后立即送检。
              脑脊液是诊断中枢神经系统感染最主要的样本。                           3.1.9 菌液样本
          对采集部位皮肤消毒后，通常在第 3、4 腰椎或第 4、5 腰                          用于靶向WGS的菌液样本，通常需要培养获得，因
          椎间隙插入带有管芯针的空针，进针至蛛网膜间隙，拔                            此需要测试合适的分离纯化及培养条件，从临床样本中
          去管芯针，收集脑脊液。为防止污染，建议取第二管以                            得到纯培养物；用于非靶向PCR-Free WGS的菌液样本，
          后的脑脊液，约3～5 mL，标记条码后立即送检。                            应保证采集的样本所提取的核酸＞1 μg，菌液采集后置
          3.1.4 胸腔积液、腹水、关节积液和尿液样本                             于5 mL无菌管中，标记条码后立即送检。
             （1）胸腔积液/腹水/关节积液一般由临床医师经皮                         3.2 样本运输及保存
          穿刺或外科方式获得。通过影像学、超声等技术定位穿                               （1）样本应根据实际送检情况选择合适的运输方
          刺部位后，消毒穿刺部位皮肤，麻醉穿刺部位，用中空孔                           式：若样本可在 24 h 内送达实验室并开始检测，可考虑
          针穿刺至目标部位，抽取胸腔积液/腹水/关节积液样本                           用冰袋低温运输；若运输时间在 24～72 h 内，应使用干
          5 mL于无菌管中，标记条码后立即送检。                                冰运输，送达实验室后应立即进行样本前处理和核酸提
             （2）尿液一般由受检者自行采集。受检者清晨采集                          取，以防止核酸降解影响检测效果              [16―17] 。运输过程中应
          中段尿样本 5 mL 于无菌采样管中，标记条码后立即                          尽量避免剧烈颠簸，以规避漏液导致的污染风险。若怀
          送检。
                                                              疑高致病性或新发突发传染病，运输中应严格按照《传
          3.1.5 脓肿样本
                                                              染病防治法（2013修正）》等相关法规要求及实验室安全
              对于开放性脓腔，先用无菌生理盐水清洁创面，再                                  [18]
                                                              管理要求 进行包装及转运。若外送至第三方测序公
          用拭子采集深部伤口或溃疡基底部的分泌物，或剪取深
                                                              司测序，应尽可能在生物安全防护条件下抽提核酸，然
          部病损边缘的组织；对于封闭的脓肿，先对病灶局部的
                                                              后用干冰运输。
          皮肤或黏膜表面彻底消毒，再用注射器抽取脓液3 mL，
                                                                 （2）样本采集完成后应立即送检，若无法立即送检，
          或将脓肿切开引流后，取脓肿壁的一部分送检；对于瘘
                                                              可暂存于4 ℃的环境中（不超过7 h），且需当天送检；若
          管或窦道脓肿，最好在外科探查时采集最深处组织。样
                                                              短期内不送检，样本应立即置于－20 ℃以下冰箱暂存
          本采集完放入无菌采样管内，标记条码后立即送检。
                                                             （不得超过7 d）；长期保存应立即置于－80 ℃冰箱保存。
          3.1.6 深部组织样本
                                                              RNA 测序样本应直接置于－80 ℃冰箱保存                [16―17] 。保存
              深部组织样本一般在手术探查时才可获得，应采集
                                                              过程中应尽量避免反复冻融（一般不超过3次）。
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          足够量的组织样本，一般以≥5 mm 为宜，至少绿豆大
                                                              4 检测过程
          小。小块组织宜用1～2 mL无菌水或生理盐水保湿，大
                                                              4.1 样本前处理
          块组织应剪碎后取适量分装到无菌采样管内，标记条码
                                                                  按照前述各个样本的相应要求进行样本的采集及
          后立即送检。
                                                              运输保存，防止污染和核酸降解，并及时做好样本初始
          3.1.7 房水/玻璃体液样本
                                                              状态的记录。
              房水/玻璃体液样本的采集一般由培训过的眼科医
                                                                  各实验室应建立样本前处理的标准操作流程，包括
          师在手术室内完成。房水样本，需麻醉患者并进行常规
          结膜囊清洁后，用1 mL无菌注射器，于角巩膜缘平行虹                          样本液化、样本浓缩及去除宿主等前处理方法。对于不
          膜平面穿刺入前房，抽取房水约0.1 mL；玻璃体液样本，                        同类型的临床样本，应建立针对性的前处理程序。例
          则于角巩膜缘后平坦部垂直巩膜向眼球中心方向穿刺                             如，对于痰液等黏性较高的样本，需进行液化处理，且各
          入玻璃体腔 10 mm，抽取尽可能多的玻璃体样品（不少                         实验室应针对液化过程建立样本黏稠程度分级、液化液
          于 0.2 mL）。样本采集完放入无菌采样管内，标记条码                        使用体积、液化时间等标准化程序，以保证微生物核酸
          后立即送检。                                              的完整性；对于血液样本，需根据实际检测需求决定是
          3.1.8 粪便样本                                          否离心进行血浆分离；对于组织样本，为提高核酸提取
                                                                                            [7]
              粪便样本一般由受检者自行采集，通常根据项目检                          效率，需先将其切碎后再进行操作 。样本提取前是否
          测需求选择自然排便法或直肠拭子法。自然排便法采                             需要去除宿主细胞或核酸，应结合样本类型及应用方向
          集时需注意：应弃去前段容易污染的部分，选择中段粪                            综合考虑。例如，tNGS 可靶向捕获特异性病原微生物
          便0.5～1 g（约黄豆粒大小）；直肠拭子法采集时需注意：                       的核酸，人源核酸对检测结果的干扰较小；而对于
          先用肥皂水将肛门周围洗净，将沾有无菌生理盐水的棉                            mNGS 而言，如果样本中宿主细胞含量较高，在测序数
          拭子插入肛门4～5 cm（儿童为2～3 cm），将棉拭子与直                      据量恒定的条件下，会导致病原微生物检测的灵敏度降
          肠黏膜表面接触，轻轻旋转拭子，拭子上可明显见到粪                            低，因此，高宿主背景样本提取前可考虑采用经过验证
                                                                                      [6]
          便即可，最好采集2个或以上拭子。样本采集完，将拭子                           的方法去除宿主细胞或核酸 。

          · 1676 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 14                            中国药房  2024年第35卷第14期
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