Page 30 - 《中国药房》2024年13期

YAP、Bcl-2 蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）。结果 氧化应激反应，恢复肠道稳态，调节肠道屏障，对急性胰
见图4、表3。 腺炎具有一定的治疗作用。然而，FMN对IBD的影响研
究还鲜有报道。本研究采用低、高剂量 FMN 干预 IBD
YAP 78 kDa
cleaved-caspase-3 17 kDa 大鼠后发现，IBD 大鼠的 DAI 评分，血清中 TNF-α、IL-6
Bax 20 kDa 水平，肠上皮细胞凋亡率，结肠组织中cleaved-caspase-3、
Bcl-2 26 kDa
Bax 蛋白表达水平均降低；结肠长度变长；血清中 IL-10
GAPDH 37 kDa
水平和结肠组织中Bcl-2表达水平均升高；HE染色后发
A B C D E
A：Normal组；B：IBD组；C：FMN-L组；D：FMN-H组；E：FMN-H+ 现，结肠组织溃疡与水肿减轻，炎症细胞浸润减少，细胞
VTPF组。 排列较为整齐。这提示FMN可能是通过抑制肠上皮细
图4 各组大鼠结肠组织中Hippo/YAP信号通路与凋亡 胞凋亡、抗炎等途径来减轻IBD。
相关蛋白表达的电泳图
Hippo/YAP 信号通路在机体器官发育、细胞增殖与
表3 各组大鼠结肠组织中Hippo/YAP信号通路与凋亡 凋亡、肿瘤进展中具有重要的调控作用，其中 YAP 是
相关蛋白表达水平比较（x±s，n＝6） Hippo/YAP 信号通路的核心因子，能够与细胞核中其他
组别 YAP/GAPDH cleaved-caspase-3/GAPDH Bax/GAPDH Bcl-2/GAPDH 转录因子结合，而后启动靶基因的转录 。Hippo/YAP
[17]
Normal组 0.76±0.08 0.23±0.02 0.35±0.04 0.90±0.09 信号通路受到抑制会导致 YAP 活性增加。相关研究发
IBD组 0.24±0.02 a 0.87±0.09 a 0.93±0.09 a 0.32±0.03 a
FMN-L组 0.53±0.05 b 0.60±0.06 b 0.72±0.07 b 0.58±0.06 b 现，Hippo/YAP信号通路在调节肠屏障功能、维持肠道稳
FMN-H组 0.70±0.07 bc 0.31±0.03 bc 0.43±0.04 bc 0.83±0.08 bc 态和上皮细胞再生过程中尤为关键，YAP蛋白能够介导
FMN-H+VTPF组 0.58±0.06 d 0.54±0.05 d 0.66±0.07 d 0.62±0.06 d [18] [19]
肠上皮细胞的增殖 。Deng等 研究发现，YAP过表达
a：与Normal组比较，P＜0.05；b：与IBD组比较，P＜0.05；c：与
FMN-L组比较，P＜0.05；d：与FMN-H组比较，P＜0.05。 能够增加右旋糖酐硫酸钠诱导的结肠炎小鼠上皮细胞
的增殖和修复。在本研究中，IBD 组大鼠结肠组织中
4 讨论
[20]
YAP 表达水平较 Normal 组下降，与 Yan 等 的研究一
研究发现，IBD病情进展的中心环节是肠上皮屏障
致；经 FMN 干预后，大鼠结肠组织中 YAP 表达水平升
损伤，涉及肠上皮细胞的增殖与凋亡、肠黏膜的损伤与
高。这说明 FMN 能够促进结肠组织中 YAP 表达，进而
[10]
修复等重要过程 。在临床上，已有大量药物可用于缓
促进肠上皮细胞的增殖。为了验证FMN对YAP的促进
解IBD的炎症反应，但由于使用现有药物后容易出现不
作用，本研究使用YAP抑制剂VTPF与高剂量FMN联合
良反应或者疗效不佳等问题，所以寻找副作用小、安全
干预 IBD 大鼠，结果显示，VTPF 减轻了高剂量 FMN 对
[11]
性好且疗效佳的天然药物仍是治疗IBD的关键 。
IBD大鼠肠上皮细胞凋亡的抑制作用，这提示FMN可能
采用TNBS诱导IBD的产生是动物实验中常用的造
通过抑制 Hippo/YAP 信号通路减轻 IBD 大鼠肠上皮细
模方法，所得模型能准确模拟人类 IBD 发病过程和机
胞凋亡。
制 。TNF-α、IL-6、IL-10 是常见的炎症因子，被广泛用
[12]
综上所述，FMN 可能通过抑制 Hippo/YAP 信号通
于评估机体炎症水平的高低。在 UC 模型大鼠血清中，
路，促进 YAP 的表达，进而抑制 IBD 大鼠肠上皮细胞凋
TNF-α、IL-6高表达，IL-10低表达，提示模型大鼠的结肠
亡。本研究可为 IBD 的治疗提供新的靶点和参考。然
炎症反应强烈 [13―14] 。本研究利用TNBS建立大鼠IBD模
而，本研究也存在一些不足：一是关于 Hippo/YAP 信号
型，结果显示，与 Normal 组比较，IBD 组大鼠 DAI 评分，
通路的研究不够深入，未检测其上、下游基因（如LAST1/2、
血清中TNF-α、IL-6水平，肠上皮细胞凋亡率，结肠组织
TAZ 等）的水平；二是 FMN 对 IBD 的影响可能还存在其
中凋亡相关蛋白 cleaved-caspase-3、Bax 表达水平均升
他机制，本研究并未全面探索。未来笔者将通过 West‐
高；结肠长度变短；血清中 IL-10 水平和 Bcl-2 蛋白表达
ern blot法或高通量测序等技术继续深入研究。
水平均降低；HE 染色后发现，结肠组织细胞形态异常、
参考文献
排列紊乱，出现水肿、溃疡、出血现象，有大量的炎症细
[ 1 ] GILLILAND A，CHAN J J，DE WOLFE T J，et al. Patho‐
胞浸润。这说明经 TNBS 诱导后，大鼠出现了经典的
bionts in inflammatory bowel disease：origins，underlying
IBD病理损伤和症状，进一步证实了IBD模型大鼠构建
mechanisms，and implications for clinical care[J].Gastro‐
成功。 enterology，2024，166（1）：44-58.
FMN是一种抗炎效果较好的异黄酮类天然化合物。 [ 2 ] BRUNER L P，WHITE A M，PROKSELL S. Inflamma‐
[15]
如Wu等 研究发现，FMN能够通过抑制NLRP3炎症小 tory bowel disease[J]. Prim Care，2023，50（3）：411-427.
体通路激活，对右旋糖酐硫酸钠诱导的小鼠急性结肠炎 [ 3 ] ZHANG J，CEN L，ZHANG X F，et al. MPST deficiency
[16]
具有保护作用；Yang等 研究发现，FMN 能够通过减少 promotes intestinal epithelial cell apoptosis and aggra‐
· 1568 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 13 中国药房 2024年第35卷第13期