Page 81 - 《中国药房》2024年12期

and HB-EGF mRNA and proteins in the placenta and decidua tissue of soybean isoflavone groups increased significantly （P＜
0.05）， while pathological changes were improved significantly； cell apoptosis index in the placenta and decidua tissue， the
expressions of Fas， FasL mRNA and proteins in the placenta and Fas mRNA and protein in the decidua tissue decreased
significantly （P＜0.05）. The effect of soybean isoflavones was dose-dependent （P＜0.05）. CONCLUSIONS Soybean isoflavone
has protective effect on threatened miscarriage， the mechanism of which is related to down-regulating the expressions of Fas and
FasL mRNA and protein at the maternal-fetal interface， and up-regulating the expressions of mRNA and protein of PCNA and HB-
EGF.
KEYWORDS soybean isoflavone； threatened miscarriage； maternal-fetal interface； factor of apoptosis related； factor of
apoptosis related ligand； proliferating cell nuclear antigen； heparin binding epidermal growth factor

[1]
先兆流产是妊娠期常见病，可发展为难免流产 。 1.2 主要药品与试剂
黄体酮是先兆流产的常用药，可保护子宫内膜，为胎儿 大豆异黄酮原料药（批号 2104150，纯度＞98%）购
[2]
生长创造良好的环境 。有资料显示，先兆流产患者可 自北京迈瑞达科技有限公司；己烯雌酚原料药（批号
使用黄体酮保胎，该药可维持妊娠并防止子宫收缩 。 100033-201308，纯度＞98%）、米索前列醇原料药（批号
[3]
然而该药对母-胎界面免疫反应的调节作用并不理想， 410004-201502，纯度＞98%）均购自中国食品药品检定
[4]
仍有部分先兆流产患者发展为难免流产 ，故亟须研发 研究院；米非司酮片（批号211107，规格25 mg）购自华润
新的药物以积极调节母-胎界面免疫，提高先兆流产的 紫竹药业有限公司；黄体酮注射液（批号 202104153，规
疗效。 格50 mg）购自浙江仙琚制药股份有限公司；β-人绒毛膜
大豆异黄酮属于黄酮类化合物，与雌激素结构相 促性腺激素（β-human chorionic gonadotropin，β-HCG）、
似，可促进卵巢发育、调节性激素水平、改善生殖功 孕酮（progesterone，P）酶联免疫吸附检测（ELISA）试剂
[7]
能 [5―6] 。也有研究证实，大豆异黄酮可调节机体免疫 。 盒（批号分别为2108173、2109125）均购自上海酶联生物
先兆流产母-胎界面凋亡相关因子（factor of apoptosis re‐ 技术有限公司；苏木素-伊红（HE）染色试剂盒（批号
lated，Fas）/凋亡相关因子配体（factor of apoptosis related M202103A）购自北京索莱宝科技有限公司；原位末端标
ligand，FasL）通路被激活后，可传导死亡信号、下调增殖 记（TdT-mediated dUTP nick end labeling，TUNEL）试剂
细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）和 盒（批号 213107）购自北京普利莱基因技术有限公司；

肝 素 结 合 表 皮 生 长 因 子（heparin binding epidermal TRIzol 试 剂（批 号 2105183）购 自 美 国 Thermo Fisher
[8]
growth factor，HB-EGF）表达，进而引起滋养细胞凋亡 。 Scientific 公司；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶（so‐
若未及时调节上述通路的信号传导和分子表达，将会发 dium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，
展为难免流产。目前，大豆异黄酮是否可预防先兆流 SDS-PAGE）（批号 20210310A）购自北京兰博利德商贸
产，是否通过调节先兆流产母-胎界面 Fas/FasL 表达、促 有限公司；兔抗鼠 Fas、FasL、PCNA、HB-EGF、β-肌动蛋
进 PCNA 和 HB-EGF 表达发挥保胎作用尚不清楚。为 白（β-actin）单克隆抗体（稀释比例依次为1∶500、1∶500、
此，本研究开展了大豆异黄酮治疗先兆流产的效果观察 1∶1 000、1∶500、1∶500，批号分别为 210518、210610、
及作用机制探讨的动物实验，以期为先兆流产防治药物 210607、210712、210715）和荧光素标记的山羊抗兔Fas、
的研发提供参考。 FasL、PCNA、HB-EGF、β-actin 多克隆抗体（稀释比例依
1 材料 次为 1∶2 000、1∶2 000、1∶5 000、1∶2 000、1∶2 000，批号
1.1 主要仪器 分别为210611、210624、210615、210811、210819）均购自
本研究所用主要仪器包括 Multiskan FC 型酶标仪、 艾博抗（上海）贸易有限公司。

Sorvall ST 8 型离心机（美国 Thermo Fisher Scientific 公 1.3 动物
司），DM750 型光学显微镜（德国 Leica 公司），DH-160I 本研究所用动物为清洁级雌性 SD 大鼠 60 只、雄性
型二氧化碳培养箱（苏州威尔实验用品有限公司）， SD 大鼠 30 只，7～9 周龄，体重 260～300 g，购自郑州大
FQD-48A型聚合酶链式反应（polymerase chain reaction， 学实验动物中心[生产许可证号为 SCXK（豫）2022-
PCR）仪（上海昨非实验室设备有限公司），DYCP-31CN 0001]。本实验经郑州卫生健康职业学院实验动物伦理
型蛋白质凝胶电泳仪（北京六一仪器厂）等。 委员会审批后实施（批准号：ZZHVC-2022-003）。

中国药房 2024年第35卷第12期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 12 · 1483 ·