Page 78 - 《中国药房》2024年10期

表4 各组 MC3T3-E1 细胞中 FoxO3/Wnt/β-catenin 信
号通路相关蛋白表达检测结构（x±s，n＝6）
组别 FoxO3/GAPDH Wnt/GAPDH β-catenin/GAPDH
对照组 0.16±0.04 0.63±0.10 0.75±0.12
模型组 0.78±0.09 a 0.21±0.05 a 0.26±0.08 a
空载组 0.79±0.08 0.20±0.06 0.25±0.07
A.对照组 B.模型组 C.空载组 梓醇组 0.20±0.06 b 0.60±0.11 b 0.71±0.13 b
梓醇+FoxO3过表达组 0.73±0.07 c 0.23±0.07 c 0.28±0.06 c
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与梓醇组
比较，P＜0.05。
4 讨论

骨代谢过程中 ROS 诱导的氧化应激可打破骨形成
D.梓醇组 E.梓醇+FoxO3过表达组 和骨吸收的平衡，从而抑制成骨分化及骨量丢失，这是
图4 各组MC3T3-E1细胞中ROS的显微镜图（DCFH- 引发骨质疏松的主要致病因素 。因此本研究采用
[10]
DA荧光探针标记） H2O2诱导建立成骨细胞氧化应激模型来对骨质疏松发

表3 各组MC3T3-E1细胞中抗氧化酶活性与炎症因子 生过程中的成骨细胞进行考察，结果显示，以400 μmol/L
水平检测结果（x±s，n＝6） H2O2诱导MC3T3-E1细胞，可促使ROS和炎症因子IL-6、
组别 CAT/（U/mg prot） SOD/（U/mg prot） IL-6/（pg/mL） IL-1β/（pg/mL）
IL-1β 大量产生，诱发细胞氧化应激和炎症反应，导致
对照组 5.75±0.68 7.34±0.87 152.74±21.63 40.86±9.15
模型组 1.93±0.35 a 2.10±0.42 a 568.39±30.12 a 108.53±14.20 a MC3T3-E1细胞活力和成骨分化降低，凋亡细胞增多，提
空载组 1.62±0.30 1.98±0.46 584.62±28.35 115.62±12.57 示成骨细胞氧化应激模型构建成功，可模拟骨质疏松发
梓醇组 5.06±0.51 b 6.51±0.74 b 169.15±23.40 b 49.73±9.36 b 生过程中成骨细胞的病理症状。
梓醇+FoxO3过表达组 2.34±0.42 c 2.58±0.53 c 543.86±29.74 c 96.20±13.18 c
梓醇可通过减轻局部炎症，促进成骨和血管生成，
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与梓醇组
抑制破骨细胞分化，而在骨组织工程中发挥成骨作
比较，P＜0.05。
用 [8，11] ，还可在体内外模型中起到明显抗骨质疏松作
3.6 细胞中 FoxO3/Wnt/β-catenin 信号通路相关蛋白
[12]
用 。 本 研 究 结 果 显 示 ，梓 醇 可 升 高 H2O2 诱 导 的
表达检测结果
MC3T3-E1 细胞活力、ALP 活性、钙结节 OD 值、CAT 和
与对照组比较，模型组 MC3T3-E1 细胞中 FoxO3 蛋
SOD 活性，降低其凋亡率、ROS 水平以及 IL-6、IL-1β 水
白表达水平显著升高（P＜0.05），Wnt、β-catenin 蛋白表
平，表明梓醇可清除ROS，减少炎症因子产生，提高抗氧
达水平均显著降低（P＜0.05）。与模型组比较，空载组 化酶活性，抑制氧化应激和炎症反应，减轻 H2O2诱导的
MC3T3-E1 细胞中 FoxO3、Wnt、β-catenin 蛋白表达水平 成骨细胞损伤。
均无明显变化（P＞0.05）；梓醇组 MC3T3-E1 细胞中 FoxO3/Wnt/β-catenin 是调控炎症、氧化应激、成骨
FoxO3蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），Wnt、β-catenin 及破骨分化的重要信号，在骨代谢和骨形成中具有关键

蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。与梓醇组比较， 作用。上调 FoxO3 蛋白表达可抑制 Wnt/β-catenin 信号
激活，诱发炎症因子过量产生，进而对正常骨形成造成
梓醇+FoxO3 过表达组 MC3T3-E1 细胞中 FoxO3 蛋白表
[13]
负面影响 ；降低 FoxO3 蛋白表达可上调 β-catenin 蛋白
达水平显著升高（P＜0.05），Wnt、β-catenin 蛋白表达水
[14]
表达，进而促进骨形成并稳定成骨/破骨细胞生成 ；缺
平均显著降低（P＜0.05）。结果见图5、表4。
乏FoxO3蛋白表达可激活Wnt/β-catenin信号传导，从而
[15]
β-catenin 94 kDa 减轻与年龄相关的骨丢失，改善骨缺损愈合 。本研究
结果显示，与对照组比较，模型组细胞中 FoxO3 蛋白表
FoxO3 75 kDa
达水平显著升高，Wnt、β-catenin蛋白表达水平均显著降
Wnt 41 kDa
低，经梓醇处理后可显著逆转上述蛋白的变化，表明
GAPDH 36 kDa FoxO3/Wnt/β-catenin 信号参与了梓醇减轻 H2O2诱导成
对照组 模型组 空载组 梓醇组 梓醇+FoxO3 骨细胞损伤的过程；以梓醇处理的同时过表达 FoxO3，
过表达组
图5 各组 MC3T3-E1 细胞中 FoxO3/Wnt/β-catenin 信 可减弱梓醇对 H2O2诱导成骨细胞氧化应激和炎症反应
号通路相关蛋白表达的电泳图 的抑制作用，削弱其对H2O2诱导成骨细胞凋亡的减轻作

· 1224 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 10 中国药房 2024年第35卷第10期