Page 72 - 《中国药房》2024年10期

低、高质量浓度下，内标归一化基质因子的 RSD 分别为 700
700
3.2%、9.6%（n＝6），提取回收率分别为 110.77%、95.04% 600 木犀草素原料药组
600 木犀草素固体分散体组
（n＝6），RSD分别为13.2%、9.9%（n＝6），均符合2020年 500 500
版《中国药典》要求 。 400 （ ng/L ） 400
[6]
300
2.3.10 稳定性试验 （ ng/L ） c/ 300 c/ 200
按照“2.3.8”项下方法制备高、低质量浓度（800、2 100
200 0 0 4 8 12
ng/mL）的 质 控 样 品 ，每 个 浓 度 平 行 制 备 6 份 ，按 照 t/h
100
“2.3.5”项下方法处理后，再按照“2.3.1”和“2.3.2”项下条
件进样分析，分别考察样品在自动进样器4 ℃放置24 h、 0
0 6 12 18 24 30 36 42 48
室温放置4 h、冻融循环3次、－80 ℃放置7 d的稳定性。 t/h
图3 木犀草素原料药和木犀草素固体分散体在Beagle
结果显示，低质量浓度样品在上述条件下稳定性试验的
犬体内的药时曲线（n＝6）
RSD 分别为 11.4%、11.7%、14.9%、9.8%（n＝6），高质量
浓度样品在上述条件下稳定性试验的 RSD 分别为 木犀草素原料药组，其相对生物利用度为 348%。与木
9.3%、11.4%、5.2%、11.1%（n＝6），表明不同条件下各样 犀草素原料药组比较，木犀草素固体分散体组Beagle犬
[6]
品稳定性良好，且均符合2020年版《中国药典》要求 。 体内木犀草素的cmax和AUC均显著升高，表观分布容积
2.4 木犀草素固体分散体在 Beagle 犬体内的药动学 （Vz/F）显著降低（P＜0.05）。结果见表3。
研究 表3 2 组 Beagle 犬体内木犀草素的药物学参数比较
（x±s，n＝6）
2.4.1 分组给药及血药浓度检测
参数 木犀草素原料药组 木犀草素固体分散体组
分别将木犀草素原料药和木犀草素固体分散体过
AUC 0－t/（ng·h/L） 473.226±273.251 1 645.626±480.269 a
80目筛，装入胶囊，备用。将12只Beagle犬随机分为木 AUC 0－∞/（ng·h/L） 474.305±274.432 1 645.721±480.182 a
MRT 0－t/h 4.941±1.425 4.193±0.434
犀草素原料药组和木犀草素固体分散体组，每组6只，均
MRT 0－∞/h 5.004±1.462 4.197±0.433
口服相应药物，给药剂量相当于木犀草素 10 mg/kg（根 t 1/2/h 4.556±1.681 3.631±0.916
t max/h 2.125±1.046 1.375±0.685
据人临床应用剂量换算）。所有 Beagle 犬实验前禁食
V z/F/（L/kg） 166.154±85.514 36.138±18.262 a
12 h（自由饮水），给药后4 h进食。分别于给药前（0 h）、 CL z/F/（ng·h/L） 27.299±15.492 6.514±1.832
给药后5、10、15、30、45 min和1、2、4、6、8、10、12、24、48 h c max/（ng/L） 95.939±26.772 539.540±122.664 a
a：与木犀草素原料药组比较，P＜0.05；MRT：平均滞留时间；t 1/2：
经前肢内侧皮下头静脉或后肢外侧小隐静脉取血3 mL，
半衰期；t max：达峰时间；CL z/F：清除率。
置于乙二胺四乙酸抗凝试管中，离心 5 min，取上层血
3 讨论
浆，于－80 ℃保存。取血浆，室温放置自然解冻后，按照
3.1 检测方法的建立
“2.3.5”项下方法处理后，再按照“2.3.1”和“2.3.2”项下条
本课题组前期研究木犀草素固体分散体的制备工
件进样分析，记录色谱图，并按标准曲线计算木犀草素 艺时，发现采用高效液相色谱法测定木犀草素溶出度的
的血药浓度。 灵敏度较低，不能检测血浆中的药物浓度 ，故本研究采
[5]
2.4.2 药时曲线绘制及药动学参数计算 用灵敏度较高的 UPLC-MS/MS 法测定 Beagle 犬血浆中
根据不同采样时间的木犀草素血药浓度数据绘制 木犀草素的浓度。UPLC-MS/MS 法常用的流动相包括
药时曲线（图 3）。由图 3 可知，木犀草素固体分散体组 甲醇-水和乙腈-水，但在实验中为了获得更好的离子化
Beagle 犬体内木犀草素的血药浓度明显高于木犀草素 效率，可加入低浓度的挥发性电解质，如甲酸、乙酸、甲
原料药组。 酸铵等。本课题组前期采用乙腈-水为流动相时，发现

运用 DAS 3.2.8 药动学软件，采用非房室模型计算 木犀草素的保留时间适宜，但峰形略有拖尾，而加入
给药后 Beagle 犬体内木犀草素的药动学参数，再根据 t 0.05%甲酸后，木犀草素的峰形得到明显改善，故选用乙
时间内药时曲线下面积（AUC0－t ）计算相对生物利用度 腈-0.05%甲酸溶液（50∶50，V/V）作为本研究的流动相。
（表 3）。采用 SPSS 22 软件对数据进行统计分析，组间 3.2 内标的选择
比较采用单因素方差分析，检验水准 α＝0.05。结果显 检测生物样品中药物浓度时，使用内标可降低基质
示，木犀草素固体分散体组Beagle犬体内木犀草素的峰 效应的影响，减少误差，常推荐使用同位素标记的内标。
浓度（cmax ）是木犀草素原料药组的 5.62 倍，AUC 亦高于 但实验时常因同位素标记的内标价格高，且难以获得，

· 1218 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 10 中国药房 2024年第35卷第10期