Page 41 - 《中国药房》2024年10期

16 kDa 轻髓核细胞外基质降解，从而延缓LDH的炎症进程；川
LC3B 14 kDa
芎中含有的阿魏酸，可以改善神经根水肿变性，提高机
[11]
BNIP3 28 kDa 体疼痛阈值，缓解炎症刺激导致的疼痛 ；木瓜中提取
的木瓜凝乳蛋白酶，已被作为髓核溶解剂用于LDH的微
65 kDa
TRAF-3
[12]
创治疗 。因此，YQHX治疗LDH可行。
TRAF-2 60 kDa 在 LDH 的发生发展中，炎症反应是重要的一环。
IL-1β、IL-6及TNF-α等作为临床常见炎症因子，均在髓
p-NF-κB p65 65 kDa
[13]
核组织中呈高表达 。自噬作为早期自我适应性机制，
NF-κB p65 65 kDa 可通过清除受损的细胞器来为组织的稳态恢复提供营
[14]
养物质。有研究表明，自噬与椎间盘疾病密切相关 。
β-actin 42 kDa
此外，自噬还与炎症联系紧密，炎症相关信号通路 NF-
假手术组 模型组 QNZ组 YQHX组 YQHX+
QNZ组 κB可通过上调Beclin-1和其他自噬相关蛋白的转录，增
图5 各组大鼠椎间盘组织中 NF-κB p65、p-NF-κB
[15]
高自噬，降低炎症反应 。TNF受体相关家族中TRAF-2、
p65、TRAF-2、TRAF-3、BNIP3、LC3B 蛋白表达
TRAF-3是NF-κB非经典通路的重要衔接蛋白。研究发
的电泳图
现，NF-κB 信号通路在 LDH 病理过程中被激活，并参与
表3 各 组 大 鼠 椎 间 盘 组 织 中 TRAF-2、TRAF-3、 LDH的发病机制，活化的NF-κB信号通路促使TNF-α等
BNIP3、LC3B蛋白表达水平和NF-κB p65磷酸化 促炎因子合成和释放，进而推动炎症级联反应；在炎症
水平（x±s，n＝3） 过程中，NF-κB信号通路还可通过改变关键自噬调节因
[16]
p- NF-κB p65/NF- 子的活性来调控自噬 。本研究结果显示，与假手术组
组别 TRAF-2 TRAF-3 BNIP3 LC3B
κB p65 比较，模型组大鼠椎间盘组织中 TRAF-2、TRAF-3 蛋白
假手术组 0.27±0.02 0.51±0.05 0.45±0.06 0.30±0.23 0.45±0.07
模型组 1.01±0.22 a 0.98±0.19 a 0.87±0.06 a 1.03±0.13 a 0.86±0.05 a 表达水平及 TNF-α 水平、NF-κB p65 磷酸化水平均显著
QNZ组 0.33±0.02 b 0.69±0.10 b 0.66±0.07 b 0.68±0.16 b 0.75±0.05 b 升高；经QNZ干预后，大鼠椎间盘组织中上述指标均显
YQHX组 1.40±0.35 bcd 1.22±0.15 bc 1.30±0.24 bc 1.25±0.09 bc 1.03±0.07 bc 著降低；经 YQHX 干预后，大鼠椎间盘组织中 TRAF-2、
YQHX+QNZ组 0.57±0.16 bc 1.31±0.08 bc 1.11±0.02 bc 1.33±0.18 bc 1.00±0.05 bc
TRAF-3 蛋白表达水平和 NF-κB p65 磷酸化水平均显著
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与QNZ 升高，TNF-α 水平显著降低，推测 YQHX 可能进一步促
组比较，P＜0.05；d：与YQHX+QNZ组比较，P＜0.05。
进了NF-κB信号通路活化，并有良好的抗炎疗效。为验
表4 各组大鼠椎间盘组织中 NF-κB p65、LC3B、p62、
证该推测，本研究在 YQHX 基础上添加 QNZ，结果显
BNIP3及Beclin-1的mRNA表达水平（x±s，n＝3） 示，与YQHX组比较，YQHX+QNZ组大鼠椎间盘组织中
组别 NF-κB p65 LC3B p62 BNIP3 Beclin-1 TRAF-3蛋白表达水平有降低趋势，NF-κB p65磷酸化水
假手术组 1.00±0.04 1.00±0.01 1.00±0.08 1.00±0.02 1.00±0.02 平显著降低，TNF-α 水平显著升高，提示 YQHX 可促进
模型组 2.30±0.45 a 1.52±0.04 a 0.33±0.02 a 1.51±0.06 a 1.39±0.09 a
QNZ组 1.25±0.11 b 1.01±0.01 b 0.78±0.01 b 1.15±0.08 b 1.08±0.04 b NF-κB信号通路激活，减轻炎症反应。
YQHX组 5.00±0.18 bcd 2.03±0.02 bcd 0.21±0.02 bcd 2.23±0.18 bcd 1.96±0.26 bcd BNIP3 作为 Bcl-2 家族成员的促凋亡蛋白，可与自
YQHX+QNZ组 2.97±1.17 bc 1.71±0.06 bc 0.31±0.03 c 1.60±0.15 a 1.56±0.18 bc
噬关键因子Beclin-1竞争结合Bcl-2，使Beclin-1与Bcl-2
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与QNZ 解离，诱导自噬激活，同时Beclin-1可诱导其他自噬相关
组比较，P＜0.05；d：与YQHX+QNZ组比较，P＜0.05。
蛋白定位到自噬泡，是自噬小体形成过程中的重要分
4 讨论 [17]
子 。自噬小体作为自噬过程的标志性结构，是检测自
LDH 属中医学“腰痛”“痹证”范畴。古代医家多以
噬的唯一金标准，而 LC3 是自噬体膜蛋白，可作为检测
“腰痛”论述此病，认为腰与肾关系最为密切。如《素问·
自噬活性的标志物。本研究结果显示，与假手术组比较，
脉要精微论》云“腰者，肾之府，转摇不能，肾将惫矣。”姜
模型组大鼠椎间盘组织中自噬小体数量增加，BNIP3、
宏教授临证秉持“不通则痛”“不荣则痛”的理念，在治疗 Beclin-1 阳性细胞百分比和 LC3B 水平均显著升高，p62
时寓通于补，强调益肾气、祛风湿、止痹痛，并据此总结 mRNA 表达水平显著降低；经 YQHX 干预后，自噬小体
[10]
出 YQHX 治疗 LDH 。方中生黄芪为君药，益气固表； 数量进一步增加，BNIP3、Beclin-1 阳性细胞百分比和
辅以当归补血、活血，防己利水消肿，白芥子温化寒痰， LC3B 水平均显著升高，p62 mRNA 表达水平显著降低，
三者共为臣药；川芎行气、活血、止痛，助当归活血、行 提示 YQHX 可促进大鼠椎间盘自噬水平升高，其发挥
血，木瓜祛湿、通络，同助生黄芪利水，地龙善软坚通络， 促进椎间盘病理损伤修复作用的机制可能为通过介导
共为佐药。诸药合用共奏益气行血、祛风除湿、通络除 NF-κB信号通路促进自噬相关分子表达量增加所致。为
痹之功效。现代药理学研究表明，黄芪中的黄芪总苷、 验证该推测，本研究在 YQHX 基础上添加 QNZ，结果显
黄芪多糖、川芎中的洋川芎内酯A及当归中的防己碱具 示，YQHX促进大鼠椎间盘自噬水平升高作用可被部分
有较强的抗炎作用，能够抑制髓核细胞的炎症反应，减 逆转。

中国药房 2024年第35卷第10期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 10 · 1191 ·