Page 61 - 《中国药房》2024年9期
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          理作用 。如方中的酒当归、川芎、白芷、细辛、羌活等药                          表1 15批清上蠲痛汤样品组方饮片的批次产地信息
          材轻清上达，可疏风通络、松透伏邪，与该方主治头痛相                           编号 酒当归 川芎 白芷 细辛 羌活 独活 防风 菊花 蔓荆子 麸炒苍术 酒黄芩 麦冬 甘草
          符，故对清上蠲痛汤挥发油类成分进行探索和研究具有                            S1  海东 德阳 亳州 通化 马尔康 绵阳 保定 盐城 九江  赤峰  承德 三台 定西
                                                              S2  陇南 德阳 保定 本溪 绵阳 绵阳 赤峰 盐城 宜春  承德  运城 三台 兰州
          重要意义。
                                                              S3  定西 成都 亳州 通化 阿坝 宜昌 赤峰 嘉兴 宜春  承德  日照 三台 武威
              目前，关于清上蠲痛汤的研究多集中于临床应用以                          S4  定西 眉山 保定 本溪 绵阳 巫溪 承德 盐城 九江  呼伦贝尔 日照 安州 兰州
          及该方水煎液中水溶性成分的指纹图谱、特征图谱、煎                            S5  陇南 德阳 焦作 抚顺 绵阳 巫溪 保定 盐城 宜春  赤峰  日照 安州 赤峰
                                                              S6  陇南 眉山 保定 抚顺 阿坝 绵阳 保定 盐城 九江  承德  运城 安州 定西
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          煮工艺与质量控制等方面 。虽然有学者对该方中挥发
                                                              S7  海东 眉山 焦作 本溪 小金 绵阳 承德 盐城 景德镇 赤峰  承德 安州 兰州
          油类成分进行了相关研究，但仍侧重于方中的水溶性成                            S8  定西 眉山 焦作 本溪 绵阳 恩施 承德 盐城 宜春  承德  日照 安州 白银
          分，对挥发油类成分的研究尚不够全面。鉴于此，本研                            S9  海东 成都 亳州 通化 松潘 巫溪 赤峰 盐城 宜春  呼伦贝尔 承德 三台 定西
          究拟建立清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的超高效液相色                             S10  定西 德阳 亳州 本溪 绵阳 恩施 赤峰 黄冈 景德镇 赤峰  日照 三台 兰州
                                                              S11  陇南 德阳 保定 抚顺 阿坝 宜昌 承德 盐城 九江  承德  运城 三台 定西
          谱（UPLC）特征图谱，并利用超高效液相色谱串联四极                          S12  陇南 成都 焦作 通化 小金 恩施 保定 黄冈 景德镇 呼伦贝尔 运城 三台 定西
          杆飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF/MS）法和气质联用（GC-                    S13  海东 成都 焦作 抚顺 小金 绵阳 保定 黄冈 景德镇 呼伦贝尔 承德 三台 武威
          MS）法分析和鉴定该方中的挥发油类成分，旨在为该方                           S14  海东 眉山 亳州 通化 松潘 巫溪 承德 黄冈 九江  赤峰  运城 三台 鄂尔多斯
                                                              S15  海东 成都 保定 抚顺 阿坝 十堰 赤峰 黄冈 景德镇 呼伦贝尔 承德 三台 花岔
          基准样品标准的制定、后续制剂工艺的研究及质量标准
          的建立提供借鉴。                                           芷 22.38 g、细辛 6.72 g、羌活 22.38 g、独活 22.38 g、防风
          1 材料                                               22.38 g、菊花 11.22 g、蔓荆子 11.22 g、麸炒苍术 22.38 g、
                                                             酒黄芩33.60 g、麦冬22.38 g、甘草6.72 g，粉碎（过4目筛
          1.1 主要仪器
                                                             网），加水2 438 mL，浸泡30 min，煮沸后再煎煮20 min，
              本研究所用的主要仪器包括 Agilent 1290 型 UPLC
          仪、Agilent 6530型串联四极杆飞行时间质谱仪、8890A-                 200 目筛趁热滤过；药渣加水 1 896 mL，煮沸后再煎煮
          7000D型GC-MS仪（美国Agilent公司），JJ500型电子天                15 min，200目筛趁热滤过；合并2次滤液，即得。
          平（常熟市双杰测试仪器厂），ME204型万分之一电子分                        2.2.2 供试品溶液
          析天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]，POMEX                          （1）全方供试品溶液。将“2.2.1”项下制备的清上蠲
          型挥发油提取器（北京北玻博美玻璃有限公司），Milli-                       痛汤标准汤剂趁热转移至5 000 mL圆底烧瓶中，加入玻
          Q IQ7005型纯水系统（美国Millipore公司）等。                     璃珠数粒，连接挥发油提取装置，自收集器上端加水使
           ®
          1.2 主要药品与试剂                                        其充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶中，电
              甲基丁香酚对照品（批号 111642-200301，纯度＞                  热套加热并保持微沸状态，回流4 h后冷却；由提取器上
          98.0%）购自中国食品药品检定研究院；洋川芎内酯A对                        端加入乙酸乙酯1 mL，收集乙酸乙酯层至2 mL量瓶中，
          照品（批号 ST10580120，纯度＞98.0%）、藁本内酯对照                  用乙酸乙酯洗涤冷凝管及挥发油提取器内壁，洗液并入
          品（批号 RS04251081，纯度＞98.0%）均购自上海诗丹德                  同一量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，摇匀，即得清上蠲痛标
          生物技术有限公司；甲醇、乙腈、甲酸、磷酸、冰醋酸为色                         准汤剂挥发油。从已收集的挥发油中精密吸取100 μL，
          谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。                                置于2 mL量瓶中，加甲醇稀释并定容，摇匀，滤过，取续
              清上蠲痛汤所用药材均购自道地产区或主产区。                          滤液，即得全方供试品溶液（即标准汤剂挥发油）。
          药材基原、药用部位、产地及采收加工均明确，药材经江                             （2）单味药供试品溶液。分别按“2.2.1”项下称样量
          阴天江药业有限公司药材鉴定高级工程师唐波鉴定均                            及方法制备单味药标准汤剂，再按“2.2.2（1）”项下方法
          为真品。采用随机数字表法将 15 批清上蠲痛汤组方饮                         制备单味药供试品溶液。
          片进行组合，15批饮片批次产地信息见表1。                                 （3）阴性制剂供试品溶液。分别按“2.2.1”项下称样
          2 方法与结果                                            量及方法制备各单味药的缺味阴性标准汤剂，再按
          2.1 色谱条件                                          “2.2.2（1）”项下方法制备成各缺味阴性制剂供试品溶液。
              采 用 Waters  CORTECS  C18 （100  mm×2.1  mm，1.6   2.3 清上蠲痛汤标准汤剂挥发油 UPLC 特征图谱的建
          μm）色谱柱，以乙腈（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱                       立及分析
         （0～2  min，25%A→34%A；2～13  min，34%A；13～15            2.3.1 方法学考察
          min，34%A→35%A；15～27  min，35%A；27～28  min，             （1）精密度试验。取清上蠲痛汤（编号 S1）饮片，先
          35%A→25%A；28～32 min，25%A）；柱温为 30 ℃；检测              按“2.2.1”项下方法制备标准汤剂，再按“2.2.2（1）”项下
          波长为235 nm；流速为0.3 mL/min；进样量为0.5 μL。                方法制备全方供试品溶液，最后按“2.1”项下色谱条件连
          2.2 溶液的制备                                          续进样 6 次。以稳定性、分离度好的 8 号峰作为参照峰
          2.2.1 标准汤剂                                        （S），计算得到各特征峰相对保留时间的 RSD 均＜
              本研究根据清上蠲痛汤最佳煎煮工艺 ，放大 6 倍                       0.05%、相对峰面积的 RSD 均＜0.02%（n＝6），表明方法
                                               [2]
          进行标准汤剂的制备：取酒当归22.38 g、川芎22.38 g、白                  精密度良好。


          中国药房  2024年第35卷第9期                                                China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 9    · 1083 ·
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