Page 32 - 《中国药房》2024年9期

3.5 脑震宁颗粒对大鼠海马组织线粒体分裂、融合蛋白 4 讨论
表达的影响 脑震荡属于中医“头痛”“外伤性脑病”范畴，其证初
与正常组比较，模型组大鼠海马组织 Drp1、Fis1 的 期多实，后期多虚实夹杂。《黄帝内经》记载“若有所坠
[9]
荧光强度均显著升高（P＜0.01），Mfn1、Opa1 的荧光强 堕，恶血留内而不去”。机械外力作用于脑络，致气血
度均显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，各给药组大 逆乱、瘀血阻滞、元神失养，日久或痰瘀阻窍，或气血耗
鼠海马组织 Drp1、Fis1 的荧光强度均显著降低（P＜ 损，出现昏胀头晕、记忆模糊等精神障碍。脑震宁颗粒
0.01），Mfn1、Opa1 的荧光强度均显著升高（P＜0.05 或 中川芎、当归、地龙、丹参用以除离经之血，行气血，缓头
P＜0.01）。结果见表2。 痛；炒酸枣仁、柏子仁以养心安神、宁心定志；生地黄、丹
表2 各组大鼠海马组织 Drp1、Fis1、Mfn1、Opa1 的荧 皮清血分之热；生地黄、当归补血分之不足；茯苓、陈皮、
光强度结果比较（x±s，n＝6，AU） 竹茹降逆和胃，化神窍之痰。现代药理学研究证明，川
组别 Drp1 Fis1 Mfn1 Opa1 芎、炒酸枣仁等药物可以减少细胞凋亡，提高ATP含量，
正常组 31.22±2.01 29.96±1.18 97.37±3.92 102.42±1.68 减轻线粒体结构和功能损伤，改善机体症状 [10―11] 。王学
模型组 75.97±3.07 a 64.59±3.93 a 46.41±1.07 a 53.73±5.03 a [12]
吡拉西坦组 39.95±1.56 b 45.63±1.73 b 57.81±1.79 b 62.92±3.24 c 建等 通过临床研究表明，脑震宁颗粒可以缓解脑外伤
脑震宁颗粒低剂量组 48.29±4.34 b 50.15±0.93 b 58.41±0.51 b 71.35±7.08 b 后头痛症状，纠正神经功能紊乱。基于以上药物的神经
脑震宁颗粒中剂量组 44.01±1.39 b 41.87±0.54 b 68.29±4.66 b 91.10±1.54 b 保护作用，笔者进一步探讨了脑震宁颗粒对 MCC 模型
脑震宁颗粒高剂量组 40.13±1.77 b 50.12±2.45 b 66.68±3.07 b 69.74±3.49 b
大鼠线粒体能量代谢的调节机制。
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组
比较，P＜0.05。 线粒体是一种多功能的半自主性细胞器，它通过三
3.6 脑震宁颗粒对大鼠海马组织线粒体生物合成和通 羧酸循环和氧化磷酸化反应还原氧气，维持机体的氧化
路蛋白表达的影响 平衡，合成 ATP，释放能量，在参与机体细胞程序性死
与正常组比较，模型组大鼠海马组织PGC-1α、NRF-1、 亡、氧化应激、细胞增殖与代谢等方面发挥着重要作
[13]
TFAM、Wnt-3a、β-catenin蛋白表达水平均显著降低（P＜ 用 。颅脑作为机体的生命中枢，与线粒体的关系十分
0.01）。与模型组比较，吡拉西坦组和脑震宁颗粒低、中 密切。有研究表明，在帕金森病小鼠模型中，小鼠中脑
剂量组大鼠海马组织PGC-1α、NRF-1、TFAM、Wnt-3a、β- 的神经元数量减少，炎性因子表达增加，同时线粒体分
[14]
catenin蛋白表达水平均显著升高（P＜0.01），脑震宁颗粒高 裂、融合蛋白失衡 。可见，颅脑损伤类疾病多伴随线
剂量组大鼠海马组织PGC-1α、TFAM、Wnt-3a、β-catenin蛋 粒体和神经元的异常，且二者多相互影响。本课题组前
白表达水平均显著升高（P＜0.01）。结果见表3、图2。 期研究表明，脑震宁颗粒可以通过改善线粒体结构和功
表3 各组大鼠海马组织线粒体生物合成和通路蛋白表 能，增加 ATP 含量，对 MCC 模型大鼠发挥神经保护作
[7]
达水平比较（x±s，n＝6） 用，并提高其学习记忆能力 ，但并未深入探究其核心靶
组别 PGC-1α/β-actin NRF-1/β-actin TFAM/β-actin Wnt-3a/β-actin β-catenin/β-actin 点和机制。在本实验中，模型组大鼠海马组织线粒体
正常组 0.55±0.02 0.73±0.04 0.80±0.03 0.91±0.02 0.63±0.03 ATP含量显著降低，线粒体出现明显肿胀，嵴大量断裂、
模型组 0.24±0.01 a 0.34±0.03 a 0.36±0.03 a 0.41±0.03 a 0.21±0.02 a 减少，部分线粒体膜内髓样变，同时大鼠的运动探索能
吡拉西坦组 0.43±0.02 b 0.71±0.02 b 0.65±0.03 b 0.68±0.02 b 0.49±0.03 b
脑震宁颗粒低剂量组 0.42±0.02 b 0.58±0.02 b 0.66±0.05 b 0.56±0.03 b 0.42±0.02 b 力和学习记忆能力下降。给予脑震宁颗粒干预后，脑震
脑震宁颗粒中剂量组 0.46±0.02 b 0.42±0.02 b 0.74±0.05 b 0.74±0.04 b 0.57±0.02 b 宁颗粒各剂量组大鼠海马组织线粒体 ATP 含量显著升
脑震宁颗粒高剂量组 0.34±0.03 b 0.36±0.03 0.59±0.03 b 0.56±0.03 b 0.47±0.02 b
高，神经元内线粒体结构明显改善，大鼠的运动探索和
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01。
学习记忆能力有所提高。可见，脑震宁颗粒可以修复神
PGC-1α 90 kDa 经元线粒体损伤，提高大鼠运动探索和学习记忆能力。
Wnt 信号通路是一组由蛋白质 Wnt 和受体蛋白结
NRF-1 70 kDa
[15]
合激发，多种蛋白参与，高度保守的信号转导途径 。
TFAM 25 kDa
它在胚胎发育、器官发生、组织再生与稳态中起着关键
Wnt-3a 42 kDa 作用 [16―17] 。有研究表明，缺血再灌注损伤中，Wnt通路的
关键分子糖原合成酶激酶 3β 表达增加，β-catenin 被降
β-catenin 92 kDa
解，诱导神经元细胞发生凋亡，提示 Wnt 信号通路对神
β-actin 42 kDa
经元细胞的增殖分化起重要作用；当 Wnt 信号激活时，
A B C D E F
A：正常组；B：模型组；C：吡拉西坦组；D：脑震宁颗粒低剂量组； Wnt 与其受体结合激活蓬乱蛋白 Dsh，抑制了糖原合成
[18]
E：脑震宁颗粒中剂量组；F：脑震宁颗粒高剂量组。 酶激酶3β，促进β-catenin与下游基因的转录 。研究发
图2 各组大鼠海马组织线粒体生物合成和通路蛋白表 现，Wnt信号通路通过与线粒体生物合成及融合与分裂
达的电泳图 的相互作用来影响神经元细胞的正常发育和功能发

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